摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
文中缩写词 | 第10-15页 |
1 前言 | 第15-26页 |
1.1 杆状病毒 | 第15-18页 |
1.1.1 杆状病毒的形态 | 第15-16页 |
1.1.2 杆状病毒的分类 | 第16页 |
1.1.3 杆状病毒的生命周期 | 第16-17页 |
1.1.4 杆状病毒基因的表达 | 第17-18页 |
1.2 杆状病毒的核心基因 | 第18页 |
1.3 杆状病毒结构蛋白 | 第18-19页 |
1.4 杆状病毒糖蛋白 | 第19-20页 |
1.5 蛋白质相互作用研究 | 第20-23页 |
1.5.1 酵母双杂交技术 | 第21-22页 |
1.5.2 GST-Pull down技术 | 第22页 |
1.5.3 免疫共沉淀 | 第22-23页 |
1.5.4 双分子荧光互补技术(BiFC) | 第23页 |
1.6 杆状病毒BAC-to-BAC系统 | 第23-24页 |
1.7 本研究的意义 | 第24-26页 |
2 材料与方法 | 第26-52页 |
2.1 实验材料 | 第26-36页 |
2.1.1 大肠杆菌菌株及酵母菌株 | 第26页 |
2.1.2 病毒株及细胞系 | 第26页 |
2.1.3 载体质粒 | 第26-27页 |
2.1.4 抗生素 | 第27页 |
2.1.5 培养基 | 第27-29页 |
2.1.6 常用溶液配制 | 第29-30页 |
2.1.7 药品及相关试剂 | 第30-31页 |
2.1.8 主要仪器设备 | 第31页 |
2.1.9 实验中用到的引物 | 第31-33页 |
2.1.10 实验中构建的重组质粒和病毒 | 第33-36页 |
2.2 实验方法 | 第36-52页 |
2.2.1 酵母双杂交实验 | 第36-41页 |
2.2.2 基因克隆 | 第41-48页 |
2.2.3 AcMNPV bacmid突变体的构建 | 第48-49页 |
2.2.4 病毒对Sf9细胞的转染和感染 | 第49-50页 |
2.2.5 GST-pull down | 第50-51页 |
2.2.6 Western blot检测目的蛋白 | 第51-52页 |
3 实验结果 | 第52-70页 |
3.1 AcMNPV GP41序列分析 | 第52-54页 |
3.1.1 GP41蛋白同源性比对 | 第52-54页 |
3.1.2 GP41蛋白疏水性分析 | 第54页 |
3.2 酵母双杂交筛选与GP41相互作用的Sf9细胞蛋白因子 | 第54-55页 |
3.3 GP41与9’和12在受感染细胞内的定位 | 第55-60页 |
3.4 GP41与9’和12的GST-Pull down分析 | 第60-63页 |
3.5 GP41与9’和12的相互作用位点的识别 | 第63-65页 |
3.5.1 GP41与9’之间相互作用位点的识别 | 第64-65页 |
3.5.2 GP41与12之间相互作用位点的识别 | 第65页 |
3.6 gp41基因缺失和回复突变体AcMNPV bacmids的构建 | 第65-67页 |
3.7 gp41基因缺失对病毒增殖的影响 | 第67-70页 |
4 讨论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-76页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |