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丹参对低磷胁迫的生理响应及基因SmMYB98b和SmMYB9a的功能研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第14-25页
    1.1 丹参概述第14-15页
        1.1.1 丹参的应用第14页
        1.1.2 丹参分布第14页
        1.1.3 丹参有效成分第14页
        1.1.4 绒毛鼠尾草第14-15页
    1.2 丹参次生代谢调控第15-16页
        1.2.1 丹酚酸合成及其调控第15页
        1.2.2 丹参酮合成及其调控第15-16页
    1.3 生态因子对药材品质的影响第16-17页
        1.3.1 生态因子影响药材次生代谢第16-17页
        1.3.2 无机元素对丹参次生代谢的影响第17页
    1.4 低磷胁迫对植物生长发育及次生代谢积累的影响第17-23页
        1.4.1 土壤中磷素现状第17页
        1.4.2 植物适应低磷胁迫的生理机制第17-19页
        1.4.3 植物适应低磷胁迫的分子机制第19-22页
        1.4.4 低磷胁迫对植物代谢的影响第22-23页
    1.5 MYB转录因子第23-24页
        1.5.1 MYB转录因子概述第23页
        1.5.2 R2R3-MYB转录因子参与植物次生代谢的调控第23页
        1.5.3 R2R3-MYB转录因子参与植物对低磷的响应第23-24页
    1.6 本研究的目的意义第24-25页
第二章 低磷胁迫对丹参植株生长及活性成分积累的影响第25-36页
    2.1 引言第25页
    2.2 实验材料,试剂与仪器第25-27页
        2.2.1 实验材料第25页
        2.2.2 主要仪器第25-26页
        2.2.3 试剂及配置第26-27页
    2.3 实验方法第27-30页
        2.3.1 生物量测定第27页
        2.3.2 植物有效磷含量的测定第27页
        2.3.3 叶绿素含量测定第27-28页
        2.3.4 光合速率测定第28页
        2.3.5 花青素的测定第28页
        2.3.6 多糖的测定第28页
        2.3.7 激素测定第28-29页
        2.3.8 丹酚酸及丹参酮含量的测定第29-30页
    2.4 实验结果第30-34页
        2.4.1 低磷对丹参根形态及生物量的影响第30-31页
        2.4.2 低磷对丹参植株中磷浓度的影响第31-32页
        2.4.3 低磷对光合作用及多糖积累的影响第32页
        2.4.4 低磷对丹参植株激素含量的影响第32-33页
        2.4.5 低磷对次生代谢产物积累的影响第33-34页
    2.5 结论与讨论第34-36页
        2.5.1 适度磷缺失不会抑制丹参植株生长第34页
        2.5.2 低磷胁迫增强丹参体内磷转运第34页
        2.5.3 GA和IAA参与了植物对低磷胁迫响应过程第34-35页
        2.5.4 低磷胁迫促进丹参酮的积累第35页
        2.5.5 总结第35-36页
第三章 丹参与绒毛鼠尾草响应低磷的差异研究第36-52页
    3.1 引言第36页
    3.2 实验材料,试剂与仪器第36-37页
        3.2.1 实验材料第36页
        3.2.2 主要仪器第36页
        3.2.3 主要试剂及试剂配置第36-37页
    3.3 实验方法第37-42页
        3.3.1 毛状根获得及培养第37-38页
        3.3.2 生物量的测定及高效液相第38页
        3.3.3 实时荧光定量PCR第38-40页
        3.3.4 植物有效磷含量的测定第40页
        3.3.5 抗氧化性酶活的测定第40-41页
        3.3.6 抗氧化测定第41-42页
    3.4 结果与分析第42-49页
        3.4.1 低磷胁迫对两种鼠尾草毛状根生物量的影响第42页
        3.4.2 低磷胁迫对两种鼠尾草毛状根中丹酚酸和丹参酮含量及产量的影响第42-44页
        3.4.3 低磷胁迫对两种鼠尾草毛状根中丹酚酸及丹参酮合成通路途径基因表达量的影响第44-46页
        3.4.4 低磷胁迫对两种鼠尾草毛状根中SPX基因表达的影响第46-47页
        3.4.5 低磷处理对两种鼠尾草属植物中磷浓度的影响第47-48页
        3.4.6 低磷胁迫对两种鼠尾草属毛状根中抗氧化酶活性的影响第48-49页
        3.4.7 低磷胁迫对两种鼠尾草属植物毛状根提取物抗氧化活性的影响第49页
    3.5 讨论与小结第49-52页
        3.5.1 低磷胁迫对藏丹参生物量的影响小于紫花丹参第49-50页
        3.5.2 藏丹参比紫花丹参更能积极的调动自身次生代谢的变化适应低磷环境第50页
        3.5.3 藏丹参的PSI基因对低磷的响应更敏感第50页
        3.5.4 藏丹参抗氧化性更高第50-51页
        3.5.5 总结第51-52页
第四章 SmMYB98b基因的克隆及功能分析第52-83页
    4.1 引言第52页
    4.2 实验材料,试剂与仪器第52-55页
        4.2.1 实验材料第52页
        4.2.2 主要仪器第52-53页
        4.2.3 试剂第53-55页
        4.2.4 引物第55页
    4.3 实验方法第55-66页
        4.3.1 植物材料获得第55页
        4.3.2 SmMYB98b基因的分子克隆与序列分析第55-58页
        4.3.3 SmMYB98b的亚细胞定位分析第58-59页
        4.3.4 SmMYB98b组织特异性表达第59-60页
        4.3.5 SmMYB98b对低磷胁迫的响应第60页
        4.3.6 SmMYB98b过表达毛状根的获得第60-63页
        4.3.7 SmMYB98bRNAi沉默毛状根的获得第63-66页
        4.3.8 SmMYB98b转基因毛状根性状分析第66页
    4.4 实验结果第66-79页
        4.4.1 SmMYB98b基因的分子克隆与生物信息学分析第66-69页
        4.4.2 SmMYB98b亚细胞定位第69-70页
        4.4.3 SmMYB98b组织特异性表达及对低磷的响应第70-71页
        4.4.4 SmMYB98b对低磷胁迫的响应第71页
        4.4.5 SmMYB98b基因过表达及RNAi沉默转基因毛状根分析第71-79页
    4.5 讨论第79-83页
        4.5.1 SmMYB98b属于R2R3-MYB转录因子的第20亚族第79-80页
        4.5.2 SmMYB98b为核定位的转录因子第80页
        4.5.3 SmMYB98b正调控丹参酮积累且对丹参酮积累的调控受磷水平的影响第80-81页
        4.5.4 SmMYB98b过表达使植物出现PSR现象第81页
        4.5.5 总结第81-83页
第五章 SmMYB9a基因的克隆及功能分析第83-113页
    5.1 引言第83页
    5.2 实验材料,试剂与仪器第83-87页
        5.2.1 实验材料第83-84页
        5.2.2 主要仪器第84页
        5.2.3 试剂第84-87页
        5.2.4 引物第87页
    5.3 实验方法第87-93页
        5.3.1 植物材料获得第87页
        5.3.2 SmMYB9a基因的分子克隆与序列分析第87页
        5.3.3 SmMYB9a亚细胞定位分析第87-88页
        5.3.4 SmMYB9a的组织特异性表达第88页
        5.3.5 SmMYB9a对低磷胁迫的响应第88页
        5.3.6 SmMYB9a的原核表达第88-89页
        5.3.7 SmMYB9a过表达转基因毛状根的获得第89页
        5.3.8 SmMYB9aRNAi沉默转基因毛状根的获得第89页
        5.3.9 SmMYB9a转基因毛状根性状分析第89页
        5.3.10 SmMYB9a与SmSPX2和SmSPX4的酵母双杂交分析第89-91页
        5.3.11 SmMYB9a与SmSPX2和SmSPX4的双分子荧光互补分析第91-93页
    5.4 实验结果第93-110页
        5.4.1 SmMYB9a基因的克隆与生物信息学分析第93-95页
        5.4.2 SmMYB9a的细胞定位分析第95-96页
        5.4.3 SmMYB9a的原核表达第96-97页
        5.4.4 SmMYB9a组织特异性表达第97-98页
        5.4.5 SmMYB9a对低磷的响应第98页
        5.4.6 SmMYB9a过表达及RNAi沉默转基因毛状根分析第98-107页
        5.4.7 SmMYB9a与SmSPX2及SmSPX4的酵母双杂交实验第107-108页
        5.4.8 SmMYB9a与SmSPX2和SmSPX4的双分子荧光互补实验第108-109页
        5.4.9 SmMYB9a转基因毛状根中SmSPX2和SmSPX4的表达分析第109-110页
    5.5 讨论第110-113页
        5.5.1 SmMYB9a属于R2R3-MYB转录因子的第20亚族第110页
        5.5.2 SmMYB9a对丹参酮的调控受磷水平影响第110-111页
        5.5.3 SmMYB9a与低磷响应因子SmSPX2和SmSPX4存在互作第111-112页
        5.5.4 总结第112-113页
第六章 结论第113-115页
创新点第115页
研究展望第115-116页
参考文献第116-127页
附录第127-135页
致谢第135-136页
作者简历第136页

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