中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
中英文对照词表 | 第13-14页 |
第1章 绪论 | 第14-21页 |
1.1 前列腺癌 | 第14-16页 |
1.1.1 前列腺癌的分类 | 第14-15页 |
1.1.2 前列腺癌的分级 | 第15-16页 |
1.1.3 前列腺癌的诊断及治疗 | 第16页 |
1.2 激素难治性前列腺癌 | 第16-17页 |
1.3 激素难治性前列腺癌转变机制 | 第17-19页 |
1.3.1 雄激素受体信号通路 | 第17-18页 |
1.3.2 非雄激素受体信号途径 | 第18-19页 |
1.4 番茄红素 | 第19页 |
1.5 立题依据 | 第19-21页 |
第2章 材料与试剂 | 第21-25页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 实验仪器 | 第21-22页 |
2.1.2 实验试剂 | 第22-23页 |
2.1.3 细胞系 | 第23页 |
2.2 主要试剂配制 | 第23-25页 |
2.2.1 RPMI1640培养液配制 | 第23页 |
2.2.2 PBS配制 | 第23页 |
2.2.3 0.25%胰酶配制 | 第23页 |
2.2.4 SDS-PAGE电泳缓冲液配制(10×) | 第23-24页 |
2.2.5 Western blot转膜液配制(10×) | 第24页 |
2.2.6 TBS缓冲液配制(10×) | 第24页 |
2.2.7 TBST缓冲液配制 | 第24页 |
2.2.8 封闭液配制 | 第24页 |
2.2.9 10%(W/V)SDS溶液配制 | 第24页 |
2.2.10 10%(W/V)过硫酸铵(APS)溶液配制 | 第24页 |
2.2.11 上样缓冲液 | 第24页 |
2.2.12 番茄红素溶液配制 | 第24-25页 |
第3章 实验方法 | 第25-35页 |
3.1 激素难治性前列腺癌细胞模型的建立 | 第25-27页 |
3.1.1 前列腺癌LNCaP细胞的培养 | 第25页 |
3.1.2 激素难治性前列腺癌LNCaP-HR细胞的诱导与培养 | 第25-26页 |
3.1.3 去雄激素与氟他胺共培养的LNCaP-HR+F细胞的诱导与培养 | 第26页 |
3.1.4 LNCaP、LNCa P-HR、LNCaP-HR+F细胞形态学观察 | 第26页 |
3.1.5 细胞增殖能力的检测 | 第26页 |
3.1.6 LNCaP-HR和LNCaP-HR+F细胞对氟他胺的抵抗性 | 第26-27页 |
3.1.7 细胞侵袭能力的检测 | 第27页 |
3.2 激素难治性前列腺癌基因表达的检测 | 第27-29页 |
3.2.1 细胞RNA的提取 | 第27-28页 |
3.2.2 基因芯片扫描 | 第28-29页 |
3.2.3 基因芯片中差异表达基因的统计 | 第29页 |
3.2.4 基因芯片中差异表达基因的聚类分析 | 第29页 |
3.2.5 基因芯片中差异表达基因作用通路及潜在耐药基因分析 | 第29页 |
3.3 激素难治性前列腺癌相关通路关键蛋白的检测 | 第29-31页 |
3.3.1 前列腺癌细胞的培养 | 第29页 |
3.3.2 细胞总蛋白的提取 | 第29-30页 |
3.3.3 LNCaP和LNCa P-HR细胞AKT、P-AKT、NF-κB蛋白表达变化 | 第30-31页 |
3.3.4 LNCaP和LNCa P-HR细胞ERK、P-ERK蛋白表达变化 | 第31页 |
3.3.5 LNCaP和LNCa P-HR细胞P38、P-P38蛋白表达变化 | 第31页 |
3.4 小分子药物及天然产物对激素难治性前列腺癌细胞的增殖影响 | 第31-32页 |
3.4.1 细胞悬液的制备 | 第31-32页 |
3.4.2 种板 | 第32页 |
3.4.3 加药 | 第32页 |
3.4.4 检测 | 第32页 |
3.5 番茄红素对激素难治性前列腺癌细胞增殖的影响 | 第32-33页 |
3.5.1 细胞悬液的制备 | 第32-33页 |
3.5.2 种板 | 第33页 |
3.5.3 加药 | 第33页 |
3.5.4 检测 | 第33页 |
3.6 番茄红素对激素难治性前列腺癌相关通路关键蛋白的影响 | 第33-34页 |
3.6.1 前列腺癌细胞的培养 | 第33页 |
3.6.2 番茄红素作用后LNCa P和LNCa P-HR细胞总蛋白的提取 | 第33-34页 |
3.6.3 番茄红素作用后LNCaP和LNCa P-HR细胞AKT、P-AKT蛋白表达变化 | 第34页 |
3.6.4 番茄红素作用后LNCaP和LNCa P-HR细胞ERK蛋白表达变化 | 第34页 |
3.6.5 番茄红素作用后LNCaP和LNCa P-HR细胞P38蛋白表达变化 | 第34页 |
3.7 统计学分析 | 第34-35页 |
第4章 实验结果 | 第35-51页 |
4.1 激素难治性前列腺癌细胞模型的建立 | 第35-38页 |
4.1.1 前列腺癌LNCaP、LNCaP-HR、LNCaP-HR+F细胞形态学观察 | 第35页 |
4.1.2 细胞增殖能力的变化 | 第35-36页 |
4.1.3 LNCaP-HR和LNCaP-HR+F细胞对氟他胺的抵抗性 | 第36-37页 |
4.1.4 细胞侵袭能力的变化 | 第37-38页 |
4.2 激素难治性前列腺癌基因表达变化 | 第38-44页 |
4.2.1 激素难治性LNCa P细胞差异表达基因的统计 | 第38-39页 |
4.2.2 基因芯片中差异表达基因的聚类分析 | 第39页 |
4.2.3 基因芯片中差异表达基因作用通路及潜在耐药基因分析 | 第39-44页 |
4.3 激素难治性前列腺癌相关通路关键蛋白的检测 | 第44-46页 |
4.3.1 LNCaP和LNCa P-HR细胞AKT、P-AKT、NF-κB蛋白表达变化 | 第44-45页 |
4.3.2 LNCaP和LNCa P-HR细胞ERK、P-ERK蛋白表达变化 | 第45页 |
4.3.3 LNCaP和LNCa P-HR细胞P38、P-P38蛋白表达变化 | 第45-46页 |
4.4 小分子药物及天然产物对激素难治性前列腺癌细胞增殖的影响 | 第46-48页 |
4.5 番茄红素对激素难治性前列腺癌细胞增殖的影响 | 第48-49页 |
4.6 番茄红素对激素难治性前列腺癌相关通路关键蛋的影响 | 第49-51页 |
4.6.1 番茄红素对LNCa P-HR细胞AKT、P-AKT蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
4.6.2 番茄红素对LNCa P-HR细胞ERK蛋白表达的影响 | 第50页 |
4.6.3 番茄红素对LNCa P-HR细胞P38蛋白表达的影响 | 第50-51页 |
第5章 讨论 | 第51-54页 |
第6章 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
致谢 | 第59页 |