| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-22页 |
| 1 膜 I 型基质金属蛋白酶（MMP-14） | 第10-15页 |
| 1.1 基质金属蛋白酶（MMPs）概述 | 第10-11页 |
| 1.2 膜 I 型基质金属蛋白酶（MT1-MMP，MMP-14） | 第11-15页 |
| 1.2.1 MMP-14 的活性调控 | 第12-13页 |
| 1.2.2 MMP-14 的底物 | 第13-14页 |
| 1.2.3 MMP-14 生理和病理作用 | 第14-15页 |
| 2 MMP-14 亲和多肽 | 第15-19页 |
| 2.1 MMP-14 亲和多肽的应用 | 第15-17页 |
| 2.1.1 MMP-14 亲和多肽类抑制剂 | 第15-16页 |
| 2.1.2 MMP-14 亲和多肽在肿瘤成像中的应用 | 第16-17页 |
| 2.2 MMP-14 亲和多肽筛选的手段和靶点 | 第17-19页 |
| 2.2.1 噬菌体展示技术 | 第17-18页 |
| 2.2.2 MMP-14 MT-loop 区 | 第18-19页 |
| 3 本论文的研究目的和研究策略 | 第19-22页 |
| 第二章 野生型 cdMMP-14 及其突变体表达载体的构建和表达、纯化、复性 | 第22-42页 |
| 1 前言 | 第22页 |
| 2 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1 试剂 | 第22-23页 |
| 2.2 实验仪器 | 第23页 |
| 2.3 实验用质粒和菌株 | 第23-24页 |
| 2.4 实验所用到的溶液 | 第24-26页 |
| 3 试验方法 | 第26-34页 |
| 3.1 表达载体的构建 | 第26-32页 |
| 3.1.1 利用 SanPrep 柱式质粒提取试剂盒提取质粒 | 第26-27页 |
| 3.1.2 SOE-PCR 突变目的基因 | 第27-30页 |
| 3.1.3 双酶切各目的基因和 pET21a（+）表达载体 | 第30页 |
| 3.1.4 各目的基因和 pET21a（+）表达载体的连接 | 第30-31页 |
| 3.1.5 重组表达载体 pET21a(+)-WT-cdMMP-14-His6，L1-cdMMP-14-His6、，L2-cdMMP-14-His6和 D-cdMMP-14-His6转化 | 第31页 |
| 3.1.6 重组表达质粒 pET21a(+)-WT-cdMMP-14-His6，L1-cdMMP-14-His6，L2-cdMMP-14-His6和 D-cdMMP-14-His6的筛选 | 第31-32页 |
| 3.2 WT-，L1-，L2-和 D2-cdMMP-14-His6原核表达、纯化和复性 | 第32-34页 |
| 3.2.1 WT-，L1-，L2-和 D2-cdMMP-14-His6包涵体的表达 | 第32页 |
| 3.2.2 WT-，L1-，L2-和 D2-cdMMP-14-His6包涵体的分离、洗涤和溶解 | 第32页 |
| 3.2.3 WT-，L1-，L2-和 D2-cdMMP-14-His6的纯化 | 第32-33页 |
| 3.2.4 WT-，L1-，L2-和 D2-cdMMP-14-His6的复性 | 第33页 |
| 3.2.5 WT-，L1-，L2-和 D2-cdMMP-14-His6复性后的活性检测 | 第33-34页 |
| 4 结果与讨论 | 第34-42页 |
| 4.1 SOE-PCR 连接 cdMMP-14-gene A 和 cdMMP-14-gene B | 第34-35页 |
| 4.2 重组表达载体 pET21a(+)-cdMMP-14-His6， L1-cdMMP-14-His6，L2-cdMMP-14-His6和 D-cdMMP-14-His6的 PCR 和双酶切验证 | 第35-36页 |
| 4.3 WT-，L1-，L2-，D2-cdMMP-14-His6的表达纯化 | 第36-38页 |
| 4.4 WT-，L1-，L2-，D2-cdMMP-14-His6的复性 | 第38页 |
| 4.5 WT-，L1-，L2-，D2-cdMMP-14-His6复性后的活性检测 | 第38-40页 |
| 4.6 小结 | 第40-42页 |
| 第三章 MT-loop 区亲和多肽的筛选 | 第42-53页 |
| 1 前言 | 第42页 |
| 2 实验材料 | 第42-44页 |
| 2.1 试剂 | 第42页 |
| 2.2 仪器 | 第42-43页 |
| 2.3 实验用到的溶液 | 第43-44页 |
| 2.4 实验用菌株 | 第44页 |
| 3 实验方法 | 第44-48页 |
| 3.1 噬菌体滴度测定 | 第44-45页 |
| 3.2 以 D-cdMMP-14 和 WT-cdMMP-14 为靶分子进行亲和多肽的筛选 | 第45-46页 |
| 3.3 噬菌斑的扩增和保存 | 第46-47页 |
| 3.4 ELISA 检测最后筛选得到噬菌体（展示的多肽）对 WT-cdMMP-14-His6靶分子的结合特异性 | 第47-48页 |
| 4 结果与讨论 | 第48-53页 |
| 4.1 噬菌体展示十二肽库的筛选 | 第48-50页 |
| 4.2 噬菌体单克隆（噬菌体上展示的多肽）对 MT-loop 区（WT-cdMMP-14）的结合特异性 | 第50-51页 |
| 4.3 小结 | 第51-53页 |
| 总结 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-66页 |
| 作者简介及攻读硕士期间所取得成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
