| 摘要 | 第11-12页 |
| ABSTRACT | 第12页 |
| 第一章 绪论 | 第13-21页 |
| 1 脾阴虚证 | 第13-15页 |
| 1.1 脾阴及脾阴虚 | 第13-14页 |
| 1.2 脾阴虚证动物模型 | 第14-15页 |
| 2 肠道微生物的研究进展 | 第15-17页 |
| 2.1 肠道微生物及其作用 | 第15-16页 |
| 2.2 益生菌及微生态制剂 | 第16页 |
| 2.3 肠道菌群与中药代谢 | 第16-17页 |
| 3 肠道菌群的研究方法 | 第17-20页 |
| 3.1 传统的纯培养方法 | 第17页 |
| 3.2 分子生物学方法 | 第17-20页 |
| 4 课题意义与研究内容 | 第20-21页 |
| 第二章 脾阴虚证大鼠模型的建立和治疗 | 第21-27页 |
| 1 材料 | 第21页 |
| 1.1 实验动物 | 第21页 |
| 1.2 药材 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-23页 |
| 2.1 试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.2 模型的建立与反证治疗 | 第22页 |
| 2.3 大鼠粪便样品的收集 | 第22页 |
| 2.4 数据分析 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-24页 |
| 3.1 一般体征观察 | 第23-24页 |
| 3.2 大鼠体重变化情况 | 第24页 |
| 4 结论与讨论 | 第24-27页 |
| 第三章 大鼠肠道菌群总DNA的提取 | 第27-30页 |
| 1 材料 | 第27页 |
| 1.1 实验样品 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-28页 |
| 2.1 DNA提取方法 | 第27-28页 |
| 2.2 总DNA质量检测 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28页 |
| 4 结论与讨论 | 第28-30页 |
| 第四章 脾阴虚证模型ERIC-PCR分子指标的建立 | 第30-40页 |
| 1 材料 | 第30页 |
| 1.1 实验样品 | 第30页 |
| 1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-31页 |
| 2.1 ERIC-PCR反应 | 第30-31页 |
| 2.2 PCR产物检测 | 第31页 |
| 2.3 数据分析 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-39页 |
| 3.1 脾阴虚证模型大鼠ERIC-PCR特征条带的确定 | 第31-32页 |
| 3.2 特征条带净面积和丰度 | 第32-33页 |
| 3.3 ERIC-PCR指纹图谱的相似性系数 | 第33-38页 |
| 3.4 四种复方对脾阴虚证模型的疗效(ERIC-PCR指纹图谱分析法) | 第38-39页 |
| 4 结论与讨论 | 第39-40页 |
| 第五章 脾阴虚证模型16S rDNA-RFLP分子指标的建立 | 第40-54页 |
| 1 材料 | 第40页 |
| 1.1 实验样品 | 第40页 |
| 1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 1.3 主要仪器 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-42页 |
| 2.1 试剂的配制 | 第40页 |
| 2.2 16S rDNA扩增反应 | 第40-41页 |
| 2.3 16S rDNA产物电泳检测 | 第41页 |
| 2.4 16SrDNA产物的纯化及酶切反应 | 第41页 |
| 2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染显色 | 第41-42页 |
| 2.6 数据分析 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-52页 |
| 3.1 16SrDNA-RFLP HaeⅢ酶切指纹图谱评价指标的建立 | 第42-47页 |
| 3.2 16S rDNA-RFLP HinfⅠ酶切指纹图谱评价指标的建立 | 第47-52页 |
| 4 结论与讨论 | 第52-54页 |
| 第六章 脾阴虚大鼠肠道菌群分子指标的测序分析 | 第54-68页 |
| 1 材料 | 第54页 |
| 1.1 实验样品 | 第54页 |
| 1.2 主要试剂 | 第54页 |
| 1.3 主要仪器 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54-57页 |
| 2.1 样品的扩增 | 第54页 |
| 2.2 片段回收及检验 | 第54-55页 |
| 2.3 产物加尾和纯化 | 第55-56页 |
| 2.4 克隆的连接反应 | 第56页 |
| 2.5 热激转化 | 第56页 |
| 2.6 PCR鉴定 | 第56页 |
| 2.7 测序和结果分析 | 第56-57页 |
| 3 结果 | 第57-65页 |
| 3.1 脾阴虚模型ERIC-PCR特征条带340bp | 第57-59页 |
| 3.2 脾阴虚模型16S rDNA-RFLP HaeⅢ酶切特征条带460bp | 第59-62页 |
| 3.3 脾阴虚模型16S rDNA-RFLP HinfⅠ酶切特征条带360bp | 第62-65页 |
| 4 结论与讨论 | 第65-68页 |
| 结论与展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
