| 英文缩写注释表 | 第4-5页 |
| 内容提要 | 第5-11页 |
| 第一部分 lncRNA UCA1 在胃癌中的作用 | 第11-36页 |
| 第一章 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 生命过程中的长链非编码 RNA | 第11-12页 |
| 1.1.1 长链非编码 RNA 简介 | 第11页 |
| 1.1.2 lncRNA 的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.2 lncRNA 与疾病 | 第12-15页 |
| 1.2.1 肿瘤中的 lncRNA | 第12-15页 |
| 1.2.1.1 多种肿瘤中的 lncRNA | 第13-14页 |
| 1.2.1.2 胃癌中的 lncRNA | 第14-15页 |
| 1.2.2 其他疾病中的 lncRNA | 第15页 |
| 1.3 lncRNA UCA1 与胃癌的发生 | 第15页 |
| 1.4 本研究的立题目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 实验研究 | 第17-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-21页 |
| 2.1.1 组织样本与临床资料 | 第17页 |
| 2.1.2 细胞株和质粒 | 第17页 |
| 2.1.3 引物和 siRNA 序列 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要试剂与溶液 | 第18-20页 |
| 2.1.4.1 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4.2 主要溶液 | 第19-20页 |
| 2.1.5 实验所用仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.6 计算机辅助工具 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 lncRNA 芯片分析 | 第21页 |
| 2.2.2 质粒构建 | 第21-23页 |
| 2.2.2.1 UCA1 表达载体构建 | 第21-23页 |
| 2.2.2.2 PGL3-UCA1 系列质粒的构建 | 第23页 |
| 2.2.3 细胞培养及转染 | 第23-24页 |
| 2.2.4 组织及细胞总 RNA 的提取和实时定量 PCR | 第24-25页 |
| 2.2.5 CCK-8 检测细胞增殖和克隆形成实验 | 第25-26页 |
| 2.2.6 细胞侵袭转移实验 | 第26页 |
| 2.2.7 细胞周期检测 | 第26页 |
| 2.2.8 western-blot 实验 | 第26-27页 |
| 2.2.9 CCK-8 检测细胞耐药性 | 第27页 |
| 2.2.10 双荧光素酶报告基因实验 | 第27-28页 |
| 第三章 实验结果 | 第28-34页 |
| 3.1 胃癌组织的 lncRNA 芯片分析及实时定量 PCR 验证 | 第28页 |
| 3.2 胃癌细胞中 UCA1 的作用研究 | 第28-31页 |
| 3.2.1 UCA1 表达质粒的构建 | 第28-29页 |
| 3.2.2 UCA1 促进胃癌细胞增殖 | 第29-30页 |
| 3.2.3 UCA1 促进细胞的侵袭转移能力 | 第30页 |
| 3.2.4 在 PHM82 细胞系中干涉 UCA1，细胞发生 G2/M 期阻滞 | 第30页 |
| 3.2.5 UCA1 对细胞耐阿霉素作用的影响 | 第30-31页 |
| 3.3 阿霉素的加入诱发 UCA1 表达量提高的作用机制研究 | 第31-34页 |
| 第四章 讨论 | 第34-35页 |
| 第五章 结论 | 第35-36页 |
| 第二部分 胃癌血浆中 RNA 肿瘤标志物的筛选 | 第36-51页 |
| 第一章 引言 | 第36-38页 |
| 1.1 血浆肿瘤标志物 | 第36页 |
| 1.2 外周血循环 RNA 作为肿瘤标志物的概述 | 第36页 |
| 1.3 胃癌血浆肿瘤标志物现状 | 第36-37页 |
| 1.4 本研究的立题目的和意义 | 第37-38页 |
| 第二章 实验研究 | 第38-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 2.1.1 血浆样本及组织样本 | 第38页 |
| 2.1.2 引物设计 | 第38-39页 |
| 2.1.3 主要试剂和溶液 | 第39页 |
| 2.1.4 实验所用仪器设备 | 第39页 |
| 2.1.5 计算机辅助工具 | 第39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-42页 |
| 2.2.1 血浆标本的 RNA 提取和转录组芯片分析 | 第39-40页 |
| 2.2.2 血浆标本和组织样本的 RNA 提取和实时定量 PCR 检测 | 第40-42页 |
| 第三章 实验结果 | 第42-49页 |
| 3.1 胃癌血浆中差异表达的 RNA 分析 | 第42-48页 |
| 3.2 候选差异表达 RNA 在胃癌组织中的表达情况分析 | 第48页 |
| 3.3 血浆中同一基因不同片段分布的初步分析 | 第48-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 第三部分 血浆 miRNA 快速制备方法建立和优化 | 第51-60页 |
| 第一章 引言 | 第51-52页 |
| 第二章 实验研究 | 第52-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第52页 |
| 2.2 实验方法 | 第52-54页 |
| 2.2.1 提取液 | 第52页 |
| 2.2.2 血浆 miRNA 提取 | 第52页 |
| 2.2.3 RNA 加尾和反转录 | 第52-53页 |
| 2.2.4 实时定量 PCR | 第53-54页 |
| 第三章 实验结果 | 第54-58页 |
| 3.1 提取液法提取血浆 miRNA 方法的建立和优化 | 第54-56页 |
| 3.2 提取液法提取血浆 miRNA 重复性分析 | 第56页 |
| 3.3 不同血浆用量对提取液法提取 miRNA 的影响 | 第56-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 中文摘要 | 第69-71页 |
| Abstract | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附录1 ：胃癌组织样本资料汇总 | 第75-76页 |
| 附录2 ：芯片检测血浆中R NA所用样本资料总汇 | 第76-78页 |
| 附录3 ：实时定量检测血浆中R NA样本资料总汇 | 第78-83页 |
