摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
上篇 文献综述 | 第12-26页 |
第一章 橡胶树病害研究进展 | 第12-14页 |
1 橡胶树白粉病为害及其防治 | 第12-13页 |
2 橡胶树炭疽病为害及其防治 | 第13页 |
3 橡胶树根病的为害及其防治 | 第13-14页 |
4 橡胶树白粉病、炭疽病以及根病的生物防治前景 | 第14页 |
第二章 枯草芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用及作用机制 | 第14-18页 |
1 枯草芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用 | 第14-15页 |
2 枯草芽孢杆菌作用机制 | 第15-18页 |
2.1 营养和空间位点竞争 | 第15-16页 |
2.2 分泌拮抗物质 | 第16-18页 |
2.2.1 核糖体合成途径 | 第16-17页 |
2.2.2 诱导植物抗性 | 第17页 |
2.2.3 促进植物生长 | 第17-18页 |
第三章 枯草芽孢杆菌产生的脂肽类抗菌物质研究概况 | 第18-25页 |
1 脂肽类抗生素的结构特点和作用机理 | 第18-19页 |
2 脂肽类合成相关基因 | 第19-20页 |
3 脂肽类抗生素的分离纯化 | 第20-23页 |
4 基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOP-MS)技术 | 第23页 |
5 肽质量指纹图谱分析鉴定 | 第23-25页 |
第四章 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
下篇 研究内容 | 第26-68页 |
第一章 橡胶树枯草芽孢杆菌Czk1抑菌活性物质的理化性质 | 第26-38页 |
1 材料与方法 | 第26-29页 |
1.1 材料 | 第26-27页 |
1.2 方法 | 第27-29页 |
1.2.1 枯草芽孢杆菌Czk1发酵液中活性物质的初步定位 | 第27页 |
1.2.2 Czk1发酵上清液对温度、pH值、紫外线和蛋白酶K的耐受性 | 第27-28页 |
1.2.3 Czk1发酵上清液对有机溶剂的敏感性 | 第28页 |
1.2.4 Czk1发酵上清液对金属离子的敏感性 | 第28页 |
1.2.5 Czk1发酵上清液酸沉淀后的活性检测 | 第28页 |
1.2.6 不同培养基、接种量、培养时间以及培养基不同PH值对拮抗活性的影响 | 第28-29页 |
1.2.7 发酵上清液颜色反应 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-36页 |
2.1 枯草芽孢杆菌Czk1发酵液中活性成分产生部位 | 第29-30页 |
2.2 发酵上清液热稳定性 | 第30-32页 |
2.3 pH耐受性 | 第32页 |
2.4 对蛋白酶K和紫外线敏感性 | 第32-33页 |
2.5 有机溶剂和金属离子稳定性 | 第33页 |
2.6 酸沉淀甲醇萃取 | 第33-34页 |
2.7 不同培养基、接种量、培养时间以及培养基不同pH值对拮抗活性的影响 | 第34-36页 |
2.7.1 不同培养基对拮抗活性的影响 | 第34页 |
2.7.2 不同接种量对拮抗活性的影响 | 第34-35页 |
2.7.3 不同培养时间对拮抗活性的影响 | 第35页 |
2.7.4 培养基不同pH值对拮抗活性的影响 | 第35-36页 |
2.8 发酵上清液颜色反应 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-38页 |
第二章 枯草芽孢杆菌产生的脂肽类抗菌物质相关基因克隆 | 第38-44页 |
1 材料和方法 | 第38-42页 |
1.1 菌株 | 第38页 |
1.2 引物 | 第38页 |
1.3 试剂盒、试剂及酶类 | 第38-39页 |
1.4 主要仪器 | 第39页 |
1.5、方法 | 第39-42页 |
1.5.1 细菌总DNA提取 | 第39-40页 |
1.5.2 PCR扩增 | 第40-42页 |
2 结果分析 | 第42-43页 |
2.1 细菌总DNA提取和PCR扩增结果 | 第42页 |
2.2 测序结果的核苷酸比对分析 | 第42-43页 |
2.3 sfp基因氨基酸序列分析 | 第43页 |
3 讨论 | 第43-44页 |
第三章 枯草芽孢杆菌Czk1脂肽类MALDI-TOF-MS分析 | 第44-54页 |
1 材料 | 第44页 |
1.1 供试菌株 | 第44页 |
1.2 培养基 | 第44页 |
1.3 主要实验器材和试剂 | 第44页 |
2 方法 | 第44-45页 |
2.1 脂肽类的提取制备 | 第44-45页 |
2.2 葡聚糖凝胶Sephadex G25层析纯化 | 第45页 |
2.3 各组分的活性检测 | 第45页 |
2.4 MALDI-TOF-MS分析 | 第45页 |
3 结果 | 第45-52页 |
3.1 原位酸水解 | 第45-46页 |
3.2 各组分对橡胶树炭疽病菌RC178的活性检测 | 第46-48页 |
3.3 MALDI-TOF-MS分析 | 第48-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
第四章 脂肽类粗提物对橡胶树炭疽病的抑制及其抗性诱导作用 | 第54-64页 |
1 材料和方法 | 第54-57页 |
1.1 供试材料 | 第54页 |
1.2 培养基 | 第54-55页 |
1.3 发酵液制备 | 第55页 |
1.4 脂肽类抗菌物质的提取 | 第55页 |
1.5 脂肽类粗提物抑菌平板实验 | 第55页 |
1.6 脂肽类粗提物对孢子萌发的影响 | 第55页 |
1.7 脂肽类抗菌物质对橡胶树炭疽病菌离体和活体叶片的防治 | 第55-56页 |
1.7.1 离体叶片防治 | 第55-56页 |
1.7.2 活体叶片防治 | 第56页 |
1.8 脂肽类抗菌物质对橡胶植株相关酶活性的测定 | 第56-57页 |
1.8.1 试验处理 | 第56页 |
1.8.2 POD的提取和测定 | 第56页 |
1.8.3 PPO的提取和测定 | 第56页 |
1.8.4 PAL的提取和测定 | 第56-57页 |
2 结果和分析 | 第57-62页 |
2.1 脂肽类抗菌物质抑菌平板实验 | 第57-58页 |
2.2 脂肽类粗提物对孢子萌发的影响 | 第58-59页 |
2.2 脂肽类抗菌物质对橡胶树炭疽病离体和活体叶片的抑制效果 | 第59-61页 |
2.3 脂肽类抗菌物质诱导橡胶树抗性作用 | 第61-62页 |
3 结论和讨论 | 第62-64页 |
第五章 脂肽类粗提物对橡胶树白粉病盆栽防治效果 | 第64-68页 |
1 材料和方法 | 第64-65页 |
1.1 供试材料 | 第64页 |
1.2 供试药剂 | 第64页 |
1.3 供试病原菌 | 第64页 |
1.4 方法 | 第64-65页 |
1.4.1 橡胶树粉孢(Oidium heveae sternm)的单斑分离纯化 | 第64页 |
1.4.2 实验处理 | 第64-65页 |
1.5 数据处理 | 第65页 |
2 结果与分析 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
研究展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
附录 | 第74-78页 |
攻读硕士期间发表文章 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |