摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一章 引言 | 第13-20页 |
1.1 水稻与粮食安全 | 第13页 |
1.2 水稻三大病害 | 第13-15页 |
1.2.1 稻瘟病 | 第13-14页 |
1.2.2 水稻纹枯病 | 第14页 |
1.2.3 水稻白叶枯病 | 第14-15页 |
1.3 水稻抗病策略 | 第15-16页 |
1.4 植物激素对不同病原菌的作用 | 第16-17页 |
1.4.1 病原菌营养方式分类 | 第16页 |
1.4.2 植物激素与抗病 | 第16页 |
1.4.3 乙烯与水稻抗病反应 | 第16-17页 |
1.5 乙烯信号转导通路 | 第17-18页 |
1.5.1 拟南芥中乙烯信号途径 | 第17页 |
1.5.2 水稻中乙烯信号途径 | 第17-18页 |
1.6 EIN3/EILs与抗病 | 第18-19页 |
1.7 研究目的及意义 | 第19页 |
1.8 技术路线 | 第19-20页 |
第二章 转基因系的创建 | 第20-35页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1.植物材料 | 第20页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第20页 |
2.1.3 抗生素 | 第20页 |
2.1.4 酶、试剂盒、引物合成及测序 | 第20页 |
2.1.5 其他化学试剂及耗材、仪器 | 第20-21页 |
2.1.6 培养基 | 第21页 |
2.1.7 引物设计及序列比对 | 第21页 |
2.1.8 本章所用引物信息 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-31页 |
2.2.1 序列信息获取 | 第22页 |
2.2.2 目的基因受稻瘟菌诱导情况验证 | 第22-24页 |
2.2.3 RNAi载体构建 | 第24-29页 |
2.2.4 超表达载体构建 | 第29-30页 |
2.2.5 水稻转化 | 第30-31页 |
2.2.6 T-DNA插入突变体获得 | 第31页 |
2.3.结果与分析 | 第31-34页 |
2.3.1 目的基因信息 | 第31页 |
2.3.2 OsEIL2的表达在稻瘟菌接种后期受诱导 | 第31-32页 |
2.3.3 OsEIL2 RNAi载体构建 | 第32-33页 |
2.3.4 OsEIL2超表达载体的构建 | 第33-34页 |
2.3.5 OsEIL2 T-DNA插入突变体的获得 | 第34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
第三章 转基因水稻的鉴定和抗病性分析 | 第35-47页 |
3.1 实验材料 | 第35-36页 |
3.1.1 植物材料 | 第35页 |
3.1.2 病原菌小种 | 第35页 |
3.1.3 仪器耗材 | 第35页 |
3.1.4 试剂 | 第35页 |
3.1.5 培养基 | 第35-36页 |
3.1.6 本章所用引物 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-40页 |
3.2.1 OsEIL2 RNAi阳性植株鉴定 | 第36-37页 |
3.2.2 OsEIL2超表达植株鉴定 | 第37页 |
3.2.3 突变体鉴定 | 第37-38页 |
3.2.4 稻瘟菌接种及调查方法 | 第38页 |
3.2.5 纹枯菌室内接种及调查 | 第38-39页 |
3.2.6 白叶枯菌接种及调查 | 第39-40页 |
3.3 结果与分析 | 第40-46页 |
3.3.1 OsEIL2 RNAi转基因阳性植株筛选及表型鉴定 | 第40-44页 |
3.3.2 OsEIL2超表达阳性植株的筛选和表型鉴定 | 第44-45页 |
3.3.3 OsEIL2 T-DNA插入突变体鉴定 | 第45-46页 |
3.4 讨论 | 第46-47页 |
第四章 OsEIL2转录活性及其参与的抗病信号途径研究 | 第47-56页 |
4.1 实验材料 | 第47-48页 |
4.1.1 植物材料 | 第47页 |
4.1.2 菌株和载体 | 第47页 |
4.1.3 试剂与耗材 | 第47页 |
4.1.4 仪器设备 | 第47页 |
4.1.5 溶液和培养基配制 | 第47-48页 |
4.1.6 本章所用引物 | 第48页 |
4.2.实验方法 | 第48-52页 |
4.2.1 载体构建 | 第48-49页 |
4.2.2 亚细胞定位 | 第49-50页 |
4.2.3 酵母单杂交 | 第50-51页 |
4.2.4 植物激素通路标记基因表达 | 第51页 |
4.2.5 活性氧(ROS)测定 | 第51-52页 |
4.3.结果与分析 | 第52-55页 |
4.3.1 载体构建 | 第52页 |
4.3.2 OsEIL2定位于水稻和烟草细胞核 | 第52-53页 |
4.3.3 OsEIL2在酵母中具有转录激活功能 | 第53页 |
4.3.4 OsACO1在OsEIL2 RNAi植株中的表达受抑制 | 第53-54页 |
4.3.5 OsEIL2 RNAi植株中ROS的产生不受影响 | 第54-55页 |
4.4.讨论 | 第55-56页 |
第五章 全文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |