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松褐天牛气味结合蛋白基因的克隆与功能分析

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略语表第12-13页
第一章 文献综述第13-21页
    1.1 松褐天牛的研究第13页
    1.2 植物挥发物与植食性昆虫第13-15页
    1.3 昆虫的嗅觉感器第15页
    1.4 昆虫对气味物质的识别第15-17页
    1.5 气味结合蛋白第17-19页
        1.5.1 气味结合蛋白的特征第17页
        1.5.2 气味结合蛋白的功能研究第17-19页
    1.6 研究目的及意义第19-20页
    1.7 技术路线第20-21页
第二章 松褐天牛触角转录组分析第21-28页
    2.1 材料与方法第22-23页
        2.1.1 供试昆虫第22页
        2.1.2 实验方法第22-23页
    2.2 结果与分析第23-26页
        2.2.1 转录组测序及拼接的基本信息第23-24页
        2.2.2 Unigenes的NR注释第24-25页
        2.2.3 Unigenes的GO分析第25-26页
        2.2.4 Unigenes的COG功能注释第26页
    2.3 讨论第26-28页
第三章 松褐天牛Malt OBPs基因的克隆与分析第28-39页
    3.1 材料与方法第28-34页
        3.1.1 供试昆虫第28页
        3.1.2 实验试剂及试剂盒第28页
        3.1.3 实验仪器第28-29页
        3.1.4 松褐天牛c DNA的获取第29-30页
        3.1.5 松褐天牛Malt OBPs基因的克隆第30-34页
    3.2 结果分析第34-38页
        3.2.1 松褐天牛触角总RNA提取质量检测第34页
        3.2.2 松褐天牛Malt OBPs基因信息第34页
        3.2.3 松褐天牛Malt OBPs基因的RT-PCR扩增结果第34-35页
        3.2.4 松褐天牛Malt OBPs氨基酸序列分析第35-38页
    3.3 讨论第38-39页
第四章 松褐天牛Malt OBPs基因的时空表达特性第39-47页
    4.1 材料与方法第39-42页
        4.1.1 试验材料第39-40页
        4.1.2 样品RNA的提取第40页
        4.1.3 c DNA第一条链的合成第40页
        4.1.4 引物设计及合成第40-41页
        4.1.5 PCR反应第41-42页
        4.1.6 数据分析第42页
    4.2 结果和分析第42-45页
        4.2.1 引物特异性和扩增效率检测第42-43页
        4.2.2 松褐天牛Malt OBPs基因的时空表达分析第43-45页
    4.3 讨论第45-47页
第五章 松褐天牛Malt OBPs表达纯化及其结合特性第47-67页
    5.1 材料与方法第47-55页
        5.1.1 主要菌株、试剂盒和试剂第47-48页
        5.1.2 荧光结合气味物质第48页
        5.1.3 主要仪器第48页
        5.1.4 质粒提取第48-50页
        5.1.5 原核表达载体的构建第50-51页
        5.1.6 融合蛋白试表达第51页
        5.1.7 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第51页
        5.1.8 融合蛋白表达条件优化和融合蛋白大量表达第51-52页
        5.1.9 以p GEX-6p-1 表达的融合蛋白的纯化第52-53页
        5.1.10 以p ET17b、p ET20b表达的融合蛋白的纯化第53页
        5.1.11 蛋白浓度的测定第53-54页
        5.1.12 荧光探针适合性测定第54页
        5.1.13 荧光竞争结合试验第54页
        5.1.14 荧光竞争结合试验数据分析第54-55页
    5.2 结果与分析第55-62页
        5.2.1 重组质粒的构建第55页
        5.2.2 松褐天牛Malt OBPs的原核表达第55页
        5.2.3 松褐天牛Malt OBPs的纯化第55-56页
        5.2.4 松褐天牛Malt OBPs与 1-NPN探针的合适性检验第56页
        5.2.5 松褐天牛Malt OBPs的荧光结合特性分析第56-62页
    5.3 讨论第62-67页
第六章 主要结果与展望第67-69页
    6.1 主要结果第67页
    6.2 展望第67-69页
参考文献第69-80页
攻读硕士期间发表的学术论文第80-81页
致谢第81页

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