摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-18页 |
1. 骨再生的研究背景 | 第13-14页 |
1.1 骨生理 | 第13页 |
1.2 骨重塑和骨损伤微环境 | 第13-14页 |
2. 纳米纤维支架在骨组织工程中的研究进展 | 第14-16页 |
2.1 骨组织工程支架的研究背景 | 第14-15页 |
2.2 组织工程支架上生物活性因子的释放动力学 | 第15-16页 |
2.2.1 缓慢释放 | 第15页 |
2.2.2 多因子释放 | 第15-16页 |
2.2.3 顺序释放 | 第16页 |
3. 基因和药物在骨组织工程领域的应用 | 第16-18页 |
第二章 MIR-2861 MIMIC对骨髓基质干细胞成骨分化的影响 | 第18-27页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-21页 |
2.2.1 大鼠骨髓基质细胞的提取与培养 | 第18-19页 |
2.2.2 miR-2861 mimic适宜浓度的选择 | 第19页 |
2.2.3 荧光成像实验检测细胞内转染效率 | 第19页 |
2.2.4 茎环法RT-PCR检测转染BMSCs细胞后miR-2861的表达 | 第19-20页 |
2.2.5 miR-2861对BMSCs成骨相关基因表达的影响 | 第20-21页 |
2.2.6 茜素红染色检测 | 第21页 |
2.2.7 统计学分析 | 第21页 |
2.3 实验结果 | 第21-25页 |
2.3.1 不同浓度miR-2861/PEI对BMSCs细胞的增殖活性影响 | 第21-22页 |
2.3.2 miR-2861/PEI在BMSCs细胞中的瞬时转染效率 | 第22页 |
2.3.3 茎环法RT-PCR检测miRNA-2861的表达 | 第22-23页 |
2.3.4 RT-PCR检测上调miR-2861后BMSCs成骨相关基因的表达 | 第23-24页 |
2.3.5 miRNA-2861 mimic对BMSCs骨基质矿化的影响 | 第24-25页 |
2.4 讨论 | 第25-27页 |
第三章 FK506对骨髓基质干细胞成骨分化的影响 | 第27-34页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第27页 |
3.2 实验方法 | 第27-29页 |
3.2.1 FK506适宜浓度的选择 | 第27页 |
3.2.2 碱性磷酸酶检测 | 第27-28页 |
3.2.3 FK506对BMSCs成骨相关基因表达的影响 | 第28页 |
3.2.4 茜素红染色检测 | 第28页 |
3.2.5 统计学分析 | 第28-29页 |
3.3 实验结果 | 第29-32页 |
3.3.1 不同浓度FK506对BMSCs细胞增殖活性的影响 | 第29页 |
3.3.2 碱性磷酸酶活性检测 | 第29-30页 |
3.3.3 FK506对BMSCs细胞成骨相关基因表达的影响 | 第30-31页 |
3.3.4 FK506对BMSCs细胞骨基质矿化的影响 | 第31-32页 |
3.4 讨论 | 第32-34页 |
第四章 载FK506/MIR-2861的PLGA/GEL纳米纤维支架 | 第34-43页 |
4.1 实验材料与仪器 | 第34页 |
4.2 实验方法 | 第34-37页 |
4.2.1 纳米纤维支架的制备 | 第34-35页 |
4.2.2 静电纺丝纤维支架的形貌表征 | 第35页 |
4.2.3 静电纺丝纤维支架的溶胀率检测 | 第35-36页 |
4.2.4 静电纺丝纤维支架的接触角检测 | 第36页 |
4.2.5 miRNA-2861的释放测定 | 第36页 |
4.2.6 FK506的释放测定 | 第36-37页 |
4.3 实验结果 | 第37-41页 |
4.3.1 纳米纤维的形貌表征 | 第37-38页 |
4.3.2 纳米纤维支架材料的吸水率检测 | 第38页 |
4.3.3 纳米纤维支架材料的接触角检测 | 第38-39页 |
4.3.4 miRNA-2861的释放曲线 | 第39-40页 |
4.3.5 FK506的释放曲线 | 第40-41页 |
4.4 讨论 | 第41-43页 |
第五章 复合纳米纤维支架促骨再生的体内外研究 | 第43-52页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第43页 |
5.2 实验方法 | 第43-45页 |
5.2.1 复合纳米纤维支架的碱性磷酸酶检测 | 第43-44页 |
5.2.2 复合纳米纤维支架诱导BMSCs细胞成骨分化作用 | 第44页 |
5.2.3 复合纳米纤维支架茜素红染色检测 | 第44页 |
5.2.4 建立大鼠颅骨缺损动物模型 | 第44-45页 |
5.2.5 新生骨量检测 | 第45页 |
5.2.6 颅骨缺损内新生骨的组织学分析 | 第45页 |
5.2.7 组织学检测复合纳米纤维支架的体内毒性 | 第45页 |
5.3 实验结果 | 第45-50页 |
5.3.1 碱性磷酸酶检测 | 第45-46页 |
5.3.2 纳米纤维支架对BMSCs细胞成骨基因表达的影响 | 第46-47页 |
5.3.3 纳米纤维支架促BMSCs的骨基质矿化 | 第47-48页 |
5.3.4 复合纳米纤维支架体内的促骨再生能力(micro-CT) | 第48-49页 |
5.3.5 组织学染色检测不同支架的体内毒性 | 第49-50页 |
5.4 讨论 | 第50-52页 |
第六章 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
作者简介及在读期间所获得的科研成果 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |