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酶解鲻鱼蛋白制备抗氧化肽的研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-8页
第1章 引言第12-24页
    1.1 鲻鱼简介及利用现状第12-13页
        1.1.1 鲻鱼简介第12页
        1.1.2 鲻鱼资源利用现状第12-13页
    1.2 生物活性肽第13-14页
    1.3 抗氧化肽第14-22页
        1.3.1 自由基与氧化损伤第14-15页
        1.3.2 体内外抗氧化物质第15-17页
            1.3.2.1 体内抗氧化系统第16页
            1.3.2.2 外源性抗氧化剂第16-17页
        1.3.3 抗氧化肽研究进展第17-22页
            1.3.3.1 抗氧化肽的作用机理第17-18页
            1.3.3.2 抗氧化肽的评价方法第18-19页
            1.3.3.3 动物蛋白源抗氧化肽第19-20页
            1.3.3.4 植物蛋白源抗氧化肽第20-21页
            1.3.3.5 抗氧化肽的分离纯化与应用前景第21-22页
    1.4 本课题研究背景及意义第22页
    1.5 本课题研究内容第22-24页
第2章 鲻鱼营养学特性与脱脂工艺研究第24-37页
    2.1 材料与仪器第24-26页
    2.2 实验方法第26-29页
        2.2.1 基本理化指标的测定第26页
        2.2.2 氨基酸组成分析第26页
        2.2.3 脂肪酸组成分析第26页
        2.2.4 鲻鱼鱼肉脱脂第26-27页
        2.2.5 脱脂鱼肉的品质评价第27-28页
        2.2.6 鱼肉中2-硫代巴比妥酸值(TBA)的测定第28页
        2.2.7 脱脂对酶解物抗氧化活性的影响第28-29页
            2.2.7.1 DPPH自由基清除率的测定第28-29页
            2.2.7.2 抗脂质过氧化能力测定第29页
    2.3 结果与讨论第29-36页
        2.3.1 鲻鱼营养成分分析第29-30页
        2.3.2 鲻鱼蛋白氨基酸组成分析第30-31页
        2.3.3 鲻鱼鱼肉脂肪酸组成分析第31-32页
        2.3.4 鲻鱼鱼肉脱脂方法的筛选第32-33页
        2.3.5 脱脂鲻鱼鱼肉的品质评价第33-34页
        2.3.6 脱脂对鱼肉酸败情况的影响第34页
        2.3.7 脱脂对酶解产物抗氧化活性的影响第34-36页
            2.3.7.1 DPPH自由基清除活性第34-35页
            2.3.7.2 抗脂质过氧化能力第35-36页
    2.4 本章小结第36-37页
第3章 鲻鱼抗氧化肽的制备与工艺优化第37-54页
    3.1 材料与仪器第37-38页
    3.2 实验方法第38-42页
        3.2.1 蛋白酶活力的测定第38-39页
        3.2.2 鲻鱼蛋白酶解用酶筛选第39-40页
        3.2.3 水解度的测定第40页
        3.2.4 酶解液中可溶性蛋白含量测定第40-41页
        3.2.5 Tricine-SDS-PAGE分析酶解液蛋白质分子量第41页
        3.2.6 酶解液DPPH自由基清除活性测定第41-42页
        3.2.7 鲻鱼蛋白酶解工艺优化第42页
    3.3 结果与讨论第42-53页
        3.3.1 最佳用酶的筛选第42-44页
        3.3.2 酶解单因素实验第44-47页
            3.3.2.1 酶解温度对清除DPPH自由基活性的影响第44-45页
            3.3.2.2 酶解pH对清除DPPH自由基活性的影响第45-46页
            3.3.2.3 酶解时间对清除DPPH自由基活性的影响第46页
            3.3.2.4 加酶量对清除DPPH自由基活性的影响第46-47页
        3.3.3 响应面法优化酶解工艺第47-53页
    3.4 本章小结第53-54页
第4章 鲻鱼多肽体外抗氧化活性与功能特性研究第54-69页
    4.1 材料与仪器第54-55页
    4.2 实验方法第55-58页
        4.2.1 酶解产物抗氧化活性测定第56-57页
            4.2.1.1 DPPH自由基清除实验第56页
            4.2.1.2 超氧阴离子清除实验第56页
            4.2.1.3 羟自由基清除实验第56页
            4.2.1.4 还原力测定第56-57页
            4.2.1.5 亚铁离子螯合能力测定第57页
            4.2.1.6 抗脂质过氧化能力测定第57页
        4.2.2 酶解产物功能特性测定第57-58页
            4.2.2.1 溶解度测定第57页
            4.2.2.2 起泡性与起泡稳定性测定第57-58页
            4.2.2.3 乳化性与乳化稳定性测定第58页
        4.2.3 酶解物氨基酸组成测定第58页
    4.3 结果与讨论第58-67页
        4.3.1 酶解产物的抗氧化活性评价第58-64页
            4.3.1.1 DPPH自由基清除活性第59页
            4.3.1.2 超氧阴离子自由基清除活性第59-60页
            4.3.1.3 羟自由基清除活性第60-61页
            4.3.1.4 还原力的测定第61-62页
            4.3.1.5 亚铁离子螯合能力第62-63页
            4.3.1.6 抗脂质过氧化能力测定第63-64页
        4.3.2 酶解产物的功能活性评价第64-66页
            4.3.2.1 酶解产物的溶解性第64-65页
            4.3.2.2 酶解产物的起泡性第65-66页
            4.3.2.3 酶解产物的乳化性第66页
        4.3.3 酶解产物的氨基酸组成分析第66-67页
    4.4 本章小结第67-69页
第5章 鲻鱼抗氧化肽的分离纯化研究第69-78页
    5.1 材料与仪器第69-70页
    5.2 实验方法第70-72页
        5.2.1 鲻鱼粗多肽的制备第70页
        5.2.2 酶解物分子量测定第70-71页
        5.2.3 抗氧化活性测定第71页
            5.2.3.1 DPPH自由基清除活性测定第71页
            5.2.3.2 超氧阴离子自由基清除活性测定第71页
            5.2.3.3 还原力测定第71页
        5.2.4 Sephadex G-25葡萄糖凝胶层析分离第71页
        5.2.5 反相高效液相色谱法分离第71-72页
        5.2.6 高分辨液质联用仪分析抗氧化肽第72页
    5.3 结果与讨论第72-77页
        5.3.1 酶解物分子量分布第72-73页
        5.3.2 Sephadex G-25葡萄糖凝胶层析分离第73-75页
        5.3.3 RP-HPLC分离抗氧化肽第75-76页
        5.3.4 质谱分析第76-77页
    5.4 本章小结第77-78页
第6章 结论、创新点与展望第78-80页
    6.1 结论第78-79页
    6.2 创新点第79页
    6.3 展望第79-80页
参考文献第80-90页
附录一 实验相关图谱第90-92页
附录二 硕士期间研究成果第92-93页
致谢第93-94页

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