| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-30页 |
| 1.1 Na~+/H~+逆向转运蛋白(Na~+/H~+ antiporters,NHAs)简介 | 第14-23页 |
| 1.1.1 细菌中的Na~+输出系统及NHAs在细菌中的主要功能 | 第14-17页 |
| 1.1.2 Ec-NhaA的结构与其作用机制 | 第17-22页 |
| 1.1.3 Ec-NhaA的转录调控机制 | 第22-23页 |
| 1.2 反转膜(everted membrane vesicles,EMVs)技术简介 | 第23-26页 |
| 1.2.1 EMVs的制备原理 | 第23-26页 |
| 1.2.2 EMVs的荧光检测原理 | 第26页 |
| 1.3 本论文工作开展思路和研究内容 | 第26-30页 |
| 第二章 nhaA预测基因对M. xanthus DK1622盐胁迫条件下生长发育的影响 | 第30-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第31页 |
| 2.1.2 培养基 | 第31-32页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第32-33页 |
| 2.1.4 仪器设备与耗材 | 第33-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-41页 |
| 2.2.1 MXAN_3898和MXAN_6055敲除突变体YL1015和YL1012的构建 | 第34页 |
| 2.2.2 YL1012和YL1015的耐盐生长能力分析 | 第34页 |
| 2.2.3 MXAN_6055回补及过表达突变株YL1050和YL1052的构建及性质分析 | 第34-36页 |
| 2.2.4 nhaA缺失突变株YL1053的构建 | 第36-41页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第41-49页 |
| 2.3.1 YL1012和YL1015在Na~+(Li~+)胁迫下的生长能力分析 | 第41-43页 |
| 2.3.2 YL1050和YL1052的性质分析 | 第43-47页 |
| 2.3.3 nhaA缺失突变株YL1053的构建 | 第47-49页 |
| 2.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 第三章 MXAN_6055蛋NhaA活性的鉴定 | 第50-70页 |
| 3.1 实验材料 | 第51-53页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第51页 |
| 3.1.2 培养基 | 第51-52页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第52-53页 |
| 3.1.4 仪器设备与耗材 | 第53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-56页 |
| 3.2.1 MXAN_6055基因的生物信息学分析 | 第53-54页 |
| 3.2.2 MXAN_6055蛋白盐离子耐受性的鉴定 | 第54-55页 |
| 3.2.3 MXAN_6055蛋白Na+(Li~+)转运活性的鉴定 | 第55-56页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第56-69页 |
| 3.3.1 MXAN_6055基因的生物信息学分析 | 第56-60页 |
| 3.3.2 MXAN_6055蛋白在本源菌中Na~+(Li~+)转运活性的鉴定 | 第60-63页 |
| 3.3.3 MXAN_6055蛋白Na~+(Li~+)耐受性的鉴定 | 第63-69页 |
| 3.4 本章小结 | 第69-70页 |
| 第四章 Mx-nhaA(MXAN_6055)基因的转录调控 | 第70-99页 |
| 4.1 实验材料 | 第71-74页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第71页 |
| 4.1.2 培养基 | 第71-72页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第72-73页 |
| 4.1.4 仪器设备与耗材 | 第73-74页 |
| 4.2 实验方法 | 第74-81页 |
| 4.2.1 MXAN_0784基因的生物信息学分析 | 第74页 |
| 4.2.2 MXAN_0784过表达突变株YL1054的构建 | 第74-76页 |
| 4.2.3 各MXAN_0784突变株的耐盐生长能力分析 | 第76页 |
| 4.2.4 qRT-PCR实验验MXAN_0784对Mx-nhaA(MXAN_6055)基因的转录调控作用 | 第76-78页 |
| 4.2.5 Band shift试验验证MXAN_0784蛋白的体外DNA结合能力 | 第78-81页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第81-98页 |
| 4.3.1 MXAN_0784基因的生物信息学分析 | 第81-84页 |
| 4.3.2 MXAN_0784过表达突变株YL1054的构建 | 第84-85页 |
| 4.3.3 各MXAN 0784突变株在Na~+胁迫条件下的生长能力分析 | 第85-87页 |
| 4.3.4 qRT-PCR实验验证MXAN_0784对MXAN_6055基因的转录调控作用 | 第87-92页 |
| 4.3.5 Band shift试验验证MXAN_0784蛋白的体外DNA结合能力 | 第92-98页 |
| 4.4 本章小结 | 第98-99页 |
| 第五章 总结与展望 | 第99-101页 |
| 附录 | 第101-104页 |
| 参考文献 | 第104-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| Abstract | 第112页 |
