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橡胶树内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Czk1抗菌活性物质的初步研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
上篇 文献综述第12-26页
    第一章 橡胶树病害研究进展第12-14页
        1 橡胶树白粉病为害及其防治第12-13页
        2 橡胶树炭疽病为害及其防治第13页
        3 橡胶树根病的为害及其防治第13-14页
        4 橡胶树白粉病、炭疽病以及根病的生物防治前景第14页
    第二章 枯草芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用及作用机制第14-18页
        1 枯草芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用第14-15页
        2 枯草芽孢杆菌作用机制第15-18页
            2.1 营养和空间位点竞争第15-16页
            2.2 分泌拮抗物质第16-18页
                2.2.1 核糖体合成途径第16-17页
                2.2.2 诱导植物抗性第17页
                2.2.3 促进植物生长第17-18页
    第三章 枯草芽孢杆菌产生的脂肽类抗菌物质研究概况第18-25页
        1 脂肽类抗生素的结构特点和作用机理第18-19页
        2 脂肽类合成相关基因第19-20页
        3 脂肽类抗生素的分离纯化第20-23页
        4 基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOP-MS)技术第23页
        5 肽质量指纹图谱分析鉴定第23-25页
    第四章 本研究的目的和意义第25-26页
下篇 研究内容第26-68页
    第一章 橡胶树枯草芽孢杆菌Czk1抑菌活性物质的理化性质第26-38页
        1 材料与方法第26-29页
            1.1 材料第26-27页
            1.2 方法第27-29页
                1.2.1 枯草芽孢杆菌Czk1发酵液中活性物质的初步定位第27页
                1.2.2 Czk1发酵上清液对温度、pH值、紫外线和蛋白酶K的耐受性第27-28页
                1.2.3 Czk1发酵上清液对有机溶剂的敏感性第28页
                1.2.4 Czk1发酵上清液对金属离子的敏感性第28页
                1.2.5 Czk1发酵上清液酸沉淀后的活性检测第28页
                1.2.6 不同培养基、接种量、培养时间以及培养基不同PH值对拮抗活性的影响第28-29页
                1.2.7 发酵上清液颜色反应第29页
        2 结果与分析第29-36页
            2.1 枯草芽孢杆菌Czk1发酵液中活性成分产生部位第29-30页
            2.2 发酵上清液热稳定性第30-32页
            2.3 pH耐受性第32页
            2.4 对蛋白酶K和紫外线敏感性第32-33页
            2.5 有机溶剂和金属离子稳定性第33页
            2.6 酸沉淀甲醇萃取第33-34页
            2.7 不同培养基、接种量、培养时间以及培养基不同pH值对拮抗活性的影响第34-36页
                2.7.1 不同培养基对拮抗活性的影响第34页
                2.7.2 不同接种量对拮抗活性的影响第34-35页
                2.7.3 不同培养时间对拮抗活性的影响第35页
                2.7.4 培养基不同pH值对拮抗活性的影响第35-36页
            2.8 发酵上清液颜色反应第36页
        3 讨论第36-38页
    第二章 枯草芽孢杆菌产生的脂肽类抗菌物质相关基因克隆第38-44页
        1 材料和方法第38-42页
            1.1 菌株第38页
            1.2 引物第38页
            1.3 试剂盒、试剂及酶类第38-39页
            1.4 主要仪器第39页
            1.5、方法第39-42页
                1.5.1 细菌总DNA提取第39-40页
                1.5.2 PCR扩增第40-42页
        2 结果分析第42-43页
            2.1 细菌总DNA提取和PCR扩增结果第42页
            2.2 测序结果的核苷酸比对分析第42-43页
            2.3 sfp基因氨基酸序列分析第43页
        3 讨论第43-44页
    第三章 枯草芽孢杆菌Czk1脂肽类MALDI-TOF-MS分析第44-54页
        1 材料第44页
            1.1 供试菌株第44页
            1.2 培养基第44页
            1.3 主要实验器材和试剂第44页
        2 方法第44-45页
            2.1 脂肽类的提取制备第44-45页
            2.2 葡聚糖凝胶Sephadex G25层析纯化第45页
            2.3 各组分的活性检测第45页
            2.4 MALDI-TOF-MS分析第45页
        3 结果第45-52页
            3.1 原位酸水解第45-46页
            3.2 各组分对橡胶树炭疽病菌RC178的活性检测第46-48页
            3.3 MALDI-TOF-MS分析第48-52页
        4 讨论第52-54页
    第四章 脂肽类粗提物对橡胶树炭疽病的抑制及其抗性诱导作用第54-64页
        1 材料和方法第54-57页
            1.1 供试材料第54页
            1.2 培养基第54-55页
            1.3 发酵液制备第55页
            1.4 脂肽类抗菌物质的提取第55页
            1.5 脂肽类粗提物抑菌平板实验第55页
            1.6 脂肽类粗提物对孢子萌发的影响第55页
            1.7 脂肽类抗菌物质对橡胶树炭疽病菌离体和活体叶片的防治第55-56页
                1.7.1 离体叶片防治第55-56页
                1.7.2 活体叶片防治第56页
            1.8 脂肽类抗菌物质对橡胶植株相关酶活性的测定第56-57页
                1.8.1 试验处理第56页
                1.8.2 POD的提取和测定第56页
                1.8.3 PPO的提取和测定第56页
                1.8.4 PAL的提取和测定第56-57页
        2 结果和分析第57-62页
            2.1 脂肽类抗菌物质抑菌平板实验第57-58页
            2.2 脂肽类粗提物对孢子萌发的影响第58-59页
            2.2 脂肽类抗菌物质对橡胶树炭疽病离体和活体叶片的抑制效果第59-61页
            2.3 脂肽类抗菌物质诱导橡胶树抗性作用第61-62页
        3 结论和讨论第62-64页
    第五章 脂肽类粗提物对橡胶树白粉病盆栽防治效果第64-68页
        1 材料和方法第64-65页
            1.1 供试材料第64页
            1.2 供试药剂第64页
            1.3 供试病原菌第64页
            1.4 方法第64-65页
                1.4.1 橡胶树粉孢(Oidium heveae sternm)的单斑分离纯化第64页
                1.4.2 实验处理第64-65页
            1.5 数据处理第65页
        2 结果与分析第65-66页
        3 讨论第66-68页
研究展望第68-69页
参考文献第69-74页
附录第74-78页
攻读硕士期间发表文章第78-79页
致谢第79页

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