摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第14-32页 |
1.1 鱼类的免疫系统概述 | 第14-20页 |
1.1.1 鱼类的先天免疫系统 | 第16-18页 |
1.1.2 鱼类的适应性免疫系统 | 第18-20页 |
1.2 鱼类B细胞的内吞作用 | 第20-27页 |
1.2.1 鱼类免疫球蛋白分子 | 第20-21页 |
1.2.2 鱼类B细胞内吞作用的研究现状 | 第21-24页 |
1.2.3 内吞方式的研究进展 | 第24-27页 |
1.3 B细胞共受体分子CD22的免疫功能 | 第27-30页 |
1.3.1 B细胞共受体概述 | 第27-28页 |
1.3.2 B细胞共受体分子CD22的结构与功能 | 第28-30页 |
1.4 本论文研究的目的及意义 | 第30-32页 |
第二章 大菱鲆IgM~+B细胞对非己颗粒的内吞机制 | 第32-50页 |
2.1 实验材料 | 第32-34页 |
2.1.1 实验动物及菌株 | 第32页 |
2.1.2 主要试剂 | 第32-34页 |
2.1.3 仪器设备 | 第34页 |
2.2 实验方法 | 第34-38页 |
2.2.1 大菱鲆外周血白细胞的提取 | 第34-35页 |
2.2.2 大菱鲆PBLIgM~+B细胞对荧光乳胶微球内吞能力的检测 | 第35页 |
2.2.3 大菱鲆IgM~+B细胞内吞的免疫荧光检测 | 第35-36页 |
2.2.4 大菱鲆IgM~+B细胞的分选 | 第36页 |
2.2.5 大菱鲆IgM~+B细胞扫描电镜检测 | 第36页 |
2.2.6 不同内吞途径抑制剂对大菱鲆PBL内吞的影响 | 第36-37页 |
2.2.7 巨胞饮途径检测 | 第37页 |
2.2.8 巨胞饮标记物与荧光乳胶微球在大菱鲆PBL的共定位检测 | 第37-38页 |
2.2.9 数据统计分析 | 第38页 |
2.3 实验结果 | 第38-47页 |
2.3.1 大菱鲆IgM~+B细胞对荧光乳胶微球的内吞效率分析 | 第38-40页 |
2.3.2 具有内吞能力的大菱鲆IgM~+B细胞的免疫荧光观察 | 第40-41页 |
2.3.3 大菱鲆IgM~+B细胞内吞过程观察 | 第41页 |
2.3.4 内吞抑制剂作用下大菱鲆IgM~+B细胞对荧光乳胶微球内吞的影响 | 第41-44页 |
2.3.5 内吞抑制剂作用下大菱鲆IgM~+B细胞对大肠杆菌内吞的影响 | 第44-45页 |
2.3.6 巨胞饮在大菱鲆IgM~+B细胞内吞中作用的分析 | 第45-47页 |
2.4 讨论 | 第47-50页 |
第三章 牙鲆IgM~+B细胞对非己颗粒的内吞机制 | 第50-62页 |
3.1 实验材料 | 第50页 |
3.1.1 实验动物及菌株 | 第50页 |
3.1.2 主要试剂 | 第50页 |
3.1.3 仪器设备 | 第50页 |
3.2 实验方法 | 第50-52页 |
3.2.1 牙鲆外周血白细胞和脾脏白细胞的提取 | 第50-51页 |
3.2.2 牙鲆IgM~+B细胞对荧光乳胶微球内吞能力的检测 | 第51页 |
3.2.3 不同内吞途径抑制剂对牙鲆IgM~+B细胞内吞的影响 | 第51页 |
3.2.4 数据统计分析 | 第51-52页 |
3.3 实验结果 | 第52-59页 |
3.3.1 牙鲆外周血白细胞IgM~+B细胞对不同大小荧光乳胶微球的内吞效率 | 第52-53页 |
3.3.2 牙鲆脾脏白细胞IgM~+B细胞对不同大小荧光乳胶微球的内吞效率 | 第53-54页 |
3.3.3 内吞抑制剂作用下牙鲆外周血白细胞IgM~+B细胞对荧光乳胶微球内吞的影响 | 第54-57页 |
3.3.4 内吞抑制剂作用下牙鲆脾脏白细胞IgM~+B细胞对荧光乳胶微球内吞的影响 | 第57-59页 |
3.4 讨论 | 第59-62页 |
第四章 B细胞共受体分子CD22的鉴定分析及调控作用 | 第62-98页 |
4.1 实验材料 | 第62-64页 |
4.1.1 实验动物及菌株 | 第62页 |
4.1.2 主要试剂及引物信息 | 第62-64页 |
4.1.3 仪器设备 | 第64页 |
4.2 实验方法 | 第64-78页 |
4.2.1 序列分析 | 第64-65页 |
4.2.2 各组织总RNA的提取及cDNA的合成 | 第65-67页 |
4.2.3 荧光实时定量PCR检测 | 第67页 |
4.2.4 PoCD22和CsCD22基因克隆 | 第67-70页 |
4.2.5 重组蛋白表达 | 第70页 |
4.2.6 蛋白纯化 | 第70-71页 |
4.2.7 rPoCD22和rCsCD22抗血清制备 | 第71-72页 |
4.2.8 Western-blot检测 | 第72-73页 |
4.2.9 白细胞的提取 | 第73页 |
4.2.10 组织切片制备 | 第73-74页 |
4.2.11 免疫荧光实验 | 第74-75页 |
4.2.12 流式细胞仪检测 | 第75-76页 |
4.2.13 rPoCD22抗血清对IgM~+B细胞内吞能力的影响 | 第76页 |
4.2.14 rPoCD22抗血清对IgM~+B细胞ROS活性的影响 | 第76-77页 |
4.2.15 rCsCD22抗血清对外周血白细胞吞噬能力的影响 | 第77页 |
4.2.16 rCsCD22抗血清对外周血白细胞杀菌能力的影响 | 第77-78页 |
4.2.17 rCsCD22抗血清对外周血白细胞增殖能力的影响 | 第78页 |
4.2.18 数据统计分析 | 第78页 |
4.3 实验结果 | 第78-95页 |
4.3.1 CD22对IgM~+B细胞内吞的调控 | 第78-86页 |
4.3.2 CD22对PBL免疫激活的作用 | 第86-95页 |
4.4 讨论 | 第95-98页 |
第五章 结论与展望 | 第98-102页 |
5.1 结论 | 第98-100页 |
5.2 展望 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-114页 |
附录 | 第114-116页 |
致谢 | 第116-118页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第118-119页 |