| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-23页 |
| ·细胞毒性 T 淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes,CTL)表位的预测方法 | 第13-15页 |
| ·结合基序法 | 第13页 |
| ·矩阵法 | 第13页 |
| ·人工神经网络(Artificial neural network,ANN) | 第13-14页 |
| ·基于结构的表位预测 | 第14-15页 |
| ·基于抗原提呈途径的表位预测 | 第15页 |
| ·鸡MHC I 类分子的结构和功能 | 第15-18页 |
| ·禽流感病毒 | 第18-20页 |
| ·禽流感病毒的基因组结构 | 第18页 |
| ·NP 的结构和功能 | 第18-19页 |
| ·禽流感病毒T 细胞表位的研究 | 第19-20页 |
| ·T 细胞表位活性检测方法 | 第20-22页 |
| ·~(51)Cr 释放试验 | 第20-21页 |
| ·MHC 四聚体技术 | 第21页 |
| ·T 淋巴细胞增殖实验 | 第21页 |
| ·酶联免疫斑点实验 | 第21-22页 |
| ·研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 鸡MHC I 类分子肽结合槽的同源模建及其表面性质分析 | 第23-30页 |
| ·材料与方法 | 第23-24页 |
| ·服务器与软件 | 第23页 |
| ·MHC I 类分子的蛋白质序列 | 第23页 |
| ·同源模建 | 第23页 |
| ·模型评估 | 第23页 |
| ·结合槽的表面性质分析 | 第23-24页 |
| ·结果 | 第24-28页 |
| ·模建及评估结果 | 第24-26页 |
| ·表面性质分析结果 | 第26-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 H5 亚型禽流感NP 中鸡MHC 限制性CTL 表位的预测 | 第30-37页 |
| ·材料与方法 | 第30-31页 |
| ·服务器与软件 | 第30页 |
| ·NP 蛋白序列和MHC I 类分子结合槽的结构 | 第30页 |
| ·基序筛选 | 第30页 |
| ·分子对接 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-35页 |
| ·对接方法的验证 | 第31-32页 |
| ·基序筛选结果 | 第32-34页 |
| ·对接结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 禽流感病毒NP 表达载体的构建 | 第37-46页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·基因、质粒和血清 | 第37页 |
| ·NP 蛋白、菌株和细胞系 | 第37页 |
| ·酶和主要试剂 | 第37页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第37-38页 |
| ·实验动物 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·H5 亚型AIV DNA 重组质粒pCAGGS-NP 的构建 | 第38-39页 |
| ·IFA 检测NP 的瞬时表达 | 第39-40页 |
| ·Western blot 检测NP 的瞬时表达 | 第40页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第40页 |
| ·免疫用质粒的大量制备 | 第40-41页 |
| ·pCAGGS-NP 免疫及免疫后血清中抗体的检测 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-44页 |
| ·重组质粒pCAGGS-NP 的酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·NP 表达的IFA 检测 | 第42页 |
| ·NP 表达的Western blot 检测 | 第42-43页 |
| ·间接ELISA 检测方法反应条件的确定 | 第43-44页 |
| ·血清中NP 抗体的检测 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 H5 亚型禽流感NP 中鸡MHC 限制性CTL 表位的鉴定 | 第46-50页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·短肽 | 第46页 |
| ·酶和主要的试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·pCAGGS-NP 免疫后鸡脾淋巴细胞的制备 | 第46页 |
| ·CD8~+ T 淋巴细胞增殖实验 | 第46-47页 |
| ·鸡γ干扰素的(Interferon, IFN)ELISA 检测 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-49页 |
| ·CD8~+ T 淋巴细胞的增值 | 第47-48页 |
| ·鸡IFN-γ分泌的ELISA 检测结果 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第六章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |