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激素难治性前列腺癌耐药机制的初步研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
中英文对照词表第13-14页
第1章 绪论第14-21页
    1.1 前列腺癌第14-16页
        1.1.1 前列腺癌的分类第14-15页
        1.1.2 前列腺癌的分级第15-16页
        1.1.3 前列腺癌的诊断及治疗第16页
    1.2 激素难治性前列腺癌第16-17页
    1.3 激素难治性前列腺癌转变机制第17-19页
        1.3.1 雄激素受体信号通路第17-18页
        1.3.2 非雄激素受体信号途径第18-19页
    1.4 番茄红素第19页
    1.5 立题依据第19-21页
第2章 材料与试剂第21-25页
    2.1 实验材料第21-23页
        2.1.1 实验仪器第21-22页
        2.1.2 实验试剂第22-23页
        2.1.3 细胞系第23页
    2.2 主要试剂配制第23-25页
        2.2.1 RPMI1640培养液配制第23页
        2.2.2 PBS配制第23页
        2.2.3 0.25%胰酶配制第23页
        2.2.4 SDS-PAGE电泳缓冲液配制(10×)第23-24页
        2.2.5 Western blot转膜液配制(10×)第24页
        2.2.6 TBS缓冲液配制(10×)第24页
        2.2.7 TBST缓冲液配制第24页
        2.2.8 封闭液配制第24页
        2.2.9 10%(W/V)SDS溶液配制第24页
        2.2.10 10%(W/V)过硫酸铵(APS)溶液配制第24页
        2.2.11 上样缓冲液第24页
        2.2.12 番茄红素溶液配制第24-25页
第3章 实验方法第25-35页
    3.1 激素难治性前列腺癌细胞模型的建立第25-27页
        3.1.1 前列腺癌LNCaP细胞的培养第25页
        3.1.2 激素难治性前列腺癌LNCaP-HR细胞的诱导与培养第25-26页
        3.1.3 去雄激素与氟他胺共培养的LNCaP-HR+F细胞的诱导与培养第26页
        3.1.4 LNCaP、LNCa P-HR、LNCaP-HR+F细胞形态学观察第26页
        3.1.5 细胞增殖能力的检测第26页
        3.1.6 LNCaP-HR和LNCaP-HR+F细胞对氟他胺的抵抗性第26-27页
        3.1.7 细胞侵袭能力的检测第27页
    3.2 激素难治性前列腺癌基因表达的检测第27-29页
        3.2.1 细胞RNA的提取第27-28页
        3.2.2 基因芯片扫描第28-29页
        3.2.3 基因芯片中差异表达基因的统计第29页
        3.2.4 基因芯片中差异表达基因的聚类分析第29页
        3.2.5 基因芯片中差异表达基因作用通路及潜在耐药基因分析第29页
    3.3 激素难治性前列腺癌相关通路关键蛋白的检测第29-31页
        3.3.1 前列腺癌细胞的培养第29页
        3.3.2 细胞总蛋白的提取第29-30页
        3.3.3 LNCaP和LNCa P-HR细胞AKT、P-AKT、NF-κB蛋白表达变化第30-31页
        3.3.4 LNCaP和LNCa P-HR细胞ERK、P-ERK蛋白表达变化第31页
        3.3.5 LNCaP和LNCa P-HR细胞P38、P-P38蛋白表达变化第31页
    3.4 小分子药物及天然产物对激素难治性前列腺癌细胞的增殖影响第31-32页
        3.4.1 细胞悬液的制备第31-32页
        3.4.2 种板第32页
        3.4.3 加药第32页
        3.4.4 检测第32页
    3.5 番茄红素对激素难治性前列腺癌细胞增殖的影响第32-33页
        3.5.1 细胞悬液的制备第32-33页
        3.5.2 种板第33页
        3.5.3 加药第33页
        3.5.4 检测第33页
    3.6 番茄红素对激素难治性前列腺癌相关通路关键蛋白的影响第33-34页
        3.6.1 前列腺癌细胞的培养第33页
        3.6.2 番茄红素作用后LNCa P和LNCa P-HR细胞总蛋白的提取第33-34页
        3.6.3 番茄红素作用后LNCaP和LNCa P-HR细胞AKT、P-AKT蛋白表达变化第34页
        3.6.4 番茄红素作用后LNCaP和LNCa P-HR细胞ERK蛋白表达变化第34页
        3.6.5 番茄红素作用后LNCaP和LNCa P-HR细胞P38蛋白表达变化第34页
    3.7 统计学分析第34-35页
第4章 实验结果第35-51页
    4.1 激素难治性前列腺癌细胞模型的建立第35-38页
        4.1.1 前列腺癌LNCaP、LNCaP-HR、LNCaP-HR+F细胞形态学观察第35页
        4.1.2 细胞增殖能力的变化第35-36页
        4.1.3 LNCaP-HR和LNCaP-HR+F细胞对氟他胺的抵抗性第36-37页
        4.1.4 细胞侵袭能力的变化第37-38页
    4.2 激素难治性前列腺癌基因表达变化第38-44页
        4.2.1 激素难治性LNCa P细胞差异表达基因的统计第38-39页
        4.2.2 基因芯片中差异表达基因的聚类分析第39页
        4.2.3 基因芯片中差异表达基因作用通路及潜在耐药基因分析第39-44页
    4.3 激素难治性前列腺癌相关通路关键蛋白的检测第44-46页
        4.3.1 LNCaP和LNCa P-HR细胞AKT、P-AKT、NF-κB蛋白表达变化第44-45页
        4.3.2 LNCaP和LNCa P-HR细胞ERK、P-ERK蛋白表达变化第45页
        4.3.3 LNCaP和LNCa P-HR细胞P38、P-P38蛋白表达变化第45-46页
    4.4 小分子药物及天然产物对激素难治性前列腺癌细胞增殖的影响第46-48页
    4.5 番茄红素对激素难治性前列腺癌细胞增殖的影响第48-49页
    4.6 番茄红素对激素难治性前列腺癌相关通路关键蛋的影响第49-51页
        4.6.1 番茄红素对LNCa P-HR细胞AKT、P-AKT蛋白表达的影响第49-50页
        4.6.2 番茄红素对LNCa P-HR细胞ERK蛋白表达的影响第50页
        4.6.3 番茄红素对LNCa P-HR细胞P38蛋白表达的影响第50-51页
第5章 讨论第51-54页
第6章 结论第54-55页
参考文献第55-59页
致谢第59页

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