| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-27页 |
| 1.1 兔出血症病毒的研究进展 | 第15-23页 |
| 1.1.1 RHDV分类及形态结构 | 第15页 |
| 1.1.2 基因组结构 | 第15-17页 |
| 1.1.3 基因编码蛋白及功能概述 | 第17-18页 |
| 1.1.4 临床症状及病理变化 | 第18-19页 |
| 1.1.5 流行病学 | 第19页 |
| 1.1.6 诊断与检测 | 第19-20页 |
| 1.1.7 疫苗研究进展 | 第20-23页 |
| 1.2 犬2型腺病毒载体的研究进展 | 第23-25页 |
| 1.2.1 犬腺病毒简介 | 第23页 |
| 1.2.2 CAV2的形态结构 | 第23页 |
| 1.2.3 CAV2的基因组结构及编码蛋白 | 第23-24页 |
| 1.2.4 CAV2载体的优点 | 第24页 |
| 1.2.5 CAV2载体的构建 | 第24-25页 |
| 1.2.6 CAV2载体的应用 | 第25页 |
| 1.3 研究目的与意义 | 第25-27页 |
| 第二章 CAV2骨架载体和穿梭载体的构建及鉴定 | 第27-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-36页 |
| 2.1.1 病毒、菌种与细胞、质粒 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.4 引物设计与合成 | 第28页 |
| 2.1.5 含有CAV2全基因组的骨架载体pCAV2的构建 | 第28-31页 |
| 2.1.6 E3缺失性穿梭载体的构建 | 第31-33页 |
| 2.1.7 表达EGFP的重组犬2型腺病毒的构建 | 第33-34页 |
| 2.1.8 重组病毒rCAV2-EGFP的一步生长曲线 | 第34-36页 |
| 2.2 结果 | 第36-42页 |
| 2.2.1 骨架载体的鉴定 | 第36-39页 |
| 2.2.2 穿梭载体的鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.3 表达EGFP的重组病毒rCAV2-EGFP的鉴定 | 第40-42页 |
| 2.3 讨论 | 第42-44页 |
| 2.4 小结 | 第44-45页 |
| 第三章 表达RHDV vp60基因的重组CAV2的构建与鉴定 | 第45-57页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-50页 |
| 3.1.1 病毒、菌种与细胞、质粒 | 第45页 |
| 3.1.2 抗体及主要试剂 | 第45页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第45-46页 |
| 3.1.4 vp60基因的扩增 | 第46页 |
| 3.1.5 vp60基因与pMD18-T载体连接 | 第46页 |
| 3.1.6 穿梭质粒pUC-ΔE3-VP60的构建 | 第46-47页 |
| 3.1.7 重组质粒pCAV2-VP60的构建 | 第47页 |
| 3.1.8 重组病毒的拯救 | 第47-48页 |
| 3.1.9 重组病毒滴度的测定 | 第48页 |
| 3.1.10 重组病毒的鉴定 | 第48-50页 |
| 3.2 结果 | 第50-55页 |
| 3.2.1 vp60基因的扩增 | 第50-51页 |
| 3.2.2 pUC-ΔE3-VP60的酶切鉴定 | 第51页 |
| 3.2.3 pCAV2-VP60的PCR及酶切鉴定 | 第51-52页 |
| 3.2.4 pCAV2-VP60基因组转染MDCK细胞 | 第52页 |
| 3.2.5 重组病毒滴度的测定 | 第52页 |
| 3.2.6 重组病毒rCAV2-VP60的鉴定 | 第52-55页 |
| 3.3 讨论 | 第55-56页 |
| 3.4 小结 | 第56-57页 |
| 第四章 重组病毒rCAV2-VP60在兔体内的免疫效力评价 | 第57-65页 |
| 4.1 材料与方法 | 第57-60页 |
| 4.1.1 病毒、疫苗及血清 | 第57页 |
| 4.1.2 实验动物 | 第57页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第57页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第57-58页 |
| 4.1.5 免疫 | 第58页 |
| 4.1.6 VP60特异性抗体的ELISA检测 | 第58页 |
| 4.1.7 T淋巴细胞增殖试验 | 第58-59页 |
| 4.1.8 细胞因子检测 | 第59页 |
| 4.1.9 攻毒试验 | 第59页 |
| 4.1.10 荧光定量RT-PCR检测 | 第59页 |
| 4.1.11 统计学分析 | 第59-60页 |
| 4.2 结果 | 第60-63页 |
| 4.2.1 体液免疫 | 第60页 |
| 4.2.2 T淋巴细胞增殖检测 | 第60-61页 |
| 4.2.3 细胞因子检测 | 第61页 |
| 4.2.4 攻毒保护 | 第61-62页 |
| 4.2.5 攻毒后肝脏中的RHDV含量 | 第62-63页 |
| 4.3 讨论 | 第63-64页 |
| 4.4 小结 | 第64-65页 |
| 第五章 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |
