摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词表(Abbreviations) | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 研究问题由来 | 第12页 |
1.2 毛囊及毛囊生物学 | 第12-17页 |
1.2.1 毛囊的发生 | 第12-14页 |
1.2.2 毛囊的形态结构 | 第14-15页 |
1.2.3 毛囊的类型 | 第15页 |
1.2.4 毛囊的周期性生长 | 第15-17页 |
1.3 毛发纤维的结构特性和成分 | 第17-20页 |
1.3.1 角蛋白 | 第18-19页 |
1.3.2 角蛋白关联蛋白 | 第19-20页 |
1.4 特异表达启动子的研究现状 | 第20-23页 |
1.4.1 启动子的结构和分类 | 第20-21页 |
1.4.2 启动子的研究方法 | 第21-23页 |
1.5 研究目的和意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-37页 |
2.1 材料 | 第24-25页 |
2.1.1 组织样品 | 第24页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第24-25页 |
2.2 方法 | 第25-37页 |
2.2.1 本研究的技术路线 | 第25-26页 |
2.2.2 RT-PCR法鉴定候选基因表达模式 | 第26-30页 |
2.2.2.1 绵羊毛囊RNA抽提 | 第26页 |
2.2.2.2 绵羊各组织RNA抽提 | 第26-27页 |
2.2.2.3 cDNA的获得 | 第27-28页 |
2.2.2.4 候选基因表达模式的鉴定 | 第28-30页 |
2.2.3 通过q-PCR的方法对绵羊毛囊特异表达基因的进行鉴定 | 第30-31页 |
2.2.4 绵羊KRTAP13.1,KRTAP3.3基因上游调控序列的克隆 | 第31-32页 |
2.2.5 KRTAP13.1P-ZSGreenl-1表达载体构建 | 第32-34页 |
2.2.6 绵羊KRTAP13.1基因原位杂交定位分析 | 第34-37页 |
2.2.6.1 绵羊皮肤切片制作 | 第34页 |
2.2.6.2 RNA原位杂交 | 第34-37页 |
3 结果 | 第37-54页 |
3.1 藏绵羊各组织RNA提取结果 | 第37页 |
3.2 15个绵羊皮肤和毛囊特异表达基因组织表达谱鉴定结果 | 第37-39页 |
3.3 10个绵羊毛囊特异表达候选基因q-PCR鉴定结果 | 第39-41页 |
3.4 绵羊KRTAP13.1,KRTAP3.3基因上游调控序列的克隆 | 第41页 |
3.5 KRTAP13.1基因启动子表达载体的构建及转基因小鼠的制作 | 第41-45页 |
3.6 绵羊KRTAP13.1基因原位杂交结果 | 第45-46页 |
3.7. 绵羊与其它物种KRTAP13.1基因编码区核苷酸序列的比较结果 | 第46-50页 |
3.8 绵羊KRTAP13.1蛋白进化分析 | 第50-51页 |
3.9 绵羊KRTAP13.1蛋白的二级结构分析 | 第51-52页 |
3.10 绵羊KRTAP13.1蛋白氨基酸组成分析 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-58页 |
4.1 转基因动物育种技术对提高羊毛品质的重要作用 | 第54页 |
4.2 关于绵羊毛囊特异表达基因的筛选方法 | 第54-55页 |
4.3 关于启动子表达载体的构建 | 第55-56页 |
4.4 绵羊KRTAP13.1基因在毛囊中特异表达 | 第56-57页 |
4.5 报告基因的选择 | 第57-58页 |
5 小结 | 第58-60页 |
5.1 本研究的主要结论和成果 | 第58页 |
5.2 本研究的创新点和特色 | 第58-59页 |
5.3 本研究的不足和下一步工作建议 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
附录:在读期间发表论文情况 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |