| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略词 | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 植物蛋白激酶 | 第13-17页 |
| 1.1.1 植物蛋白激酶的研究史 | 第13页 |
| 1.1.2 植物蛋白激酶的分类及结构 | 第13-14页 |
| 1.1.3 植物蛋白激酶参与抗逆应答信号途径 | 第14-15页 |
| 1.1.4 植物蛋白激酶的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.1.5 WNK 蛋白激酶研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2 植物激素脱落酸 | 第17-19页 |
| 1.2.1 脱落酸的发现史 | 第17-18页 |
| 1.2.2 脱落酸的结构及性质 | 第18页 |
| 1.2.3 脱落酸的合成和分布 | 第18-19页 |
| 1.3 脱落酸参与植物胁迫抗性研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.1 脱落酸与干旱胁迫 | 第19-20页 |
| 1.3.2 脱落酸与低温胁迫 | 第20页 |
| 1.3.3 脱落酸与盐胁迫 | 第20-21页 |
| 1.3.4 脱落酸在逆境胁迫中的作用机制 | 第21页 |
| 1.4 拟南芥蛋白激酶 AtWNK9 的生物信息学分析 | 第21-23页 |
| 1.4.1 拟南芥蛋白激酶 AtWNK9 氨基酸序列结构域分析 | 第22页 |
| 1.4.2 拟南芥蛋白激酶 AtWNK9 磷酸化位点分析 | 第22-23页 |
| 1.4.3 拟南芥蛋白激酶 AtWNK9 启动子顺式作用元件分析 | 第23页 |
| 1.5 本论文的研究思路与工作设想 | 第23-25页 |
| 第2章 拟南芥 AtWNK9 基因的克隆及表达模式分析 | 第25-42页 |
| 2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第25-27页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.2 实验试剂和酶 | 第25-26页 |
| 2.1.3 实验主要仪器 | 第26页 |
| 2.1.4 引物的合成及序列 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 拟南芥生长条件 | 第27页 |
| 2.2.2 拟南芥种子灭菌与播种 | 第27页 |
| 2.2.3 拟南芥胁迫处理 | 第27页 |
| 2.2.4 植物 RNA 提取及转录 | 第27-28页 |
| 2.2.5 AtWNK9 基因全长 cDNA 及启动子的扩增 | 第28页 |
| 2.2.6 PCR 产物回收 | 第28-29页 |
| 2.2.7 BP 与 LR 反应过程及体系 | 第29页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备-CaCl2法 | 第29-30页 |
| 2.2.9 大肠杆菌感受态细胞的转化-热激法 | 第30页 |
| 2.2.10 质粒 DNA 的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.11 农杆菌 EHA105 电击感受态的制备 | 第31页 |
| 2.2.12 农杆菌 EHA105 电击转化 | 第31-32页 |
| 2.2.13 拟南芥浸花法转化 | 第32页 |
| 2.2.14 拟南芥 AtWNK9 插入突变体纯合子的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.15 拟南芥 AtWNK9 原生质体的转化 | 第33-34页 |
| 2.2.16 GUS 染色 | 第34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-41页 |
| 2.3.1 AtWNK9 基因过表达株系的构建与鉴定 | 第34-36页 |
| 2.3.2 AtWNK9 T-DNA 插入突变体纯合子的鉴定与分析 | 第36-37页 |
| 2.3.3 AtWNK9 基因表达对逆境胁迫的响应 | 第37-38页 |
| 2.3.4 AtWNK9 基因组织特异性表达模式分析 | 第38-39页 |
| 2.3.5 AtWNK9 基因的亚细胞定位分析 | 第39-41页 |
| 2.4 小结 | 第41-42页 |
| 第3章 拟南芥 AtWNK9 基因的功能研究 | 第42-54页 |
| 3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第42页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.1.2 实验试剂及酶 | 第42页 |
| 3.1.3 实验主要仪器 | 第42页 |
| 3.1.4 引物的合成及序列 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.2.1 拟南芥生长条件 | 第42页 |
| 3.2.2 拟南芥种子灭菌与播种 | 第42页 |
| 3.2.3 主根长度的测量 | 第42-43页 |
| 3.2.4 气孔开度的测定 | 第43页 |
| 3.2.5 失水率的测定 | 第43-44页 |
| 3.2.6 脯氨酸含量的测定 | 第44页 |
| 3.2.7 拟南芥干旱胁迫处理 | 第44页 |
| 3.2.8 拟南芥 ABA 胁迫处理 | 第44页 |
| 3.2.9 Q-PCR | 第44-45页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第45-53页 |
| 3.3.1 AtWNK9 过量表达或缺失对根生长发育的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.2 AtWNK9 过量表达或缺失对植物叶片气孔开度的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.3 AtWNK9 过量表达或缺失对蒸腾失水率的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.4 AtWNK9 过量表达或缺失对脯氨酸积累的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.5 AtWNK9 过量表达或缺失对抗干旱胁迫的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.6 AtWNK9 过量表达或缺失对胁迫应答相关基因表达的影响 | 第50-53页 |
| 3.4 小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
