| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-31页 |
| 1.1 化学诱变在玉米育种中的应用 | 第14-19页 |
| 1.1.1 EMS作用机制和特点 | 第14-16页 |
| 1.1.2 EMS诱变处理技术 | 第16-17页 |
| 1.1.3 EMS诱变在玉米育种中的研究与应用 | 第17-19页 |
| 1.2 蛋白质组学的研究背景 | 第19-25页 |
| 1.2.1 蛋白质组学研究的内容与分类 | 第19-20页 |
| 1.2.2 蛋白质组学研究的相关技术手段 | 第20-24页 |
| 1.2.3 蛋白质组学在玉米研究中的应用 | 第24-25页 |
| 1.2.4 玉米蛋白质组学研究的展望 | 第25页 |
| 1.3 苹果酸脱氢酶 | 第25-29页 |
| 1.3.1 苹果酸脱氢酶的发现 | 第25-26页 |
| 1.3.2 苹果酸脱氢酶的生化性质 | 第26-27页 |
| 1.3.3 苹果酸脱氢酶的结构及功能 | 第27页 |
| 1.3.4 苹果酸脱氢酶所参与的代谢途径 | 第27-28页 |
| 1.3.5 苹果酸脱氢酶的应用 | 第28-29页 |
| 1.4 本研究的内容及其目的意义 | 第29-31页 |
| 2 EMS诱变处理玉米花粉创造玉米新种质 | 第31-42页 |
| 2.1 供试材料及方法 | 第31-33页 |
| 2.1.1 主要供试材料与化学试剂 | 第31页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第31-33页 |
| 2.2 结果分析 | 第33-40页 |
| 2.2.1 M1苗期变异 | 第33-34页 |
| 2.2.2 M1诱变材料成株期变异 | 第34-36页 |
| 2.2.3 M1突变体果穗性状调查 | 第36-38页 |
| 2.2.4 不同浓度EMS诱变处理后玉米M1畸变情况 | 第38页 |
| 2.2.5 M2植株的主要变异类型 | 第38-39页 |
| 2.2.6 M3诱变材料的田间鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3 讨论 | 第40-41页 |
| 2.3.1 不同处理浓度对花粉诱变的影响 | 第40页 |
| 2.3.2 EMS诱变处理后代的变异、选择 | 第40-41页 |
| 2.3.3 诱变后粮词兼用型玉米材料的选育 | 第41页 |
| 2.4 小结 | 第41-42页 |
| 3 玉米叶片蛋白质组分析的双向电泳技术 | 第42-53页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-46页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.1.2 幼苗叶片总蛋白的提取方法 | 第43-44页 |
| 3.1.3 蛋白质的溶解 | 第44页 |
| 3.1.4 蛋白质样品浓度测定 | 第44页 |
| 3.1.5 等电聚焦电泳条件的优化 | 第44-45页 |
| 3.1.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度优化 | 第45-46页 |
| 3.1.7 考马斯亮蓝G-250的凝胶染色及电泳图像的扫描与分析 | 第46页 |
| 3.2 结果与分析 | 第46-50页 |
| 3.2.1 三种不同方法提取蛋白质样品的双向电泳效果分析 | 第46-47页 |
| 3.2.2 不同聚焦时间对双向电泳图谱的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.3 不同丙烯酰胺浓度对蛋白质分辨率的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.4 不同上样量对等电聚焦过程中蛋白质分辨率的影响 | 第49-50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-52页 |
| 3.3.1 幼苗叶片总蛋白质的提取 | 第50-51页 |
| 3.3.2 不同聚焦条件对玉米幼苗双向电泳图谱的影响 | 第51页 |
| 3.3.3 不同丙烯酰胺浓度与上样量对蛋白质分辨率的影响 | 第51-52页 |
| 3.4 小结 | 第52-53页 |
| 4 玉米诱变与原自交系株高变化的蛋白质组学分析 | 第53-62页 |
| 4.1 材料与方法 | 第53-56页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第53-54页 |
| 4.1.2 试验试剂与酶 | 第54页 |
| 4.1.3 玉米叶片总蛋白提取和浓度测定 | 第54-55页 |
| 4.1.4 蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳及考马斯染色 | 第55-56页 |
| 4.1.5 玉米双向电泳凝胶图谱分析 | 第56页 |
| 4.1.6 差异蛋白质点的质谱鉴定及数据库中匹配搜索 | 第56页 |
| 4.2 试验结果与分析 | 第56-59页 |
| 4.2.1 玉米幼苗叶片双向电泳图像分析 | 第56-57页 |
| 4.2.2 玉米诱变系与原自交系蛋白质差异表达谱分析 | 第57页 |
| 4.2.3 玉米诱变系与原自交系差异表达蛋白点的质谱鉴定 | 第57-59页 |
| 4.3 讨论 | 第59-61页 |
| 4.3.1 玉米不同材料苗期叶片差异蛋白质表达模式与功能分类 | 第59页 |
| 4.3.2 玉米诱变与原材料候选蛋白质点的功能分析 | 第59-60页 |
| 4.3.3 玉米诱变体与原自交系差异候选基因的分析 | 第60-61页 |
| 4.4 小结 | 第61-62页 |
| 5 玉米苹果酸脱氢酶(ZmMDH6)基因的克隆与功能分析 | 第62-81页 |
| 5.1 供试材料与方法 | 第62-72页 |
| 5.1.1 供试材料 | 第62页 |
| 5.1.2 供试植物材料及其处理 | 第62页 |
| 5.1.3 宿主菌株与载体 | 第62-63页 |
| 5.1.4 试剂及酶 | 第63页 |
| 5.1.5 培养基与相关试剂的配制方法 | 第63页 |
| 5.1.6 实验中用到的引物 | 第63-64页 |
| 5.1.7 总RNA的提取 | 第64页 |
| 5.1.8 cDNA的合成 | 第64页 |
| 5.1.9 玉米自交系AMD16半定量RT-PCR分析 | 第64-65页 |
| 5.1.10 基因克隆与测序 | 第65-68页 |
| 5.1.11 植物超表达载体构建 | 第68-69页 |
| 5.1.12 拟南芥的转化 | 第69-71页 |
| 5.1.13 拟南芥转基因植株的筛选与分子检测 | 第71-72页 |
| 5.2 结果与分析 | 第72-79页 |
| 5.2.1 玉米自交系总RNA的提取与检测以及cDNA的合成 | 第72-73页 |
| 5.2.2 玉米半定量RT-PCR检测 | 第73-74页 |
| 5.2.3 ZmMDH6的基因克隆及功能分析 | 第74页 |
| 5.2.4 苹果酸脱氢酶(MDH)基因推导的氨基酸序列同源性及系统进化分析 | 第74-77页 |
| 5.2.5 ZmMDH6基因的植物表达载体构建 | 第77-78页 |
| 5.2.6 拟南芥转化及阳性植株的检测 | 第78页 |
| 5.2.7 拟南芥转基因植株的鉴定 | 第78-79页 |
| 5.3 讨论 | 第79-80页 |
| 5.3.1 载体构建与农杆菌转化 | 第79-80页 |
| 5.3.2 ZmMDH6基因的抗性作用 | 第80页 |
| 5.4 小结 | 第80-81页 |
| 6 结论 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-95页 |
| 作者简介 | 第95页 |
