| 前 言 | 第8-21页 |
| 第一篇 柴胡逆转肝细胞癌多药耐药与相关机制的研究 | 第21-67页 |
| 第一章 柴胡逆转肝细胞癌多药耐药的研究 | 第21-35页 |
| 材 料 与 方 法 | 第22-28页 |
| 一、 主要材料 | 第22-24页 |
| 二、 主要仪器 | 第24-25页 |
| 三、 实验方法 | 第25-28页 |
| 实 验 结 果 | 第28-33页 |
| 一、 BCDC对Bel-7402细胞的 IC50测定 | 第28页 |
| 二、 BCDC逆转Bel-7402耐药的浓度依赖实验 | 第28-29页 |
| 三、 BCDC逆转Bel-7402耐药的作用 | 第29-30页 |
| 四、 BCDC逆转Bel-7402耐药性的集落形成 | 第30-33页 |
| 讨 论 | 第33-34页 |
| 小 结 | 第34-35页 |
| 第二章 柴胡逆转肝细胞癌多药耐药机制的研究 | 第35-67页 |
| 材 料 与 方 法 | 第35-54页 |
| 一、 主要材料 | 第35-47页 |
| 二、 主要仪器 | 第47页 |
| 三、 实验方法 | 第47-54页 |
| 实 验 结 果 | 第54-64页 |
| 一、 Bel-7402 细胞内VCR浓度的测定结果 | 第54-57页 |
| 二、 BCDC作用Bel-7402细胞的形态和凋亡的改变 | 第57-60页 |
| 三、 流式细胞术检查细胞周期和凋亡的改变 | 第60页 |
| 四、 双波长荧光光度法测定细胞内游离钙浓度 | 第60-61页 |
| 五、 免疫组织化学法检测Pgp表达 | 第61-62页 |
| 六、 柴胡对多药耐药相关基因表达影响 | 第62-64页 |
| 讨 论 | 第64-66页 |
| 小 结 | 第66-67页 |
| 第二篇 P53基因逆转肝细胞癌多药耐药与相关机制的研究 | 第67-107页 |
| 第一章 P53基因真核表达载体的构建 | 第67-89页 |
| 材 料 与 方 法 | 第67-80页 |
| 一、 主要材料 | 第67-72页 |
| 二、 主要仪器设备 | 第72-73页 |
| 三、 实验方法 | 第73-80页 |
| 实 验 结 果 | 第80-87页 |
| 一、 质粒电泳结果 | 第80页 |
| 二、 P53蛋白编码序列的扩增 | 第80-81页 |
| 三、 P53蛋白编码序列的PCR回收产物鉴定 | 第81页 |
| 四、 P53蛋白编码序列重组体的鉴定 | 第81-82页 |
| 五、 PCR3.1-P53真核表达质粒的构建 | 第82-83页 |
| 六、 P53蛋白编码序列真核表达质粒的PCR鉴定和双酶切鉴定 | 第83-84页 |
| 七、 pCR3.1-P53重组质粒的核苷酸序列测定结果 | 第84-87页 |
| 讨 论 | 第87-88页 |
| 一、 Taq酶 | 第87页 |
| 二、 克隆载体 | 第87页 |
| 三、 真核表达载体 | 第87-88页 |
| 四、 重组质粒的筛选 | 第88页 |
| 五、 P53蛋白编码序列的克隆 | 第88页 |
| 小 结 | 第88-89页 |
| 第二章 P53基因逆转肝细胞癌多药耐药机制的研究 | 第89-107页 |
| 材 料 与 方 法 | 第89-95页 |
| 一、 主要材料 | 第89-91页 |
| 二、 主要仪器设备 | 第91-92页 |
| 三、 实验方法 | 第92-95页 |
| 结 果 | 第95-104页 |
| 一、 G418筛选浓度的确定 | 第95页 |
| 二、 基因的转染及转染克隆的筛选 | 第95-96页 |
| 三、 细胞生长曲线 | 第96-97页 |
| 四、 细胞对长春新硷的药物敏感性比较 | 第97-98页 |
| 五、 免疫组化法检测Pgp表达 | 第98-100页 |
| 六、 P53转染Bel-7402细胞的形态和凋亡的改变 | 第100-101页 |
| 七、 流式细胞术检测凋亡细胞 | 第101-103页 |
| 八、 P53对多药耐药相关基因表达的影响 | 第103-104页 |
| 讨 论 | 第104-106页 |
| 小 结 | 第106-107页 |
| 总 结 | 第107-108页 |
| 参 考 文 献 | 第108-117页 |
| 中文摘要 | 第117-122页 |
| 英文摘要 | 第122页 |
| 发表学术论文及其它成果 | 第129-131页 |
| 吉林大学博士学位论文原创性声明 | 第131-133页 |
| 致 谢 | 第133页 |
