摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-17页 |
1.1 I型干扰素的抗感染作用 | 第11-14页 |
1.1.1 I型干扰素的产生及信号通路 | 第11-12页 |
1.1.2 I型干扰素在病毒感染的保护作用 | 第12-14页 |
1.2 IFN-ω干扰素概述 | 第14页 |
1.3 共有干扰素概述 | 第14-15页 |
1.4 重组蛋白在酵母中的表达研究 | 第15页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-26页 |
2.1 材料 | 第17-18页 |
2.1.1 质粒、宿主菌、病毒 | 第17页 |
2.1.2 细胞、培养基、血清 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-26页 |
2.2.1 BoIFN-ω家族成员的克隆及序列分析 | 第18-19页 |
2.2.2 pET30a-BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24的表达与纯化 | 第19-21页 |
2.2.3 CoBoIFN-ω在毕赤酵母表达系统中的表达 | 第21-24页 |
2.2.4 BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24和CoBoIFN-ω抗病毒活性的鉴定 | 第24页 |
2.2.5 BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24和CoBoIFN-ω理化性质测定 | 第24-25页 |
2.2.6 BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24和CoBoIFN-ω抗细胞增殖活性测定 | 第25页 |
2.2.7 BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24和CoBoIFN-ω诱导Mx1基因测定 | 第25页 |
2.2.8 统计学方法 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-39页 |
3.1 BoIFN-ω多基因家族的的序列分析 | 第26-27页 |
3.2 14个BoIFN-ω家族成员的克隆与序列分析 | 第27-30页 |
3.2.1 BoIFN-ω亚型基因的分离 | 第27页 |
3.2.2 14个BoIFN-ω家族成员克隆载体的构建 | 第27-28页 |
3.2.3 14个BoIFN-ω家族成员的序列分析 | 第28-30页 |
3.3 BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24的表达与纯化 | 第30-31页 |
3.4 兔抗BoIFN-ω24多克隆抗体的制备及鉴定 | 第31页 |
3.5 CoBoIFN-ω在毕赤酵母中的表达 | 第31-36页 |
3.5.1 CoBoIFN-ω的设计以及其的密码子优化与合成 | 第31-32页 |
3.5.2 CoBoIFN-ω的酵母表达载体的构建 | 第32-33页 |
3.5.3 重组GS115-pPICZαA-CoBoIFN-ω酵母菌株蛋白的表达 | 第33-34页 |
3.5.4 优势酵母菌株的大剂量诱导表达及鉴定 | 第34-36页 |
3.6 BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24和CoBoIFN-ω的抗病毒活性 | 第36页 |
3.7 BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24和CoBoIFN-ω的理化性质 | 第36-37页 |
3.8 BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24和CoBoIFN-ω的抗细胞增殖活性 | 第37页 |
3.9 BoIFN-ω1/9/10/11/13/17/23/24和CoBoIFN-ω诱导Mx1基因的活性 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-42页 |
4.1 BoIFN-ω的结构特点 | 第39页 |
4.2 BoIFN-ω的生物学活性 | 第39-40页 |
4.3 CoBoIFN-ω的设计与表达 | 第40页 |
4.4 CoBoIFN-ω的生物学活性 | 第40-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第49页 |