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母源BTG4在小鼠早期胚胎发育中的功能和机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第12-37页
    1.1 哺乳动物母源向合子转变过程第12-16页
        1.1.1 卵子发生第12-13页
        1.1.2 受精第13页
        1.1.3 母源因子调控MZT过程中发生的重要事件第13-16页
    1.2 mRNA降解调控机制第16-22页
        1.2.1 去腺苷酸化依赖的mRNA降解第16-19页
        1.2.2 去腺苷酸化非依赖的去帽第19页
        1.2.3 核酸内切酶介导的mRNA降解第19-20页
        1.2.4 调节mRNA降解的其它途径第20-22页
        1.2.5 模式生物中母源mRNA降解第22页
    1.3 CCR4-NOT复合体的研究概况第22-29页
        1.3.1 CCR4-NOT复合体的催化亚基和结构第22-24页
        1.3.2 招募CCR4-NOT复合体的相关因子第24-25页
        1.3.3 小RNA介导的CCR4-NOT复合体在基因沉默中的作用第25-28页
        1.3.4 CCR4-NOT复合体的新功能-参与调节翻译阻滞引起的蛋白质量控制系统第28-29页
    1.4 哺乳动物BTG/TOB抗增殖蛋白家族第29-35页
        1.4.1 BTG结构域在转录调节中的功能第30-32页
        1.4.2 BTG结构域在mRNA去腺苷酸化和更新中的功能第32-33页
        1.4.3 C末端结构域的功能第33-34页
        1.4.4 BTG/TOB家族在转录和mRNA降解中的作用第34-35页
    1.5 本论文研究目的和意义第35-37页
第二章 实验材料和方法第37-61页
    2.1 实验动物第37页
    2.2 分析基因表达谱数据第37页
    2.3 制备Btg4敲除鼠第37-39页
    2.4 小鼠基因型鉴定第39-41页
    2.5 生殖能力检测第41页
    2.6 苏木精-伊红染色第41-42页
    2.7 分离小鼠卵母细胞和不同时期的早期胚胎第42页
    2.8 从卵母细胞和早期胚胎中提取mRNA和Total RNA第42-44页
    2.9 小鼠组织总RNA提取第44-46页
    2.10 反转录第46页
    2.11 实时荧光定量PCR第46-47页
    2.12 体外转录第47-48页
    2.13 显微注射第48-49页
    2.14 免疫印迹第49-50页
    2.15 卵母细胞/早期胚胎免疫荧光第50-51页
    2.16 免疫共沉淀第51-52页
    2.17 Btg4抗体制作第52-54页
    2.18 转录组测序第54-55页
    2.19 Poly A尾巴长度检测第55-56页
    2.20 银染第56-57页
    2.21 细胞培养和转染第57-58页
    2.22 构建载体第58-59页
    2.23 制备Top10感受态细胞第59-60页
    2.24 统计学分析第60-61页
第三章 实验结果第61-84页
    3.1 BTG4蛋白的特异性表达模式第61-65页
    3.2 Btg4 mRNA翻译受其3'-UTR中的CPE和HEX元件调控第65-66页
    3.3 制备BTG4敲除鼠第66-67页
    3.4 BTG4敲除导致雌鼠不育第67-70页
    3.5 BTG4敲除阻止母源mRNA降解第70-74页
    3.6 Btg4调节母源mRNA的去腺苷酸化第74页
    3.7 BTG4通过BTG结构域与CNOT7和PABPC1L相互作用第74-79页
    3.8 全长的BTG4能够挽救BTG4敲除产生的表型第79-81页
    3.9 结论第81页
    3.10 讨论与展望第81-84页
参考文献第84-106页
附录第106-119页
致谢第119-121页
在学期间发表的学术论文与取得的其他研究成果第121页

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