摘要 | 第3-8页 |
abstract | 第8-13页 |
中英文缩略词表 | 第16-18页 |
前言 | 第18-22页 |
第一部分 鉴定SPIN1是能与RPL5相互作用的蛋白 | 第22-52页 |
1.引言 | 第22-23页 |
2.材料和方法 | 第23-43页 |
2.1 材料 | 第23-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-43页 |
3.实验结果 | 第43-49页 |
3.1 免疫共沉淀质谱(IP-MS)分析筛选能与RPL5相互作用的蛋白.. | 第43-44页 |
3.2 质谱分析差异表达条带 | 第44-45页 |
3.3 免疫共沉淀验证SPIN1能与RPL5结合 | 第45-49页 |
4.讨论 | 第49-51页 |
5.结论 | 第51-52页 |
第二部分 SPIN1促进肿瘤细胞增殖的作用及机制研究 | 第52-75页 |
1.引言 | 第52-53页 |
2.材料和方法 | 第53-63页 |
2.1 材料 | 第53-54页 |
2.2 实验方法 | 第54-63页 |
3.结果 | 第63-72页 |
3.1 检测调节SPIN1的表达对p53及下游通路靶基因表达的影响 | 第63-65页 |
3.2 检测下调SPIN1的表达对细胞增殖、克隆形成及凋亡的影响,并验证其作用是否依赖于p53 | 第65-67页 |
3.3 裸鼠成瘤实验检测干扰SPIN1的表达对瘤体生长及p53信号通路的影响 | 第67-70页 |
3.4 利用临床标本和Oncomine数据库分析SPIN1在肿瘤组织中的表达情况 | 第70-72页 |
4.讨论 | 第72-74页 |
5.结论 | 第74-75页 |
第三部分 SPIN1负调控p53蛋白稳定性的功能及机制探讨 | 第75-97页 |
1.引言 | 第75-76页 |
2.材料和方法 | 第76-83页 |
2.1 实验材料 | 第76-77页 |
2.2 实验方法 | 第77-83页 |
2.2.1 主要试剂的配制 | 第77-78页 |
2.2.2 Westernblotting | 第78页 |
2.2.3 荧光定量PCR | 第78-83页 |
3.实验结果 | 第83-93页 |
3.1 过表达SPIN1对MDM2介导的p53泛素化降解作用的影响 | 第83-87页 |
3.2 过表达SPIN1对RPL5的功能及RPL5-MDM2结合情况的影响 | 第87-90页 |
3.3 干扰SPIN1的表达后能通过抑制rRNA的生成诱发核糖体刺激 | 第90-93页 |
4.讨论 | 第93-96页 |
5.结论 | 第96-97页 |
全文总结 | 第97-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-107页 |
攻读学位期间主要的成果 | 第107-108页 |
综述 | 第108-124页 |
参考文献 | 第118-124页 |