| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-34页 |
| 1.1 氨基酸及其衍生物简介 | 第11-12页 |
| 1.2 非天然氨基酸及其衍生物的研究意义 | 第12页 |
| 1.3 苯甘氨酸及其衍生物的应用 | 第12-14页 |
| 1.4 苯甘氨酸的制备方法 | 第14-18页 |
| 1.4.1 苯甘氨酸的化学合成工艺 | 第14-16页 |
| 1.4.2 化学酶法合成手性苯甘氨酸 | 第16-17页 |
| 1.4.3 生物转化法不对称合成苯甘氨酸 | 第17-18页 |
| 1.5 多级酶联反应 | 第18-32页 |
| 1.5.1 扁桃酸脱氢酶(D-MDH)简介 | 第21-26页 |
| 1.5.2 氨基酸脱氢酶简介 | 第26-28页 |
| 1.5.3 扁桃酸消旋酶简介 | 第28-32页 |
| 1.6 本课题研究的目的及意义 | 第32-33页 |
| 1.7 本论文的主要研究内容 | 第33-34页 |
| 第2章 扁桃酸脱氢酶的克隆表达 | 第34-42页 |
| 2.1 引言 | 第34页 |
| 2.2 材料与方法 | 第34-39页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第34页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第34-35页 |
| 2.2.3 培养基 | 第35页 |
| 2.2.4 菌种及质粒 | 第35-36页 |
| 2.2.5 分析方法 | 第36页 |
| 2.2.6 实验方法 | 第36-39页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第39-41页 |
| 2.3.1 扁桃酸脱氢酶的数据库挖掘 | 第39页 |
| 2.3.2 扁桃酸脱氢酶的克隆表达 | 第39-40页 |
| 2.3.3 扁桃酸脱氢酶的功能筛选 | 第40-41页 |
| 2.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第3章 扁桃酸脱氢酶LbDMDH的纯化及酶学性质研究 | 第42-49页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 材料与方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第42页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第42页 |
| 3.2.3 分析方法 | 第42-43页 |
| 3.2.4 重组大肠杆菌的摇瓶培养与产酶 | 第43页 |
| 3.2.5 扁桃酸脱氢酶LbDMDH的纯化 | 第43页 |
| 3.2.6 pH对扁桃酸脱氢酶LbDMDH的影响 | 第43页 |
| 3.2.7 温度对扁桃酸脱氢酶LbDMDH的影响 | 第43页 |
| 3.2.8 金属离子及EDTA对扁桃酸脱氢酶LbDMDH的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.9 动力学参数测定 | 第44页 |
| 3.2.10 扁桃酸脱氢酶LbDMDH的底物谱研究 | 第44页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第44-48页 |
| 3.3.1 扁桃酸脱氢酶LbDMDH的纯化 | 第44页 |
| 3.3.2 pH对扁桃酸脱氢酶LbDMDH的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.3 温度对扁桃酸脱氢酶LbDMDH的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.4 金属离子及EDTA对扁桃酸脱氢酶LbDMDH的影响 | 第46页 |
| 3.3.5 动力学参数测定 | 第46-47页 |
| 3.3.6 LbDMDH底物谱研究 | 第47-48页 |
| 3.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第4章 LbDMDH用于“一锅煮”法合成L-苯甘氨酸的研究 | 第49-57页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 材料与方法 | 第49-51页 |
| 4.2.1 主要试剂和仪器 | 第49页 |
| 4.2.2 分析方法 | 第49页 |
| 4.2.3 细胞的培养与粗酶粉的制备 | 第49-50页 |
| 4.2.4 LbDMDH用于“一锅煮”法合成L-苯甘氨酸 | 第50-51页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第51-56页 |
| 4.3.1 发酵罐实验结果 | 第51页 |
| 4.3.2 10mL催化反应 | 第51-55页 |
| 4.3.3 100mL/1 L催化反应 | 第55-56页 |
| 4.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 结论和展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65-69页 |
| 硕士在读期间撰写的论文和专利 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
