摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第14-25页 |
1.1 丹参概述 | 第14-15页 |
1.1.1 丹参的应用 | 第14页 |
1.1.2 丹参分布 | 第14页 |
1.1.3 丹参有效成分 | 第14页 |
1.1.4 绒毛鼠尾草 | 第14-15页 |
1.2 丹参次生代谢调控 | 第15-16页 |
1.2.1 丹酚酸合成及其调控 | 第15页 |
1.2.2 丹参酮合成及其调控 | 第15-16页 |
1.3 生态因子对药材品质的影响 | 第16-17页 |
1.3.1 生态因子影响药材次生代谢 | 第16-17页 |
1.3.2 无机元素对丹参次生代谢的影响 | 第17页 |
1.4 低磷胁迫对植物生长发育及次生代谢积累的影响 | 第17-23页 |
1.4.1 土壤中磷素现状 | 第17页 |
1.4.2 植物适应低磷胁迫的生理机制 | 第17-19页 |
1.4.3 植物适应低磷胁迫的分子机制 | 第19-22页 |
1.4.4 低磷胁迫对植物代谢的影响 | 第22-23页 |
1.5 MYB转录因子 | 第23-24页 |
1.5.1 MYB转录因子概述 | 第23页 |
1.5.2 R2R3-MYB转录因子参与植物次生代谢的调控 | 第23页 |
1.5.3 R2R3-MYB转录因子参与植物对低磷的响应 | 第23-24页 |
1.6 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
第二章 低磷胁迫对丹参植株生长及活性成分积累的影响 | 第25-36页 |
2.1 引言 | 第25页 |
2.2 实验材料,试剂与仪器 | 第25-27页 |
2.2.1 实验材料 | 第25页 |
2.2.2 主要仪器 | 第25-26页 |
2.2.3 试剂及配置 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-30页 |
2.3.1 生物量测定 | 第27页 |
2.3.2 植物有效磷含量的测定 | 第27页 |
2.3.3 叶绿素含量测定 | 第27-28页 |
2.3.4 光合速率测定 | 第28页 |
2.3.5 花青素的测定 | 第28页 |
2.3.6 多糖的测定 | 第28页 |
2.3.7 激素测定 | 第28-29页 |
2.3.8 丹酚酸及丹参酮含量的测定 | 第29-30页 |
2.4 实验结果 | 第30-34页 |
2.4.1 低磷对丹参根形态及生物量的影响 | 第30-31页 |
2.4.2 低磷对丹参植株中磷浓度的影响 | 第31-32页 |
2.4.3 低磷对光合作用及多糖积累的影响 | 第32页 |
2.4.4 低磷对丹参植株激素含量的影响 | 第32-33页 |
2.4.5 低磷对次生代谢产物积累的影响 | 第33-34页 |
2.5 结论与讨论 | 第34-36页 |
2.5.1 适度磷缺失不会抑制丹参植株生长 | 第34页 |
2.5.2 低磷胁迫增强丹参体内磷转运 | 第34页 |
2.5.3 GA和IAA参与了植物对低磷胁迫响应过程 | 第34-35页 |
2.5.4 低磷胁迫促进丹参酮的积累 | 第35页 |
2.5.5 总结 | 第35-36页 |
第三章 丹参与绒毛鼠尾草响应低磷的差异研究 | 第36-52页 |
3.1 引言 | 第36页 |
3.2 实验材料,试剂与仪器 | 第36-37页 |
3.2.1 实验材料 | 第36页 |
3.2.2 主要仪器 | 第36页 |
3.2.3 主要试剂及试剂配置 | 第36-37页 |
3.3 实验方法 | 第37-42页 |
3.3.1 毛状根获得及培养 | 第37-38页 |
3.3.2 生物量的测定及高效液相 | 第38页 |
3.3.3 实时荧光定量PCR | 第38-40页 |
3.3.4 植物有效磷含量的测定 | 第40页 |
3.3.5 抗氧化性酶活的测定 | 第40-41页 |
3.3.6 抗氧化测定 | 第41-42页 |
3.4 结果与分析 | 第42-49页 |
3.4.1 低磷胁迫对两种鼠尾草毛状根生物量的影响 | 第42页 |
3.4.2 低磷胁迫对两种鼠尾草毛状根中丹酚酸和丹参酮含量及产量的影响 | 第42-44页 |
3.4.3 低磷胁迫对两种鼠尾草毛状根中丹酚酸及丹参酮合成通路途径基因表达量的影响 | 第44-46页 |
3.4.4 低磷胁迫对两种鼠尾草毛状根中SPX基因表达的影响 | 第46-47页 |
3.4.5 低磷处理对两种鼠尾草属植物中磷浓度的影响 | 第47-48页 |
3.4.6 低磷胁迫对两种鼠尾草属毛状根中抗氧化酶活性的影响 | 第48-49页 |
3.4.7 低磷胁迫对两种鼠尾草属植物毛状根提取物抗氧化活性的影响 | 第49页 |
3.5 讨论与小结 | 第49-52页 |
3.5.1 低磷胁迫对藏丹参生物量的影响小于紫花丹参 | 第49-50页 |
3.5.2 藏丹参比紫花丹参更能积极的调动自身次生代谢的变化适应低磷环境 | 第50页 |
3.5.3 藏丹参的PSI基因对低磷的响应更敏感 | 第50页 |
3.5.4 藏丹参抗氧化性更高 | 第50-51页 |
3.5.5 总结 | 第51-52页 |
第四章 SmMYB98b基因的克隆及功能分析 | 第52-83页 |
4.1 引言 | 第52页 |
4.2 实验材料,试剂与仪器 | 第52-55页 |
4.2.1 实验材料 | 第52页 |
4.2.2 主要仪器 | 第52-53页 |
4.2.3 试剂 | 第53-55页 |
4.2.4 引物 | 第55页 |
4.3 实验方法 | 第55-66页 |
4.3.1 植物材料获得 | 第55页 |
4.3.2 SmMYB98b基因的分子克隆与序列分析 | 第55-58页 |
4.3.3 SmMYB98b的亚细胞定位分析 | 第58-59页 |
4.3.4 SmMYB98b组织特异性表达 | 第59-60页 |
4.3.5 SmMYB98b对低磷胁迫的响应 | 第60页 |
4.3.6 SmMYB98b过表达毛状根的获得 | 第60-63页 |
4.3.7 SmMYB98bRNAi沉默毛状根的获得 | 第63-66页 |
4.3.8 SmMYB98b转基因毛状根性状分析 | 第66页 |
4.4 实验结果 | 第66-79页 |
4.4.1 SmMYB98b基因的分子克隆与生物信息学分析 | 第66-69页 |
4.4.2 SmMYB98b亚细胞定位 | 第69-70页 |
4.4.3 SmMYB98b组织特异性表达及对低磷的响应 | 第70-71页 |
4.4.4 SmMYB98b对低磷胁迫的响应 | 第71页 |
4.4.5 SmMYB98b基因过表达及RNAi沉默转基因毛状根分析 | 第71-79页 |
4.5 讨论 | 第79-83页 |
4.5.1 SmMYB98b属于R2R3-MYB转录因子的第20亚族 | 第79-80页 |
4.5.2 SmMYB98b为核定位的转录因子 | 第80页 |
4.5.3 SmMYB98b正调控丹参酮积累且对丹参酮积累的调控受磷水平的影响 | 第80-81页 |
4.5.4 SmMYB98b过表达使植物出现PSR现象 | 第81页 |
4.5.5 总结 | 第81-83页 |
第五章 SmMYB9a基因的克隆及功能分析 | 第83-113页 |
5.1 引言 | 第83页 |
5.2 实验材料,试剂与仪器 | 第83-87页 |
5.2.1 实验材料 | 第83-84页 |
5.2.2 主要仪器 | 第84页 |
5.2.3 试剂 | 第84-87页 |
5.2.4 引物 | 第87页 |
5.3 实验方法 | 第87-93页 |
5.3.1 植物材料获得 | 第87页 |
5.3.2 SmMYB9a基因的分子克隆与序列分析 | 第87页 |
5.3.3 SmMYB9a亚细胞定位分析 | 第87-88页 |
5.3.4 SmMYB9a的组织特异性表达 | 第88页 |
5.3.5 SmMYB9a对低磷胁迫的响应 | 第88页 |
5.3.6 SmMYB9a的原核表达 | 第88-89页 |
5.3.7 SmMYB9a过表达转基因毛状根的获得 | 第89页 |
5.3.8 SmMYB9aRNAi沉默转基因毛状根的获得 | 第89页 |
5.3.9 SmMYB9a转基因毛状根性状分析 | 第89页 |
5.3.10 SmMYB9a与SmSPX2和SmSPX4的酵母双杂交分析 | 第89-91页 |
5.3.11 SmMYB9a与SmSPX2和SmSPX4的双分子荧光互补分析 | 第91-93页 |
5.4 实验结果 | 第93-110页 |
5.4.1 SmMYB9a基因的克隆与生物信息学分析 | 第93-95页 |
5.4.2 SmMYB9a的细胞定位分析 | 第95-96页 |
5.4.3 SmMYB9a的原核表达 | 第96-97页 |
5.4.4 SmMYB9a组织特异性表达 | 第97-98页 |
5.4.5 SmMYB9a对低磷的响应 | 第98页 |
5.4.6 SmMYB9a过表达及RNAi沉默转基因毛状根分析 | 第98-107页 |
5.4.7 SmMYB9a与SmSPX2及SmSPX4的酵母双杂交实验 | 第107-108页 |
5.4.8 SmMYB9a与SmSPX2和SmSPX4的双分子荧光互补实验 | 第108-109页 |
5.4.9 SmMYB9a转基因毛状根中SmSPX2和SmSPX4的表达分析 | 第109-110页 |
5.5 讨论 | 第110-113页 |
5.5.1 SmMYB9a属于R2R3-MYB转录因子的第20亚族 | 第110页 |
5.5.2 SmMYB9a对丹参酮的调控受磷水平影响 | 第110-111页 |
5.5.3 SmMYB9a与低磷响应因子SmSPX2和SmSPX4存在互作 | 第111-112页 |
5.5.4 总结 | 第112-113页 |
第六章 结论 | 第113-115页 |
创新点 | 第115页 |
研究展望 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-127页 |
附录 | 第127-135页 |
致谢 | 第135-136页 |
作者简历 | 第136页 |