| 英文缩略词表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 参考文献 | 第11-13页 |
| 第一部分 优化培养条件和裂解方法提高hRANKL在大肠杆菌内的产量 | 第13-34页 |
| 背景资料 | 第13-15页 |
| 1. 材料与方法 | 第15-19页 |
| 1.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 1.2 hRANKL蛋白制备与纯化 | 第16页 |
| 1.3 改变LB培养基pH值 | 第16-17页 |
| 1.4 稳定表达时pH值 | 第17页 |
| 1.5 改变表达温度 | 第17-18页 |
| 1.6 改变菌体裂解方法 | 第18页 |
| 1.7 本优化方法与文献报道优化方法的hRANKL产量对比 | 第18-19页 |
| 2. 结果 | 第19-27页 |
| 2.1 pH稳定缓冲液对hRANKL产量增加的效果 | 第19-23页 |
| 2.2 hRANKL表达温度的优化 | 第23-24页 |
| 2.3 超声联合渗透压法裂解对hRANKL产量的提升 | 第24-25页 |
| 2.4 本优化方法与文献报道优化方法的hRANKL产量对比 | 第25-27页 |
| 3. 讨论 | 第27-30页 |
| 参考文献 | 第30-34页 |
| 第二部分 OPG突变体的制备及其功能验证 | 第34-57页 |
| 背景资料 | 第34-36页 |
| 1. 材料与方法 | 第36-41页 |
| 1.1 试剂与耗材 | 第36-37页 |
| 1.2 蛋白表达体系的构建 | 第37页 |
| 1.3 OPGT蛋白的制备 | 第37-39页 |
| 1.3.1 菌体扩增与蛋白诱导表达 | 第37-38页 |
| 1.3.2 OPGT包涵体的制备 | 第38-39页 |
| 1.4 可溶表达法制备RANKL及TRAIL蛋白 | 第39页 |
| 1.5 表面等离子共振(SPR)测定OPG与RANKL及TRAIL蛋白的亲和力 | 第39-40页 |
| 1.6 破骨细胞分化实验 | 第40-41页 |
| 1.7 肿瘤细胞凋亡实验 | 第41页 |
| 2. 结果 | 第41-47页 |
| 2.1 包涵体法制备OPG蛋白 | 第41-42页 |
| 2.2 OPG与RANKL及TRAIL蛋白亲和力的测定 | 第42-45页 |
| 2.3 破骨细胞分化实验验证OPG突变体对RANKL蛋白的阻断作用 | 第45页 |
| 2.4 肿瘤细胞凋亡实验验证OPG突变体对TRAIL蛋白功能的影响 | 第45-47页 |
| 3. 讨论 | 第47-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 综述: RANKL/RANK/OPG通路及其相关药物狄诺塞麦治疗骨质疏松的研究进 | 第57-69页 |
| 1. OPG的发现及其功能与结构 | 第59页 |
| 2. RANKL/RANK的发现及其结构与功能 | 第59-61页 |
| 3. RANKL/RANK/OPG信号通路对骨代谢的调节 | 第61-62页 |
| 4. 抗RANKL单克隆抗体一狄诺塞麦 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第69-70页 |
| 鸣谢 | 第70-71页 |
