摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 综述 | 第14-32页 |
1.1 硬骨鱼类精巢发育过程 | 第14-20页 |
1.1.1 精巢形态学结构 | 第14页 |
1.1.2 精巢的类型 | 第14-16页 |
1.1.3 雄性生殖细胞类型 | 第16-18页 |
1.1.4 硬骨鱼类精巢分期 | 第18-19页 |
1.1.5 精巢中的体细胞 | 第19-20页 |
1.2 雄鱼繁殖内分泌相关激素的功能与合成机制 | 第20-27页 |
1.2.1 雄激素 | 第20-22页 |
1.2.2 孕激素 | 第22-27页 |
1.2.2.1 DHP的功能 | 第22-23页 |
1.2.2.2 20β-s的功能 | 第23页 |
1.2.2.3 孕激素的合成部位 | 第23-25页 |
1.2.2.4 孕激素合成关键酶与合成机制 | 第25-27页 |
1.3 雄鱼繁殖内分泌相关激素的受体 | 第27-31页 |
1.3.1 雄激素受体 | 第27-28页 |
1.3.2 孕激素受体 | 第28-31页 |
1.3.2.1 孕激素核受体pgr | 第28页 |
1.3.2.2 孕酮膜受体mPRs | 第28-30页 |
1.3.2.3 孕酮受体膜组成部分PGRMCs | 第30-31页 |
1.4 本论文的研究目的和意义 | 第31-32页 |
第二章 大菱鲆精巢发育过程及相关标记基因的研究 | 第32-49页 |
2.1 材料和方法 | 第33-37页 |
2.1.1 试验材料 | 第33页 |
2.1.2 样品采集 | 第33页 |
2.1.3 主要仪器 | 第33-34页 |
2.1.4 主要试剂 | 第34页 |
2.1.5 不同时期精巢组织的石蜡切片 | 第34页 |
2.1.6 总RNA | 第34-35页 |
2.1.7 反转录cDNA第一条链合成 | 第35页 |
2.1.8 生殖细胞标记基因amh,dazl和sycp3部分片段的获得 | 第35-36页 |
2.1.9 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
2.2 数据分析 | 第37页 |
2.3 结果 | 第37-46页 |
2.3.1 大菱鲆精巢外观观察 | 第37-39页 |
2.3.2 生长期和繁殖期大菱鲆性重比和肝重比 | 第39-40页 |
2.3.3 生长期大菱鲆精巢组织学观察 | 第40-43页 |
2.3.4 amh,dazl,sycp3在生长期不同阶段的精巢中的表达 | 第43-44页 |
2.3.5 繁殖期大菱鲆精巢组织学观察 | 第44-46页 |
2.4 讨论 | 第46-49页 |
第三章 孕激素及其受体在大菱鲆生长期的表达模式分析 | 第49-68页 |
3.1 材料和方法 | 第50-56页 |
3.1.1 试验材料 | 第50页 |
3.1.2 主要仪器和试剂 | 第50页 |
3.1.3 血清激素水平测定 | 第50-51页 |
3.1.4 孕激素合成关键酶20β-HSD,P450c17-I,P450c17-II和孕激素受体pgr,mPRα,pgrmc1,pgrmc2部分片段的获得 | 第51页 |
3.1.5 Race获得pgrcDNA全长序列 | 第51-53页 |
3.1.6 pgr和mPRα基因序列分析及进化树的构建 | 第53页 |
3.1.7 实时荧光定量PCR | 第53-54页 |
3.1.8 精巢切片原位杂交 | 第54-56页 |
3.2 数据处理 | 第56页 |
3.3 结果 | 第56-65页 |
3.3.1 序列分析 | 第56-60页 |
3.3.2 激素含量变化 | 第60-61页 |
3.3.3 孕激素合成关键酶在生长期不同月龄大菱鲆精巢中的表达变化 | 第61-62页 |
3.3.4 孕激素受体组织表达模式分析 | 第62-63页 |
3.3.5 pgr,mPRα,pgrmc1和pgrmc2在生长期不同月龄的大菱鲆精巢中的表达变化 | 第63-64页 |
3.3.6 pgr,mPRα,pgrmc1和pgrmc2在生长期大菱鲆精巢上的定位 | 第64-65页 |
3.4 讨论 | 第65-68页 |
第四章 孕激素及其受体在大菱鲆繁殖周期的表达模式分析 | 第68-79页 |
4.1 材料和方法 | 第69-71页 |
4.1.1 试验材料 | 第69-70页 |
4.1.2 主要仪器和试剂 | 第70页 |
4.1.3 血清激素水平测定 | 第70页 |
4.1.4 组织样品采集和处理 | 第70页 |
4.1.5 精液采集 | 第70页 |
4.1.6 精子参数分析 | 第70-71页 |
4.1.7 荧光定量 | 第71页 |
4.1.8 精巢切片原位杂交 | 第71页 |
4.2 数据分析 | 第71页 |
4.3 结果 | 第71-76页 |
4.3.1 激素含量变化 | 第71-72页 |
4.3.2 孕激素合成关键酶在繁殖期大菱鲆精巢中的表达变化 | 第72-73页 |
4.3.3 孕激素受体pgr,mPRα,pgrmc1和pgrmc2在繁殖期大菱鲆精巢中的表达变化 | 第73-74页 |
4.3.4 pgr在繁殖期大菱鲆精巢上的定位 | 第74页 |
4.3.5 精液参数分析 | 第74页 |
4.3.6 孕激素膜受体mPRα,pgrmc1和pgrmc2在V期精巢和精子上的表达量比较 | 第74-75页 |
4.3.7 激素水平与精子质量的相关性 | 第75-76页 |
4.4 讨论 | 第76-79页 |
第五章 孕激素膜受体mPRα和pgrmc2在不同质量的精子中的表达模式分析 | 第79-84页 |
5.1 材料和方法 | 第79-80页 |
5.1.1 试验材料 | 第79页 |
5.1.2 主要仪器和试剂 | 第79页 |
5.1.3 精液采集 | 第79页 |
5.1.4 精子参数分析 | 第79-80页 |
5.1.5 荧光定量 | 第80页 |
5.2 数据分析 | 第80页 |
5.3 结果 | 第80-83页 |
5.3.1 三组精液质量参数比较 | 第80-82页 |
5.3.2 孕激素受体mPRα和pgrmc2在精子中的相对表达量与精子质量的相关性 | 第82-83页 |
5.4 讨论 | 第83-84页 |
第六章 结论与展望 | 第84-86页 |
6.1 研究结论 | 第84-85页 |
6.2 展望 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-104页 |
致谢 | 第104-106页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第106页 |