摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第12-32页 |
1 秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)的研究概述 | 第12-15页 |
1.1 C.elegans的发现 | 第12-13页 |
1.2 C.elegans的特点 | 第13-14页 |
1.3 C.elegans作为模式生物的优势 | 第14-15页 |
2 温度调控C.elegans寿命 | 第15-18页 |
2.1 温度对C.elegans生理功能的影响 | 第15页 |
2.2 温度调控C.elegans寿命的信号 | 第15-18页 |
3 自噬 | 第18-22页 |
3.1 自噬的形成 | 第18-19页 |
3.2 C.elegans中的自噬基因 | 第19-20页 |
3.3 C.elegans中调节自噬的信号通路 | 第20-21页 |
3.4 ω-6 PUFA对C.elegans自噬的调控 | 第21-22页 |
3.4.1 多不饱和脂肪酸(PUFA)的代谢 | 第21页 |
3.4.2 ω-6 PUFA对C.elegans寿命的调控 | 第21-22页 |
4 秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)寿命的研究进展 | 第22-32页 |
4.1 胰岛素样信号通路对C.elegans的影响 | 第22-24页 |
4.1.1 IIS通路的发现 | 第22页 |
4.1.2 IIS通路对C.elegans寿命的调控 | 第22-24页 |
4.2 线粒体呼吸链对C.elegans的影响 | 第24-26页 |
4.2.1 线粒体呼吸链 | 第24-25页 |
4.2.2 线粒体呼吸链对C.elegans寿命的调控 | 第25-26页 |
4.3 饮食限制对C.elegans的影响 | 第26-28页 |
4.3.1 C.elegans饮食限制(DR)的处理 | 第26-27页 |
4.3.2 DR对C.elegans寿命的调控 | 第27-28页 |
4.4 性腺缺失信号对C.elegans的影响 | 第28-29页 |
4.4.1 C.elegans性腺缺失模型 | 第28页 |
4.4.2 性腺缺失对C.elegans寿命的调控 | 第28-29页 |
4.5 雷帕霉素靶(TOR)信号对C.elegans寿命的调控 | 第29-30页 |
4.6 HSF-1信号对C.elegans寿命的调控 | 第30-32页 |
第二章 实验材料和方法 | 第32-49页 |
1 实验仪器以及试剂 | 第32-36页 |
1.1 主要仪器 | 第32-33页 |
1.2 主要试剂 | 第33页 |
1.3 主要试剂盒 | 第33页 |
1.4 主要培养基及配制方法 | 第33-34页 |
1.5 常用溶液的配制 | 第34-36页 |
2 实验材料 | 第36-37页 |
2.1 实验所用到的线虫 | 第36页 |
2.2 实验菌株 | 第36-37页 |
3 实验方法 | 第37-49页 |
3.1 C.elegans的培养 | 第37页 |
3.1.1 大肠杆菌OP50的培养 | 第37页 |
3.1.2 NGM培养基的准备 | 第37页 |
3.1.3 C.elegans的接种 | 第37页 |
3.2 线虫同步化 | 第37-38页 |
3.3 线虫的RNAi实验 | 第38-39页 |
3.3.1 注射法RNAi | 第38-39页 |
3.3.2 喂食法RNAi | 第39页 |
3.4 C.elegans的单基因干扰实验 | 第39-40页 |
3.5 C.elegans的多基因干扰实验 | 第40-41页 |
3.6 线虫的寿命实验 | 第41-43页 |
3.6.1 FUDR板的制备 | 第41页 |
3.6.2 大肠杆菌及相应干扰株的活化 | 第41页 |
3.6.3 线虫寿命板的制备 | 第41-42页 |
3.6.4 线虫寿命实验 | 第42-43页 |
3.7 线虫RNA的提取、逆转录、定量PCR | 第43-45页 |
3.7.1 线虫RNA提取 | 第43-44页 |
3.7.2 cDNA的合成 | 第44页 |
3.7.3 QPCR | 第44-45页 |
3.8 从CGC购买的线虫突变株的处理方法 | 第45页 |
3.8.1 培养 | 第45页 |
3.8.2 突变株的冻存 | 第45页 |
3.9 线虫基因组提取 | 第45-46页 |
3.9.1 试剂盒提取 | 第45-46页 |
3.9.2 单条线虫DNA的提取 | 第46页 |
3.10 线虫PUFA的提取 | 第46-47页 |
3.10.1 线虫的准备 | 第46-47页 |
3.10.2 PUFA的提取-脂化 | 第47页 |
3.11 线虫的寿命拯救实验 | 第47-49页 |
3.11.1 AA寿命板的制备 | 第47-48页 |
3.11.2 寿命拯救实验 | 第48-49页 |
第三章 实验结果 | 第49-67页 |
1 低温能够延长C.elegans的寿命 | 第49页 |
2 低温能够诱导C.elegans自噬的产生 | 第49-53页 |
3 温度信号对C.elegans自噬的作用 | 第53-55页 |
4 egl-25/nhr-49/fat-7信号途径对C.elegans寿命调控的作用 | 第55-58页 |
5 低温诱导fat-7的表达升高依赖于egl-25/nhr-49 | 第58-60页 |
6 低温下花生四烯酸对自噬和寿命的调控 | 第60-62页 |
7 低温下nhr-80/hlh-30对自噬的调控 | 第62-65页 |
8 低温下nhr-80/hlh-30对寿命的调控 | 第65-67页 |
第四章 讨论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-79页 |
致谢 | 第79-80页 |