| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 内质网应激 | 第11-14页 |
| 1.1.1 内质网应激概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 内质网应激与细胞衰老 | 第12-13页 |
| 1.1.3 内质网应激与细胞凋亡 | 第13页 |
| 1.1.4 内质网应激与疾病 | 第13-14页 |
| 1.2 转录激活因子 6 (ATF6) | 第14-15页 |
| 1.2.1 ATF6结构 | 第14页 |
| 1.2.2 ATF6与内质网应激 | 第14-15页 |
| 1.3 IRE1-XBP1 | 第15-16页 |
| 1.3.1 X-盒结合蛋白 1 (XBP1)的分子特征 | 第15页 |
| 1.3.2 XBP1与内质网应激 | 第15-16页 |
| 1.4 鱼类ATF6和XBP1研究进展 | 第16-17页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第17-19页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第17-18页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第18-19页 |
| 第二章 草鱼ATF6对CiGRP78和CiGRP94的转录调控 | 第19-42页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第19-23页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.2.2 主要试剂与试剂盒 | 第20-21页 |
| 2.2.3 菌种、载体与细胞株 | 第21-22页 |
| 2.2.4 引物表 | 第22-23页 |
| 2.2.5 相关软件 | 第23页 |
| 2.2.6 实验材料 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.3.1 总mRNA提取 | 第23页 |
| 2.3.2 反转录合成cDNA第一条链 | 第23页 |
| 2.3.3 SMART cDNA的合成 | 第23-24页 |
| 2.3.4 草鱼ATF6基因的克隆 | 第24-26页 |
| 2.3.5 ATF6系统进化分析 | 第26页 |
| 2.3.6 细胞培养 | 第26页 |
| 2.3.7 RT-PCR检测草鱼ATF6基因的表达水平 | 第26-27页 |
| 2.3.8 草鱼ATF6原核表达与纯化 | 第27页 |
| 2.3.9 草鱼ATF6真核表达载体构建 | 第27-28页 |
| 2.3.10 草鱼ATF6与GRP78和GRP94启动子序列的亲和分析 | 第28页 |
| 2.3.11 CIK细胞转染实验 | 第28页 |
| 2.3.12 过表达 | 第28页 |
| 2.4 结果与分析 | 第28-40页 |
| 2.4.1 草鱼ATF6的克隆及其分析 | 第28-33页 |
| 2.4.2 ATF6系统进化分析 | 第33页 |
| 2.4.3 TM上调草鱼ATF6表达分析 | 第33-34页 |
| 2.4.4 草鱼ATF6与CiGRP78及CiGRP94启动子亲和分析 | 第34-37页 |
| 2.4.5 CiATF6对CiGRP78及CiGRP94基因的转录调控分析 | 第37-39页 |
| 2.4.6 过表达CiATF6 | 第39-40页 |
| 2.5 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 草鱼XBP1对CiGRP78和CiGRP94的转录调控 | 第42-64页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第42-43页 |
| 3.2.1 主要仪器设备 | 第42页 |
| 3.2.2 主要试剂与试剂盒 | 第42页 |
| 3.2.3 菌种、载体与细胞株 | 第42-43页 |
| 3.2.4 引物表 | 第43页 |
| 3.2.5 相关软件 | 第43页 |
| 3.2.6 实验材料 | 第43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-47页 |
| 3.3.1 草鱼XBP1S基因的克隆 | 第43-44页 |
| 3.3.2 RT-PCR检测草鱼XBP1S基因的表达水平 | 第44-45页 |
| 3.3.3 草鱼XBP1启动子克隆、报告基因载体构建及其活性分析 | 第45页 |
| 3.3.4 草鱼XBP1S原核表达及纯化 | 第45页 |
| 3.3.5 草鱼XBP1S真核表达载体构建 | 第45-46页 |
| 3.3.6 草鱼ATF6及XBP1S对XBP1启动子序列的亲和分析 | 第46页 |
| 3.3.7 EPC细胞转染实验 | 第46页 |
| 3.3.8 草鱼XBP1S对GRP78和GRP94启动子序列的亲和分析 | 第46页 |
| 3.3.9 草鱼XBP1S激活GRP78及GRP94启动子活性 | 第46页 |
| 3.3.10 过表达CiATF6或CiXBP1S | 第46-47页 |
| 3.4 结果与分析 | 第47-61页 |
| 3.4.1 草鱼XBP1S基因的克隆及其分析 | 第47-49页 |
| 3.4.2 XBP1S系统进化分析 | 第49-50页 |
| 3.4.3 TM上调草鱼XBP1S表达分析 | 第50-51页 |
| 3.4.4 草鱼XBP1启动子的克隆、报告载体的构建及其活性分析 | 第51-53页 |
| 3.4.5 草鱼ATF6、XBP1S与CiXBP1启动子的亲和性分析 | 第53-56页 |
| 3.4.6 草鱼XBP1的转录调控分析 | 第56-58页 |
| 3.4.7 草鱼XBP1S与CiGRP78和CiGRP94启动子的亲和性分析 | 第58-59页 |
| 3.4.8 CiXBP1S对CiGRP78及CiGRP94基因的转录调控分析 | 第59-60页 |
| 3.4.9 过表达CiATF6或CiXBP1S | 第60-61页 |
| 3.5 讨论 | 第61-64页 |
| 第四章 主要结论、创新点及研究展望 | 第64-66页 |
| 4.1 主要结论 | 第64页 |
| 4.1.1 CiATF6和CiXBP1S的克隆和表达分析 | 第64页 |
| 4.1.2 草鱼ATF6信号通路的机制初步分析 | 第64页 |
| 4.1.3 草鱼IRE1-XBP1信号通路的研究 | 第64页 |
| 4.2 创新点 | 第64-65页 |
| 4.3 研究展望 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-76页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第76页 |
