| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第18-32页 |
| 1. 真菌毒素严重威胁着食品和饲料安全 | 第18-20页 |
| 1.1 真菌毒素污染事件时有发生 | 第18-19页 |
| 1.2 研究真菌毒素的重要性 | 第19-20页 |
| 2. 真菌毒素在食品饲料中的分布和毒性分析 | 第20-22页 |
| 2.1 重要真菌毒素的主要毒性 | 第21页 |
| 2.2 重要真菌毒素污染分布 | 第21-22页 |
| 3. 构建食品安全保障体系 | 第22页 |
| 4. 真菌毒素检测方法研究进展 | 第22-31页 |
| 4.1 色谱法 | 第23-24页 |
| 4.2 免疫分析方法 | 第24-31页 |
| 5. 本项目的研究目的和意义 | 第31-32页 |
| 第二章 抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备与竞争ELISA检测方法的建立 | 第32-62页 |
| 1. 材料与方法 | 第32-41页 |
| 1.1 主要试剂 | 第32-33页 |
| 1.2 主要仪器 | 第33-34页 |
| 1.3 实验动物和细胞 | 第34页 |
| 1.4 玉米赤霉烯酮偶联物完全抗原的制备与鉴定 | 第34-35页 |
| 1.4.1 玉米赤霉烯酮偶联物完全抗原的制备 | 第34-35页 |
| 1.4.2 玉米赤霉烯酮偶联物完全抗原的鉴定 | 第35页 |
| 1.5 单克隆抗体的制备 | 第35-38页 |
| 1.6 单克隆抗体相关特性的测定 | 第38-39页 |
| 1.6.1 单克隆抗体效价的测定 | 第38页 |
| 1.6.2 单克隆抗体灵敏度的测定 | 第38-39页 |
| 1.6.3 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第39页 |
| 1.7 检测ZEN的间接竞争ELISA方法的建立与优化 | 第39-41页 |
| 1.8 加标样品检测 | 第41页 |
| 1.9 ELISA与试剂盒的比较 | 第41页 |
| 2. 结果 | 第41-56页 |
| 2.1 ZEN完全抗原偶联物的鉴定 | 第41-44页 |
| 2.2 小鼠免疫 | 第44-45页 |
| 2.3 杂交瘤细胞株的筛选 | 第45页 |
| 2.4 杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性测定 | 第45-46页 |
| 2.5 单克隆抗体相关特性的研究 | 第46-48页 |
| 2.6 检测ZEN的间接竞争ELISA方法的建立 | 第48-53页 |
| 2.7 基质影响的消除 | 第53-54页 |
| 2.8 样品检测与回收率测定 | 第54-55页 |
| 2.9 与试剂盒的比较 | 第55-56页 |
| 3. 讨论 | 第56-62页 |
| 3.1 ZEN完全抗原的合成 | 第56-57页 |
| 3.2 单克隆抗体的制备 | 第57-60页 |
| 3.3 ELISA方法的建立 | 第60-62页 |
| 第三章 双重定性胶体金试纸条检测谷物与饲料中的玉米赤霉烯酮和伏马毒素B1 | 第62-94页 |
| 1. 材料与方法 | 第62-73页 |
| 1.1 主要试剂 | 第62-63页 |
| 1.2 主要仪器 | 第63-64页 |
| 1.3 胶体金的制备与鉴定 | 第64页 |
| 1.4 胶体金与单克隆抗体最佳结合pH | 第64页 |
| 1.5 最佳抗体结合量的测定 | 第64-65页 |
| 1.6 免疫胶体金的制备与鉴定 | 第65-66页 |
| 1.7 对金标抗体相关缓冲液的优化 | 第66-67页 |
| 1.8 对试纸条材料和前处理溶液的优化 | 第67-69页 |
| 1.9 对金标抗体和包被抗原浓度的优化 | 第69-70页 |
| 1.10 试纸条的点样及组装 | 第70-71页 |
| 1.11 单一胶体金试纸条检测方法的建立 | 第71-72页 |
| 1.12 双重胶体金试纸条检测方法的建立 | 第72页 |
| 1.13 样品萃取与加标实验 | 第72页 |
| 1.14 天然样本两种检测方法的比较 | 第72-73页 |
| 2. 结果 | 第73-91页 |
| 2.1 胶体金溶液的鉴定 | 第73-75页 |
| 2.2 胶体金与单克隆抗体最佳结合pH的优化 | 第75页 |
| 2.3 胶体金标记抗体的最佳抗体结合量 | 第75-77页 |
| 2.4 免疫胶体金的鉴定 | 第77页 |
| 2.5 金标抗体相关缓冲液的确定 | 第77-78页 |
| 2.6 包被抗原缓冲液的确定 | 第78页 |
| 2.7 试纸条材料和前处理溶液的确定 | 第78-81页 |
| 2.9 包被抗原选择 | 第81-83页 |
| 2.10 金标抗体和包被抗原浓度的确定 | 第83-85页 |
| 2.1 1胶体金试纸条检测特异性的测定 | 第85-86页 |
| 2.12 单一胶体金试纸条对ZEN或FB1检测限的确定 | 第86-87页 |
| 2.13 双重胶体金试纸条对加标样品的检测 | 第87-88页 |
| 2.14 天然样品两种检测方法的比较 | 第88-91页 |
| 3. 讨论 | 第91-94页 |
| 3.1 胶体金试纸条制备 | 第91-92页 |
| 3.2 胶体金方法的优势 | 第92-93页 |
| 3.3 双重胶体金试纸条检测方法的优势 | 第93-94页 |
| 第四章 双重定量胶体金试纸条检测谷物与饲料中的玉米赤霉烯酮和伏马毒素B1 | 第94-111页 |
| 1. 材料与方法 | 第94-101页 |
| 1.1 主要试剂 | 第94-95页 |
| 1.2 主要仪器 | 第95-96页 |
| 1.3 ZEN、FB1完全抗原的制备 | 第96页 |
| 1.4 25 nm胶体金的制备与鉴定 | 第96页 |
| 1.5 免疫胶体金的制备 | 第96页 |
| 1.6 定量胶体金试纸条的制备与组装 | 第96-98页 |
| 1.7 胶体金试纸条的优化 | 第98-99页 |
| 1.8 加标实验 | 第99页 |
| 1.9 检测步骤 | 第99-100页 |
| 1.10天然样本两种检测方法的比较 | 第100-101页 |
| 2. 结果 | 第101-108页 |
| 2.1 定量胶体金试纸方法的制备和优化 | 第101-102页 |
| 2.2 定量胶体金试纸条方法的标准曲线 | 第102-104页 |
| 2.3 加标实验与回收率测定 | 第104-106页 |
| 2.4 天然样品两种检测方法的比较 | 第106-108页 |
| 3. 讨论 | 第108-111页 |
| 3.1 双重定量试纸条中基质影响的消除 | 第108页 |
| 3.2 金标抗体稀释度的优化 | 第108页 |
| 3.3 胶体金试纸条制备中缓冲液与添加物的优化 | 第108-109页 |
| 3.4 双重定量胶体金试纸条的优势 | 第109-111页 |
| 第五章 电化学免疫方法检测谷物类食品中的玉米赤霉烯酮 | 第111-132页 |
| 1. 材料和方法 | 第112-118页 |
| 1.1 材料 | 第112-113页 |
| 1.2 主要仪器 | 第113页 |
| 1.3 对硝基苯磷酸与对硝基苯酚在玻碳电极上的电化学行为 | 第113-114页 |
| 1.4 间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第114-115页 |
| 1.5 电化学检测方法的建立 | 第115-116页 |
| 1.6 电化学检测方法的优化 | 第116页 |
| 1.7 加标样品前处理 | 第116-117页 |
| 1.8 检测步骤 | 第117-118页 |
| 1.9 天然样本两种方法检测比较 | 第118页 |
| 2. 结果 | 第118-128页 |
| 2.1 对硝基苯磷酸与对硝基苯酚在玻碳电极上的电化学行为 | 第118-120页 |
| 2.2 间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第120-121页 |
| 2.3 电化学检测方法的建立 | 第121-123页 |
| 2.4 电化学免疫方法检测ZEN的标准曲线 | 第123-125页 |
| 2.5 加标实验 | 第125-128页 |
| 2.6 两种方法的检测比较 | 第128页 |
| 3. 讨论 | 第128-132页 |
| 3.1 高灵敏检测的实际需求 | 第128-129页 |
| 3.2 与其他检测ZEN的免疫方法的比较 | 第129-132页 |
| 第六章 多种化学发光免疫方法检测谷物类食品中的玉米赤霉烯酮 | 第132-156页 |
| 1. 材料与方法 | 第132-138页 |
| 1.1 主要试剂 | 第132-133页 |
| 1.2 主要仪器 | 第133页 |
| 1.3 ZEN偶联物的合成 | 第133-134页 |
| 1.4 生物素化ZEN-OVA | 第134页 |
| 1.5 制备链霉亲和素-辣根过氧化物酶标记纳米金 | 第134-135页 |
| 1.6 直接竞争化学发光免疫方法的建立 | 第135-136页 |
| 1.7 化学发光免疫方法的优化 | 第136-137页 |
| 1.8 交叉反应性测定 | 第137页 |
| 1.9 样品前处理和回收率测定 | 第137页 |
| 1.10两种检测方法的比较 | 第137-138页 |
| 2. 结果 | 第138-153页 |
| 2.1 ZEN-HRP和ZEN-OVA-biotin的鉴定 | 第138页 |
| 2.2 纳米金标记链霉亲和素-辣根过氧化物酶的鉴定 | 第138页 |
| 2.3 化学发光免疫方法的优化结果 | 第138-148页 |
| 2.4 三种化学发光免疫方法的比较 | 第148-150页 |
| 2.5 交叉反应性测定 | 第150页 |
| 2.6 加标实验 | 第150-152页 |
| 2.7 两种检测方法的比较 | 第152-153页 |
| 3. 讨论 | 第153-156页 |
| 3.1 直接竞争ELISA中信号放大策略的使用 | 第153-154页 |
| 3.2 与其他高灵敏方法的比较 | 第154-156页 |
| 第七章 液相芯片免疫方法检测谷物和饲料中的多种真菌毒素 | 第156-176页 |
| 1. 材料与方法 | 第156-162页 |
| 1.1 主要试剂 | 第156-157页 |
| 1.2 主要仪器 | 第157-158页 |
| 1.3 生物素标记真菌毒素偶联物与抗体包被微球 | 第158页 |
| 1.4 单一毒素液相芯片检测方法的建立与优化 | 第158-159页 |
| 1.5 多重芯片检测方法的建立与优化 | 第159-161页 |
| 1.6 交叉反应性检测 | 第161页 |
| 1.7 加标样品检测 | 第161-162页 |
| 1.8 天然样品检测 | 第162页 |
| 1.9 两种检测方法的比较 | 第162页 |
| 2. 结果 | 第162-173页 |
| 2.1 单一真菌毒素液相芯片检测方法的优化 | 第162-167页 |
| 2.2 多重液相芯片检测方法的优化 | 第167-168页 |
| 2.3 单一真菌毒素液相芯片检测与多重真菌毒素液相芯片检测的比较 | 第168-169页 |
| 2.4 四种真菌毒素同时检测时的标准曲线 | 第169-170页 |
| 2.5 加标检测结果 | 第170-172页 |
| 2.6 两种检测方法的比较 | 第172-173页 |
| 3. 讨论 | 第173-176页 |
| 3.1 液相芯片检测方法的优势 | 第173-174页 |
| 3.2 本研究建立的多种方法的比较 | 第174-176页 |
| 第八章 全文总结 | 第176-177页 |
| 参考文献 | 第177-184页 |
| 附录 主要溶液配方 | 第184-186页 |
| 致谢 | 第186-187页 |
| 攻读博士学位期间已发表的论文 | 第187-188页 |
