| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 引言和文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 模式生物斑马鱼 | 第11-12页 |
| 1.2 模式生物斑马鱼的造血过程 | 第12-14页 |
| 1.2.1 斑马鱼得原始造血 | 第12-13页 |
| 1.2.2 斑马鱼的定向造血 | 第13-14页 |
| 1.3 模式生物斑马鱼的血管发育过程 | 第14-15页 |
| 1.4 斑马鱼造血中涉及到重要调节基因和信号通路 | 第15-18页 |
| 1.4.1 影响斑马鱼造血重要的标记基因 | 第15页 |
| 1.4.2 调控斑马鱼造血过程的信号通路 | 第15-18页 |
| 1.5 斑马鱼的发育时期特征 | 第18页 |
| 1.6 整体胚胎原位杂交技术 | 第18-19页 |
| 1.7 本文的前期研究基础 | 第19-21页 |
| 1.8 本文的研究意义 | 第21-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-37页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 菌种及载体、主要试剂、试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要试剂的配置 | 第24页 |
| 2.1.4 主要实验仪器和耗材 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-37页 |
| 2.2.1 斑马鱼的生长环境的控制、饲养以及配种 | 第25-26页 |
| 2.2.2 常规的分子克隆方法 | 第26-31页 |
| 2.2.3 斑马鱼整体胚胎原位杂交 | 第31-34页 |
| 2.2.4 WESTERN BLOTTING | 第34-35页 |
| 2.2.5 CRISPR/CAS9实验方法 | 第35-37页 |
| 3 实验结果和分析 | 第37-51页 |
| 3.1 整体胚胎原位杂交探针的合成 | 第37-45页 |
| 3.1.1 DCL, DLD等血液发育相关标志基因探针的合成 | 第37-39页 |
| 3.1.2 血液发育相关标志基因GATA2, SCL, TRIM45, FLK1, HAND2等探针的合成 | 第39-44页 |
| 3.1.3 RNA探针的制备 | 第44-45页 |
| 3.2 HFHG45在斑马鱼造血中的作用 | 第45-51页 |
| 3.2.1 通过WISH检测CDH17表达情况 | 第45-46页 |
| 3.2.2 通过WISH检测TAL1表达情况 | 第46-47页 |
| 3.2.3 通过WISH检测ESTRP表达情况 | 第47-48页 |
| 3.2.4 通过WISH检测DLD, DLC表达情况 | 第48-49页 |
| 3.2.5 通过WISH检测SHH表达情况 | 第49页 |
| 3.2.6 通过WISH检测PAX7A表达情况 | 第49-50页 |
| 3.2.7 WISH样品基因型鉴定情况 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 5 结语 | 第53-54页 |
| 6 其他工作 | 第54-58页 |
| 6.1 构建PMCS1-IRES-EGFP载体 | 第54页 |
| 6.2 利用CRISPR/CAS9系统构建斑马鱼POP1/POP2敲除品系 | 第54-57页 |
| 6.2.1 目的序列分析和打靶位点设计 | 第54页 |
| 6.2.2 打靶GRNA设计 | 第54-57页 |
| 6.3 HFHG45抗体的特异性检测 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 中英文缩写词简表 | 第62-63页 |
| 攻读学位期间的学术论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
