摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 绪论 | 第10-16页 |
·研究目的和意义 | 第10页 |
·文献综述-FMDV 感染机体及机体抗感染的参与者 | 第10-16页 |
·FMDV 感染宿主机制研究 | 第10-12页 |
·FMDV 感染机体的参与者 | 第12-13页 |
·FMDV L 蛋白酶 | 第12页 |
·2C 蛋白 | 第12-13页 |
·3C 蛋白酶 | 第13页 |
·RNA 解旋酶A | 第13页 |
·模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)和细胞因子抵抗FMDV感染 | 第13-14页 |
·总结 | 第14-16页 |
第二章 FMDV 感染PK-15 细胞后细胞基因表达谱变化的分析 | 第16-31页 |
实验一 利用FQ-PCR 方法确定FMDV 感染细胞后的取样时间点 | 第16-24页 |
·材料和方法 | 第16-17页 |
·材料 | 第16页 |
·PK-15 细胞与FMDV RNA 提取 | 第16页 |
·FMDV 3D 基因的引物设计与合成 | 第16页 |
·FQ-PCR 标准品的制备 | 第16-17页 |
·标准曲线的建立 | 第17页 |
·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法比较及其敏感性分析 | 第17页 |
·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法比较 | 第17页 |
·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法的敏感性分析 | 第17页 |
·实验结果 | 第17-23页 |
·FMDV 3D 基因重组质粒的PCR 扩增 | 第17-18页 |
·FMDV 3D 基因标准曲线的建立 | 第18-19页 |
·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法检测FMDV | 第19-21页 |
·FQ-PCR 方法检测FMDV 结果 | 第19-20页 |
·常规PCR 方法检测FMDV 结果 | 第20-21页 |
·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法检测FMDV 的敏感性分析结果 | 第21-23页 |
·总结 | 第23-24页 |
实验二 O 型FMDV 感染PK-15 细胞后的细胞基因表达谱变化的分析 | 第24-31页 |
·材料和方法 | 第24-25页 |
·材料 | 第24页 |
·方法 | 第24-25页 |
·PK-15 细胞和FMDV 感染细胞 | 第24页 |
·总RNA 的提取及浓度、纯度和完整性检测 | 第24-25页 |
·猪基因表达谱芯片试验 | 第25页 |
·猪基因表达谱芯片试验数据分析 | 第25页 |
·实验结果 | 第25-29页 |
·PK-15 细胞RNA 浓度、纯度和完整性检测结果 | 第25-26页 |
·猪基因表达谱芯片的数据分析结果 | 第26-29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第三章 RIG-Ⅰ真核表达载体的构建及其在PK-15 细胞中的瞬时表达 | 第31-39页 |
·材料与方法 | 第31-32页 |
·口蹄疫病毒及细胞 | 第31页 |
·质粒、菌株及工具酶 | 第31页 |
·PK-15 细胞的RNA 提取 | 第31页 |
·引物的设计与合成 | 第31-32页 |
·RIG 基因克隆和表达质粒的构建 | 第32页 |
·重组表达质粒转染PK-15 细胞 | 第32页 |
·FQ-PCR 检测FMDV 增殖变化和IFN 表达情况 | 第32页 |
·结果 | 第32-38页 |
·重组表达质粒pEGFP-RIG-N 和pEGFP-RIG-C 的鉴定 | 第32-34页 |
·EGFP 在PK-15 细胞中的表达 | 第34-35页 |
·荧光定量PCR 检测FMDV 增殖变化和IFN 表达情况的结果 | 第35-38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
第四章 全文结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
作者简历 | 第47页 |