| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-30页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 精子发生 | 第12-17页 |
| 1.2.1 精原干细胞的来源 | 第12-13页 |
| 1.2.2 精原干细胞的增殖和分化 | 第13-15页 |
| 1.2.3 减数分裂期 | 第15-16页 |
| 1.2.4 精子形成期 | 第16-17页 |
| 1.3 可变剪接的研究进展 | 第17-25页 |
| 1.3.1 mRNA剪接的普遍作用机制 | 第17-19页 |
| 1.3.2 可变剪接的主要形式和调控方式 | 第19-22页 |
| 1.3.3 可变剪接的功能 | 第22-23页 |
| 1.3.4 可变剪接在精子发生中的功能和调控 | 第23-25页 |
| 1.4 BCAS2的研究进展 | 第25-28页 |
| 1.4.1 BCAS2的发现 | 第25-26页 |
| 1.4.2 CDC5L/Prp19复合体 | 第26-27页 |
| 1.4.3 BCAS2在DNA损伤修复中的功能 | 第27-28页 |
| 1.4.4 BCAS2在剪接中的功能 | 第28页 |
| 1.5 本论文的研究目的和意义 | 第28-30页 |
| 第2章 材料与方法 | 第30-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-36页 |
| 2.1.1 实验仪器和设备 | 第30-31页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.3 实验抗体 | 第32-33页 |
| 2.1.4 实验引物 | 第33-36页 |
| 2.2 主要试剂的配置 | 第36-42页 |
| 2.2.1 免疫荧光或免疫组化相关试剂 | 第36-38页 |
| 2.2.2 蛋白免疫印迹相关试剂 | 第38-41页 |
| 2.2.3 分子实验相关试剂 | 第41-42页 |
| 2.3 实验方法 | 第42-54页 |
| 2.3.1 动物饲养和繁殖 | 第42页 |
| 2.3.2 小鼠鼠尾基因组的提取 | 第42-43页 |
| 2.3.3 小鼠基因型的鉴定 | 第43页 |
| 2.3.4 小鼠生育力检测实验 | 第43页 |
| 2.3.5 组织固定石蜡包埋 | 第43-44页 |
| 2.3.6 石蜡切片 | 第44页 |
| 2.3.7 H&E染色 | 第44页 |
| 2.3.8 免疫荧光染色 | 第44-45页 |
| 2.3.9 免疫组织化学染色 | 第45-46页 |
| 2.3.10 蛋白印迹实验 | 第46-48页 |
| 2.3.11 RNA提取实验 | 第48-49页 |
| 2.3.12 RNA的消化 | 第49页 |
| 2.3.13 RNA的反转录实验 | 第49-50页 |
| 2.3.14 实时定量PCR( Real-time RT-PCR)实验 | 第50页 |
| 2.3.15 生精细胞和体细胞的富集实验 | 第50-51页 |
| 2.3.16 RNeasy Micro Kit提取微量样品总RNA实验 | 第51页 |
| 2.3.17 流式细胞分析 | 第51-52页 |
| 2.3.18 Pre-mRNA和成熟mRNA引物的设计 | 第52页 |
| 2.3.19 RNA测序 | 第52-53页 |
| 2.3.20 生物信息分析 | 第53页 |
| 2.3.21 统计学分析 | 第53-54页 |
| 第3章 实验结果 | 第54-88页 |
| 3.1 BCAS2在精子发生中的生理功能 | 第54-74页 |
| 3.1.1 BCAS2在精原干细胞中相对高表达 | 第54-58页 |
| 3.1.2 建立精原干细胞中特异敲除BCAS2的小鼠模型 | 第58-60页 |
| 3.1.3 BCAS2缺失导致雄性不育 | 第60页 |
| 3.1.4 BCAS2缺失导致精子发生明显异常 | 第60-62页 |
| 3.1.5 减数分裂前期的关键事件明显缺失 | 第62-66页 |
| 3.1.6 精原干细胞的发育相对正常 | 第66-71页 |
| 3.1.7 BCAS2对于减数分裂的正常启动是必需的 | 第71-74页 |
| 3.2 BCAS2在精子发生中的作用机制 | 第74-88页 |
| 3.2.1 BCAS2的缺失并没有造成大规模的转录组的变化 | 第75-77页 |
| 3.2.2 BCAS2通过pre-mRNA剪接调控tubulin相关基因的表达 | 第77-79页 |
| 3.2.3 BCAS2参与调控精子发生中多种剪接形式 | 第79-80页 |
| 3.2.4 BCAS2调控精子发生中功能性基因的可变剪接 | 第80-83页 |
| 3.2.5 BCAS2缺失导致DAZL蛋白表达的下降 | 第83-84页 |
| 3.2.6 BCAS2调控Dazl可变剪接的初步探讨 | 第84-88页 |
| 第4章 结论 | 第88-94页 |
| 4.1 结论与创新性 | 第88-89页 |
| 4.2 讨论与展望 | 第89-94页 |
| 参考文献 | 第94-110页 |
| 附录A BCAS2敲除后显著性变化的基因 | 第110-112页 |
| 附录B BCAS2敲除后显著性变化的可变剪接事件 | 第112-120页 |
| 致谢 | 第120-124页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第124页 |
