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基于GWAS定位的番茄灰霉菌抗性相关基因GW9和GW13的功能鉴定

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略语表第11-12页
1.前言第12-21页
    1.1 研究课题的由来第12页
    1.2 文献综述第12-20页
        1.2.1 植物免疫第12页
        1.2.2 细胞自噬与植物免疫第12-13页
        1.2.3 活性氧在植物抗性中的作用第13-15页
        1.2.4 MAPK级联反应在植物体抗病过程中的作用第15-18页
        1.2.5 铜胺氧化酶概述第18-19页
        1.2.6 腺苷酸激酶概述第19-20页
    1.3 研究目的与意义第20-21页
2.材料与方法第21-29页
    2.1 植物材料第21页
    2.2 菌株及载体第21页
    2.3 实验用工具酶、试剂盒及试剂第21-22页
    2.4 转基因材料的抗性鉴定第22-23页
        2.4.1 灰霉菌的保存与孢子制备第22页
        2.4.2 转基因植株的抗性鉴定第22页
        2.4.3 病斑面积统计第22-23页
    2.5 候选基因的功能鉴定第23-29页
        2.5.1 GWAS候选基因对灰霉菌抗性的重复鉴定第23页
        2.5.2 干涉载体的构建第23-24页
        2.5.3 干涉载体的遗传转化第24页
        2.5.4 T0代干涉植株阳性检测第24页
        2.5.5 T0代转基因植株表达量检测第24-25页
        2.5.6 SNP位点的鉴定第25-26页
        2.5.7 灰霉菌诱导表达谱第26页
        2.5.8 基因在激素突变体中的表达量检测第26页
        2.5.9 抗性途径标记基因的表达量检测第26页
        2.5.10 GW9钓饵载体的构建第26-27页
        2.5.11 单克隆测序对比分析互作候选基因第27-28页
        2.5.12 酵母双杂点对点互作验证第28页
        2.5.13 过氧化氢原位检测(DAB染色)第28-29页
3 结果与分析第29-39页
    3.1 GWAS候选基因的载体构建以及转基因材料的获得第29页
    3.2 GWAS候选基因的抗性鉴定第29-31页
        3.2.1 GW9转基因植株抗性鉴定及结果分析第29-30页
        3.2.2 GW13转基因植株的抗性鉴定及结果分析第30-31页
    3.3 转基因T0代植株表达量检测第31-32页
    3.4 基因的功能鉴定第32-39页
        3.4.1 GW9及GW13基因的结构分析第32-34页
        3.4.2 灰霉菌诱导表达谱第34页
        3.4.3 基因在激素突变体中的表达量检测第34-35页
        3.4.4 GW9、GW13转基因材料中抗性标记基因的表达量分析第35-36页
        3.4.5 SNP位点的鉴定第36-38页
        3.4.6 GW9酵母双杂结果分析第38-39页
        3.4.7 活性氧的检测第39页
4.讨论第39-43页
    4.1 GW9功能鉴定结果与讨论第40-41页
    4.2 GW13功能鉴定结果与讨论第41页
    4.3 实验后续工作预想第41-43页
        4.3.1 关于GW9后续工作的设想第41-42页
        4.3.2 关于GW13后续工作的设想第42-43页
参考文献第43-48页
附录第48-50页
致谢第50页

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