摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
1.1 松褐天牛的研究 | 第13页 |
1.2 植物挥发物与植食性昆虫 | 第13-15页 |
1.3 昆虫的嗅觉感器 | 第15页 |
1.4 昆虫对气味物质的识别 | 第15-17页 |
1.5 气味结合蛋白 | 第17-19页 |
1.5.1 气味结合蛋白的特征 | 第17页 |
1.5.2 气味结合蛋白的功能研究 | 第17-19页 |
1.6 研究目的及意义 | 第19-20页 |
1.7 技术路线 | 第20-21页 |
第二章 松褐天牛触角转录组分析 | 第21-28页 |
2.1 材料与方法 | 第22-23页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第22页 |
2.1.2 实验方法 | 第22-23页 |
2.2 结果与分析 | 第23-26页 |
2.2.1 转录组测序及拼接的基本信息 | 第23-24页 |
2.2.2 Unigenes的NR注释 | 第24-25页 |
2.2.3 Unigenes的GO分析 | 第25-26页 |
2.2.4 Unigenes的COG功能注释 | 第26页 |
2.3 讨论 | 第26-28页 |
第三章 松褐天牛Malt OBPs基因的克隆与分析 | 第28-39页 |
3.1 材料与方法 | 第28-34页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第28页 |
3.1.2 实验试剂及试剂盒 | 第28页 |
3.1.3 实验仪器 | 第28-29页 |
3.1.4 松褐天牛c DNA的获取 | 第29-30页 |
3.1.5 松褐天牛Malt OBPs基因的克隆 | 第30-34页 |
3.2 结果分析 | 第34-38页 |
3.2.1 松褐天牛触角总RNA提取质量检测 | 第34页 |
3.2.2 松褐天牛Malt OBPs基因信息 | 第34页 |
3.2.3 松褐天牛Malt OBPs基因的RT-PCR扩增结果 | 第34-35页 |
3.2.4 松褐天牛Malt OBPs氨基酸序列分析 | 第35-38页 |
3.3 讨论 | 第38-39页 |
第四章 松褐天牛Malt OBPs基因的时空表达特性 | 第39-47页 |
4.1 材料与方法 | 第39-42页 |
4.1.1 试验材料 | 第39-40页 |
4.1.2 样品RNA的提取 | 第40页 |
4.1.3 c DNA第一条链的合成 | 第40页 |
4.1.4 引物设计及合成 | 第40-41页 |
4.1.5 PCR反应 | 第41-42页 |
4.1.6 数据分析 | 第42页 |
4.2 结果和分析 | 第42-45页 |
4.2.1 引物特异性和扩增效率检测 | 第42-43页 |
4.2.2 松褐天牛Malt OBPs基因的时空表达分析 | 第43-45页 |
4.3 讨论 | 第45-47页 |
第五章 松褐天牛Malt OBPs表达纯化及其结合特性 | 第47-67页 |
5.1 材料与方法 | 第47-55页 |
5.1.1 主要菌株、试剂盒和试剂 | 第47-48页 |
5.1.2 荧光结合气味物质 | 第48页 |
5.1.3 主要仪器 | 第48页 |
5.1.4 质粒提取 | 第48-50页 |
5.1.5 原核表达载体的构建 | 第50-51页 |
5.1.6 融合蛋白试表达 | 第51页 |
5.1.7 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第51页 |
5.1.8 融合蛋白表达条件优化和融合蛋白大量表达 | 第51-52页 |
5.1.9 以p GEX-6p-1 表达的融合蛋白的纯化 | 第52-53页 |
5.1.10 以p ET17b、p ET20b表达的融合蛋白的纯化 | 第53页 |
5.1.11 蛋白浓度的测定 | 第53-54页 |
5.1.12 荧光探针适合性测定 | 第54页 |
5.1.13 荧光竞争结合试验 | 第54页 |
5.1.14 荧光竞争结合试验数据分析 | 第54-55页 |
5.2 结果与分析 | 第55-62页 |
5.2.1 重组质粒的构建 | 第55页 |
5.2.2 松褐天牛Malt OBPs的原核表达 | 第55页 |
5.2.3 松褐天牛Malt OBPs的纯化 | 第55-56页 |
5.2.4 松褐天牛Malt OBPs与 1-NPN探针的合适性检验 | 第56页 |
5.2.5 松褐天牛Malt OBPs的荧光结合特性分析 | 第56-62页 |
5.3 讨论 | 第62-67页 |
第六章 主要结果与展望 | 第67-69页 |
6.1 主要结果 | 第67页 |
6.2 展望 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-80页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |