摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-37页 |
1.1 哺乳动物母源向合子转变过程 | 第12-16页 |
1.1.1 卵子发生 | 第12-13页 |
1.1.2 受精 | 第13页 |
1.1.3 母源因子调控MZT过程中发生的重要事件 | 第13-16页 |
1.2 mRNA降解调控机制 | 第16-22页 |
1.2.1 去腺苷酸化依赖的mRNA降解 | 第16-19页 |
1.2.2 去腺苷酸化非依赖的去帽 | 第19页 |
1.2.3 核酸内切酶介导的mRNA降解 | 第19-20页 |
1.2.4 调节mRNA降解的其它途径 | 第20-22页 |
1.2.5 模式生物中母源mRNA降解 | 第22页 |
1.3 CCR4-NOT复合体的研究概况 | 第22-29页 |
1.3.1 CCR4-NOT复合体的催化亚基和结构 | 第22-24页 |
1.3.2 招募CCR4-NOT复合体的相关因子 | 第24-25页 |
1.3.3 小RNA介导的CCR4-NOT复合体在基因沉默中的作用 | 第25-28页 |
1.3.4 CCR4-NOT复合体的新功能-参与调节翻译阻滞引起的蛋白质量控制系统 | 第28-29页 |
1.4 哺乳动物BTG/TOB抗增殖蛋白家族 | 第29-35页 |
1.4.1 BTG结构域在转录调节中的功能 | 第30-32页 |
1.4.2 BTG结构域在mRNA去腺苷酸化和更新中的功能 | 第32-33页 |
1.4.3 C末端结构域的功能 | 第33-34页 |
1.4.4 BTG/TOB家族在转录和mRNA降解中的作用 | 第34-35页 |
1.5 本论文研究目的和意义 | 第35-37页 |
第二章 实验材料和方法 | 第37-61页 |
2.1 实验动物 | 第37页 |
2.2 分析基因表达谱数据 | 第37页 |
2.3 制备Btg4敲除鼠 | 第37-39页 |
2.4 小鼠基因型鉴定 | 第39-41页 |
2.5 生殖能力检测 | 第41页 |
2.6 苏木精-伊红染色 | 第41-42页 |
2.7 分离小鼠卵母细胞和不同时期的早期胚胎 | 第42页 |
2.8 从卵母细胞和早期胚胎中提取mRNA和Total RNA | 第42-44页 |
2.9 小鼠组织总RNA提取 | 第44-46页 |
2.10 反转录 | 第46页 |
2.11 实时荧光定量PCR | 第46-47页 |
2.12 体外转录 | 第47-48页 |
2.13 显微注射 | 第48-49页 |
2.14 免疫印迹 | 第49-50页 |
2.15 卵母细胞/早期胚胎免疫荧光 | 第50-51页 |
2.16 免疫共沉淀 | 第51-52页 |
2.17 Btg4抗体制作 | 第52-54页 |
2.18 转录组测序 | 第54-55页 |
2.19 Poly A尾巴长度检测 | 第55-56页 |
2.20 银染 | 第56-57页 |
2.21 细胞培养和转染 | 第57-58页 |
2.22 构建载体 | 第58-59页 |
2.23 制备Top10感受态细胞 | 第59-60页 |
2.24 统计学分析 | 第60-61页 |
第三章 实验结果 | 第61-84页 |
3.1 BTG4蛋白的特异性表达模式 | 第61-65页 |
3.2 Btg4 mRNA翻译受其3'-UTR中的CPE和HEX元件调控 | 第65-66页 |
3.3 制备BTG4敲除鼠 | 第66-67页 |
3.4 BTG4敲除导致雌鼠不育 | 第67-70页 |
3.5 BTG4敲除阻止母源mRNA降解 | 第70-74页 |
3.6 Btg4调节母源mRNA的去腺苷酸化 | 第74页 |
3.7 BTG4通过BTG结构域与CNOT7和PABPC1L相互作用 | 第74-79页 |
3.8 全长的BTG4能够挽救BTG4敲除产生的表型 | 第79-81页 |
3.9 结论 | 第81页 |
3.10 讨论与展望 | 第81-84页 |
参考文献 | 第84-106页 |
附录 | 第106-119页 |
致谢 | 第119-121页 |
在学期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第121页 |