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双重递送miRNA-2861和FK506的PLGA/Gelatin复合电纺纳米纤维支架促骨再生的研究

摘要第4-6页
abstract第6-8页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-18页
    1. 骨再生的研究背景第13-14页
        1.1 骨生理第13页
        1.2 骨重塑和骨损伤微环境第13-14页
    2. 纳米纤维支架在骨组织工程中的研究进展第14-16页
        2.1 骨组织工程支架的研究背景第14-15页
        2.2 组织工程支架上生物活性因子的释放动力学第15-16页
            2.2.1 缓慢释放第15页
            2.2.2 多因子释放第15-16页
            2.2.3 顺序释放第16页
    3. 基因和药物在骨组织工程领域的应用第16-18页
第二章 MIR-2861 MIMIC对骨髓基质干细胞成骨分化的影响第18-27页
    2.1 实验材料与仪器第18页
    2.2 实验方法第18-21页
        2.2.1 大鼠骨髓基质细胞的提取与培养第18-19页
        2.2.2 miR-2861 mimic适宜浓度的选择第19页
        2.2.3 荧光成像实验检测细胞内转染效率第19页
        2.2.4 茎环法RT-PCR检测转染BMSCs细胞后miR-2861的表达第19-20页
        2.2.5 miR-2861对BMSCs成骨相关基因表达的影响第20-21页
        2.2.6 茜素红染色检测第21页
        2.2.7 统计学分析第21页
    2.3 实验结果第21-25页
        2.3.1 不同浓度miR-2861/PEI对BMSCs细胞的增殖活性影响第21-22页
        2.3.2 miR-2861/PEI在BMSCs细胞中的瞬时转染效率第22页
        2.3.3 茎环法RT-PCR检测miRNA-2861的表达第22-23页
        2.3.4 RT-PCR检测上调miR-2861后BMSCs成骨相关基因的表达第23-24页
        2.3.5 miRNA-2861 mimic对BMSCs骨基质矿化的影响第24-25页
    2.4 讨论第25-27页
第三章 FK506对骨髓基质干细胞成骨分化的影响第27-34页
    3.1 实验材料与仪器第27页
    3.2 实验方法第27-29页
        3.2.1 FK506适宜浓度的选择第27页
        3.2.2 碱性磷酸酶检测第27-28页
        3.2.3 FK506对BMSCs成骨相关基因表达的影响第28页
        3.2.4 茜素红染色检测第28页
        3.2.5 统计学分析第28-29页
    3.3 实验结果第29-32页
        3.3.1 不同浓度FK506对BMSCs细胞增殖活性的影响第29页
        3.3.2 碱性磷酸酶活性检测第29-30页
        3.3.3 FK506对BMSCs细胞成骨相关基因表达的影响第30-31页
        3.3.4 FK506对BMSCs细胞骨基质矿化的影响第31-32页
    3.4 讨论第32-34页
第四章 载FK506/MIR-2861的PLGA/GEL纳米纤维支架第34-43页
    4.1 实验材料与仪器第34页
    4.2 实验方法第34-37页
        4.2.1 纳米纤维支架的制备第34-35页
        4.2.2 静电纺丝纤维支架的形貌表征第35页
        4.2.3 静电纺丝纤维支架的溶胀率检测第35-36页
        4.2.4 静电纺丝纤维支架的接触角检测第36页
        4.2.5 miRNA-2861的释放测定第36页
        4.2.6 FK506的释放测定第36-37页
    4.3 实验结果第37-41页
        4.3.1 纳米纤维的形貌表征第37-38页
        4.3.2 纳米纤维支架材料的吸水率检测第38页
        4.3.3 纳米纤维支架材料的接触角检测第38-39页
        4.3.4 miRNA-2861的释放曲线第39-40页
        4.3.5 FK506的释放曲线第40-41页
    4.4 讨论第41-43页
第五章 复合纳米纤维支架促骨再生的体内外研究第43-52页
    5.1 实验材料与仪器第43页
    5.2 实验方法第43-45页
        5.2.1 复合纳米纤维支架的碱性磷酸酶检测第43-44页
        5.2.2 复合纳米纤维支架诱导BMSCs细胞成骨分化作用第44页
        5.2.3 复合纳米纤维支架茜素红染色检测第44页
        5.2.4 建立大鼠颅骨缺损动物模型第44-45页
        5.2.5 新生骨量检测第45页
        5.2.6 颅骨缺损内新生骨的组织学分析第45页
        5.2.7 组织学检测复合纳米纤维支架的体内毒性第45页
    5.3 实验结果第45-50页
        5.3.1 碱性磷酸酶检测第45-46页
        5.3.2 纳米纤维支架对BMSCs细胞成骨基因表达的影响第46-47页
        5.3.3 纳米纤维支架促BMSCs的骨基质矿化第47-48页
        5.3.4 复合纳米纤维支架体内的促骨再生能力(micro-CT)第48-49页
        5.3.5 组织学染色检测不同支架的体内毒性第49-50页
    5.4 讨论第50-52页
第六章 结论第52-53页
参考文献第53-56页
作者简介及在读期间所获得的科研成果第56-57页
致谢第57页

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