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口蹄疫病毒感染PK-15细胞后细胞基因表达谱变化的分析

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 绪论第10-16页
   ·研究目的和意义第10页
   ·文献综述-FMDV 感染机体及机体抗感染的参与者第10-16页
     ·FMDV 感染宿主机制研究第10-12页
     ·FMDV 感染机体的参与者第12-13页
       ·FMDV L 蛋白酶第12页
       ·2C 蛋白第12-13页
       ·3C 蛋白酶第13页
       ·RNA 解旋酶A第13页
     ·模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)和细胞因子抵抗FMDV感染第13-14页
     ·总结第14-16页
第二章 FMDV 感染PK-15 细胞后细胞基因表达谱变化的分析第16-31页
 实验一 利用FQ-PCR 方法确定FMDV 感染细胞后的取样时间点第16-24页
   ·材料和方法第16-17页
     ·材料第16页
     ·PK-15 细胞与FMDV RNA 提取第16页
     ·FMDV 3D 基因的引物设计与合成第16页
     ·FQ-PCR 标准品的制备第16-17页
     ·标准曲线的建立第17页
     ·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法比较及其敏感性分析第17页
       ·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法比较第17页
       ·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法的敏感性分析第17页
   ·实验结果第17-23页
     ·FMDV 3D 基因重组质粒的PCR 扩增第17-18页
     ·FMDV 3D 基因标准曲线的建立第18-19页
     ·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法检测FMDV第19-21页
       ·FQ-PCR 方法检测FMDV 结果第19-20页
       ·常规PCR 方法检测FMDV 结果第20-21页
     ·FQ-PCR 方法和常规PCR 方法检测FMDV 的敏感性分析结果第21-23页
   ·总结第23-24页
 实验二 O 型FMDV 感染PK-15 细胞后的细胞基因表达谱变化的分析第24-31页
   ·材料和方法第24-25页
     ·材料第24页
     ·方法第24-25页
       ·PK-15 细胞和FMDV 感染细胞第24页
       ·总RNA 的提取及浓度、纯度和完整性检测第24-25页
       ·猪基因表达谱芯片试验第25页
       ·猪基因表达谱芯片试验数据分析第25页
   ·实验结果第25-29页
     ·PK-15 细胞RNA 浓度、纯度和完整性检测结果第25-26页
     ·猪基因表达谱芯片的数据分析结果第26-29页
   ·讨论第29-31页
第三章 RIG-Ⅰ真核表达载体的构建及其在PK-15 细胞中的瞬时表达第31-39页
   ·材料与方法第31-32页
     ·口蹄疫病毒及细胞第31页
     ·质粒、菌株及工具酶第31页
     ·PK-15 细胞的RNA 提取第31页
     ·引物的设计与合成第31-32页
     ·RIG 基因克隆和表达质粒的构建第32页
     ·重组表达质粒转染PK-15 细胞第32页
     ·FQ-PCR 检测FMDV 增殖变化和IFN 表达情况第32页
   ·结果第32-38页
     ·重组表达质粒pEGFP-RIG-N 和pEGFP-RIG-C 的鉴定第32-34页
     ·EGFP 在PK-15 细胞中的表达第34-35页
     ·荧光定量PCR 检测FMDV 增殖变化和IFN 表达情况的结果第35-38页
   ·讨论第38-39页
第四章 全文结论第39-40页
参考文献第40-46页
致谢第46-47页
作者简历第47页

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