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苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒GP41与两种宿主蛋白的相互作用

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
文中缩写词第10-15页
1 前言第15-26页
    1.1 杆状病毒第15-18页
        1.1.1 杆状病毒的形态第15-16页
        1.1.2 杆状病毒的分类第16页
        1.1.3 杆状病毒的生命周期第16-17页
        1.1.4 杆状病毒基因的表达第17-18页
    1.2 杆状病毒的核心基因第18页
    1.3 杆状病毒结构蛋白第18-19页
    1.4 杆状病毒糖蛋白第19-20页
    1.5 蛋白质相互作用研究第20-23页
        1.5.1 酵母双杂交技术第21-22页
        1.5.2 GST-Pull down技术第22页
        1.5.3 免疫共沉淀第22-23页
        1.5.4 双分子荧光互补技术(BiFC)第23页
    1.6 杆状病毒BAC-to-BAC系统第23-24页
    1.7 本研究的意义第24-26页
2 材料与方法第26-52页
    2.1 实验材料第26-36页
        2.1.1 大肠杆菌菌株及酵母菌株第26页
        2.1.2 病毒株及细胞系第26页
        2.1.3 载体质粒第26-27页
        2.1.4 抗生素第27页
        2.1.5 培养基第27-29页
        2.1.6 常用溶液配制第29-30页
        2.1.7 药品及相关试剂第30-31页
        2.1.8 主要仪器设备第31页
        2.1.9 实验中用到的引物第31-33页
        2.1.10 实验中构建的重组质粒和病毒第33-36页
    2.2 实验方法第36-52页
        2.2.1 酵母双杂交实验第36-41页
        2.2.2 基因克隆第41-48页
        2.2.3 AcMNPV bacmid突变体的构建第48-49页
        2.2.4 病毒对Sf9细胞的转染和感染第49-50页
        2.2.5 GST-pull down第50-51页
        2.2.6 Western blot检测目的蛋白第51-52页
3 实验结果第52-70页
    3.1 AcMNPV GP41序列分析第52-54页
        3.1.1 GP41蛋白同源性比对第52-54页
        3.1.2 GP41蛋白疏水性分析第54页
    3.2 酵母双杂交筛选与GP41相互作用的Sf9细胞蛋白因子第54-55页
    3.3 GP41与9’和12在受感染细胞内的定位第55-60页
    3.4 GP41与9’和12的GST-Pull down分析第60-63页
    3.5 GP41与9’和12的相互作用位点的识别第63-65页
        3.5.1 GP41与9’之间相互作用位点的识别第64-65页
        3.5.2 GP41与12之间相互作用位点的识别第65页
    3.6 gp41基因缺失和回复突变体AcMNPV bacmids的构建第65-67页
    3.7 gp41基因缺失对病毒增殖的影响第67-70页
4 讨论第70-72页
参考文献第72-76页
攻读学位期间发表的学术论文第76-77页
致谢第77页

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