| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 1. 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 p204的生物学作用 | 第11-12页 |
| 1.2 脊椎动物先天免疫简介 | 第12-14页 |
| 1.3 斑马鱼作为模式动物的优势 | 第14页 |
| 1.4 斑马鱼先天免疫相关信号通路 | 第14-16页 |
| 1.5 斑马鱼研究常用技术 | 第16-17页 |
| 1.5.1 斑马鱼转基因技术 | 第16页 |
| 1.5.2 突变体技术 | 第16-17页 |
| 1.5.3 胚胎原位杂交技术 | 第17页 |
| 1.5.4 基因过表达技术 | 第17页 |
| 1.6 Tol2转座子的应用 | 第17页 |
| 1.7 研究思路和意义 | 第17-19页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第19-48页 |
| 2.1 实验材料试剂与仪器 | 第19-24页 |
| 2.1.1 主要实验试剂 | 第19-23页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-48页 |
| 2.2.1 斑马鱼的饲养与繁殖 | 第24-25页 |
| 2.2.2 p204-EGFP质粒的扩增与线性化 | 第25-29页 |
| 2.2.3 显微注射 | 第29-30页 |
| 2.2.4 胚胎发育荧光观察和统计 | 第30页 |
| 2.2.5 免疫相关基因的表达检测 | 第30-42页 |
| 2.2.6 斑马鱼p204转基因载体的构建 | 第42-48页 |
| 3. 实验结果 | 第48-58页 |
| 3.1 p204-EGFP和EGFP-N1质粒扩增、线性化和纯化结果 | 第48页 |
| 3.2 荧光观察和荧光率、胚胎致死率的统计 | 第48-50页 |
| 3.3 先天免疫相关基因实时定量检测结果 | 第50-53页 |
| 3.3.1 各时期斑马鱼总RNA提取检测结果 | 第50-51页 |
| 3.3.2 反转cDNA扩增目的条带结果 | 第51页 |
| 3.3.3 实时定量PCR结果 | 第51-53页 |
| 3.4 sting和tbk1基因原位杂交结果 | 第53-54页 |
| 3.4.1 sting和tbk1探针的合成结果 | 第53页 |
| 3.4.2 sting和tbk1原位杂交结果 | 第53-54页 |
| 3.5 p204转基因载体tol2-p204的构建结果 | 第54-58页 |
| 3.5.1 p204基因的扩增 | 第54-55页 |
| 3.5.2 tol2-p204质粒线性化结果 | 第55-56页 |
| 3.5.3 pCS-TP质粒线性化与体外合成mRNA | 第56-57页 |
| 3.5.4 tol2-p204与TP转座酶共注射后斑马鱼荧光观察 | 第57-58页 |
| 4. 讨论 | 第58-63页 |
| 4.1 斑马鱼作为模式生物研究TLR信号通路 | 第58-59页 |
| 4.2 p204注射到斑马鱼胚胎中的表达与稳定性 | 第59-60页 |
| 4.3 p204标记物对p204的影响 | 第60-61页 |
| 4.4 斑马鱼实时定量和和原位杂交注意事项 | 第61-62页 |
| 4.5 斑马鱼用于研究先天免疫信号通路的展望 | 第62-63页 |
| 5. 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第73-74页 |
| 附件 | 第74页 |
