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孕激素及其受体在大菱鲆精子发生过程中的作用研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 综述第14-32页
    1.1 硬骨鱼类精巢发育过程第14-20页
        1.1.1 精巢形态学结构第14页
        1.1.2 精巢的类型第14-16页
        1.1.3 雄性生殖细胞类型第16-18页
        1.1.4 硬骨鱼类精巢分期第18-19页
        1.1.5 精巢中的体细胞第19-20页
    1.2 雄鱼繁殖内分泌相关激素的功能与合成机制第20-27页
        1.2.1 雄激素第20-22页
        1.2.2 孕激素第22-27页
            1.2.2.1 DHP的功能第22-23页
            1.2.2.2 20β-s的功能第23页
            1.2.2.3 孕激素的合成部位第23-25页
            1.2.2.4 孕激素合成关键酶与合成机制第25-27页
    1.3 雄鱼繁殖内分泌相关激素的受体第27-31页
        1.3.1 雄激素受体第27-28页
        1.3.2 孕激素受体第28-31页
            1.3.2.1 孕激素核受体pgr第28页
            1.3.2.2 孕酮膜受体mPRs第28-30页
            1.3.2.3 孕酮受体膜组成部分PGRMCs第30-31页
    1.4 本论文的研究目的和意义第31-32页
第二章 大菱鲆精巢发育过程及相关标记基因的研究第32-49页
    2.1 材料和方法第33-37页
        2.1.1 试验材料第33页
        2.1.2 样品采集第33页
        2.1.3 主要仪器第33-34页
        2.1.4 主要试剂第34页
        2.1.5 不同时期精巢组织的石蜡切片第34页
        2.1.6 总RNA第34-35页
        2.1.7 反转录cDNA第一条链合成第35页
        2.1.8 生殖细胞标记基因amh,dazl和sycp3部分片段的获得第35-36页
        2.1.9 实时荧光定量PCR第36-37页
    2.2 数据分析第37页
    2.3 结果第37-46页
        2.3.1 大菱鲆精巢外观观察第37-39页
        2.3.2 生长期和繁殖期大菱鲆性重比和肝重比第39-40页
        2.3.3 生长期大菱鲆精巢组织学观察第40-43页
        2.3.4 amh,dazl,sycp3在生长期不同阶段的精巢中的表达第43-44页
        2.3.5 繁殖期大菱鲆精巢组织学观察第44-46页
    2.4 讨论第46-49页
第三章 孕激素及其受体在大菱鲆生长期的表达模式分析第49-68页
    3.1 材料和方法第50-56页
        3.1.1 试验材料第50页
        3.1.2 主要仪器和试剂第50页
        3.1.3 血清激素水平测定第50-51页
        3.1.4 孕激素合成关键酶20β-HSD,P450c17-I,P450c17-II和孕激素受体pgr,mPRα,pgrmc1,pgrmc2部分片段的获得第51页
        3.1.5 Race获得pgrcDNA全长序列第51-53页
        3.1.6 pgr和mPRα基因序列分析及进化树的构建第53页
        3.1.7 实时荧光定量PCR第53-54页
        3.1.8 精巢切片原位杂交第54-56页
    3.2 数据处理第56页
    3.3 结果第56-65页
        3.3.1 序列分析第56-60页
        3.3.2 激素含量变化第60-61页
        3.3.3 孕激素合成关键酶在生长期不同月龄大菱鲆精巢中的表达变化第61-62页
        3.3.4 孕激素受体组织表达模式分析第62-63页
        3.3.5 pgr,mPRα,pgrmc1和pgrmc2在生长期不同月龄的大菱鲆精巢中的表达变化第63-64页
        3.3.6 pgr,mPRα,pgrmc1和pgrmc2在生长期大菱鲆精巢上的定位第64-65页
    3.4 讨论第65-68页
第四章 孕激素及其受体在大菱鲆繁殖周期的表达模式分析第68-79页
    4.1 材料和方法第69-71页
        4.1.1 试验材料第69-70页
        4.1.2 主要仪器和试剂第70页
        4.1.3 血清激素水平测定第70页
        4.1.4 组织样品采集和处理第70页
        4.1.5 精液采集第70页
        4.1.6 精子参数分析第70-71页
        4.1.7 荧光定量第71页
        4.1.8 精巢切片原位杂交第71页
    4.2 数据分析第71页
    4.3 结果第71-76页
        4.3.1 激素含量变化第71-72页
        4.3.2 孕激素合成关键酶在繁殖期大菱鲆精巢中的表达变化第72-73页
        4.3.3 孕激素受体pgr,mPRα,pgrmc1和pgrmc2在繁殖期大菱鲆精巢中的表达变化第73-74页
        4.3.4 pgr在繁殖期大菱鲆精巢上的定位第74页
        4.3.5 精液参数分析第74页
        4.3.6 孕激素膜受体mPRα,pgrmc1和pgrmc2在V期精巢和精子上的表达量比较第74-75页
        4.3.7 激素水平与精子质量的相关性第75-76页
    4.4 讨论第76-79页
第五章 孕激素膜受体mPRα和pgrmc2在不同质量的精子中的表达模式分析第79-84页
    5.1 材料和方法第79-80页
        5.1.1 试验材料第79页
        5.1.2 主要仪器和试剂第79页
        5.1.3 精液采集第79页
        5.1.4 精子参数分析第79-80页
        5.1.5 荧光定量第80页
    5.2 数据分析第80页
    5.3 结果第80-83页
        5.3.1 三组精液质量参数比较第80-82页
        5.3.2 孕激素受体mPRα和pgrmc2在精子中的相对表达量与精子质量的相关性第82-83页
    5.4 讨论第83-84页
第六章 结论与展望第84-86页
    6.1 研究结论第84-85页
    6.2 展望第85-86页
参考文献第86-104页
致谢第104-106页
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第106页

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