| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 Cdc42简介及研究现状 | 第11-16页 |
| 1.1.1 Cdc42与心脏功能 | 第13-14页 |
| 1.1.2 Cdc42与心肌肥大 | 第14-15页 |
| 1.1.3 Cdc42与缺血再灌注损伤 | 第15-16页 |
| 1.2 心肌细胞分离与培养技术 | 第16-18页 |
| 第2章 心肌特异性敲除Cdc42小鼠构建及鉴定 | 第18-25页 |
| 2.1 鉴定原理 | 第18-19页 |
| 2.2 小鼠基因型鉴定 | 第19-21页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.2.2 小鼠基因组DNA提取 | 第19-20页 |
| 2.2.3 PCR | 第20-21页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
| 2.3 Western blot检测小鼠Cdc42蛋白表达 | 第21-23页 |
| 2.3.1 凝胶配制 | 第21页 |
| 2.3.2 制备蛋白样品 | 第21-22页 |
| 2.3.3 凝胶电泳与转膜 | 第22页 |
| 2.3.4 封闭与抗体杂交 | 第22-23页 |
| 2.3.5 ECL底物显色与曝光 | 第23页 |
| 2.4 荧光定量PCR检测Cdc42 mRNA表达 | 第23页 |
| 2.5 统计学分析 | 第23-24页 |
| 2.6 鉴定结果 | 第24-25页 |
| 第3章 心脏特异性敲除Cdc42对心肌缺血再灌注损伤的保护作用 | 第25-35页 |
| 3.1 心肌缺血再灌注模型的建立 | 第25-29页 |
| 3.1.1 研究目的 | 第25-26页 |
| 3.1.2 材料与方法 | 第26-29页 |
| 3.2 缺血再灌注模型的检测指标 | 第29-31页 |
| 3.2.1 灌流全过程中的流量变化 | 第29-30页 |
| 3.2.2 灌流不同时间段离体心脏释放LDH的动态变化 | 第30页 |
| 3.2.3 缺血再灌注损伤后心肌GSK-3β 的表达变化 | 第30-31页 |
| 3.3 心肌特异性敲除Cdc42对缺血再灌注的影响 | 第31-35页 |
| 3.3.1 心肌特异性敲除Cdc42明显增加心脏灌流量并在I/R模型时保持灌流量 | 第31-32页 |
| 3.3.2 心脏特异性敲除Cdc42明显减少I/R时心脏LDH释放 | 第32-34页 |
| 3.3.3 心肌特异性敲除Cdc42在I/R损伤时GSK-3β 活化降低 | 第34-35页 |
| 第4章 药物刺激Cdc42缺失的心肌细胞探索其信号传导 | 第35-47页 |
| 4.1 实验原理和目的 | 第35页 |
| 4.2 材料与方法 | 第35-42页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第35页 |
| 4.2.2 实验内容 | 第35-42页 |
| 4.3 加药刺激后Cdc42心肌细胞中的信号传导改变情况 | 第42-47页 |
| 4.3.1 Langendorff法分离得到成年小鼠心肌细胞 | 第42-44页 |
| 4.3.2 敲除Cdc42对成年心肌细胞心肌肥大的影响 | 第44-47页 |
| 第5章 结论与讨论 | 第47-52页 |
| 5.1 结论 | 第47-49页 |
| 5.1.1 成功构建心肌特异性敲除Cdc42小鼠模型 | 第47页 |
| 5.1.2 心肌特异性敲除Cdc42对心脏缺血再灌注损伤具有保护作用 | 第47-48页 |
| 5.1.3 心肌细胞Cdc42缺失对药物刺激应答的影响 | 第48页 |
| 5.1.4 Cdc42对心脏保护作用机制分析 | 第48-49页 |
| 5.2 讨论 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 附录 | 第57-60页 |
| 附表1 仪器信息表 | 第57-58页 |
| 附表2 试剂信息表 | 第58-59页 |
| 附表3 PCR引物信息表 | 第59页 |
| 附表4 Q-PCR引物信息表 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第60页 |
