摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
第一章 绪论 | 第14-16页 |
第二章 材料与方法 | 第16-30页 |
2.1 研究资料及仪器设备 | 第16-20页 |
2.1.1 主要仪器及设备 | 第16-17页 |
2.1.2 主要试剂和耗材 | 第17-18页 |
2.1.3 细胞株 | 第18页 |
2.1.4 主要试剂配制 | 第18-20页 |
2.2 实验流程与方法 | 第20-29页 |
2.2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
2.2.2 siRNA序列设计 | 第21页 |
2.2.3 细胞转染及实验分组 | 第21-22页 |
2.2.4 实时定量PCR(qRT-PCR)检测mRNA表达水平 | 第22-24页 |
2.2.5 免疫荧光检测靶基因表达水平 | 第24-25页 |
2.2.6 蛋白免疫印迹(Western blot)检测蛋白表达水平 | 第25-27页 |
2.2.7 MTT法检测细胞增殖 | 第27页 |
2.2.8 Transwell小室实验检测细胞迁移能力 | 第27-28页 |
2.2.9 Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术测细胞凋亡 | 第28-29页 |
2.2.10 Hoechst染色检测细胞凋亡 | 第29页 |
2.2.11 体外血管形成实验 | 第29页 |
2.3 统计分析 | 第29-30页 |
第三章 结果 | 第30-47页 |
3.1 在不同HCC细胞中筛选有效表达靶基因TRIF、NF-κB的实验细胞株 | 第30-32页 |
3.2 检测转染siTRIF和siNF-κB后对靶基因的沉默效果 | 第32-33页 |
3.3 检测不同实验组中dsRNA激活TLR3信号中转接蛋白TRIF及NF-κB的表达水平 | 第33-36页 |
3.3.1 Western blot检测各组靶蛋白的表达 | 第33-35页 |
3.3.2 免疫荧光检测各组靶蛋白的表达 | 第35-36页 |
3.4 检测不同实验组中dsRNA激活TLR3信号通路相关基因表达水平 | 第36-38页 |
3.5 检测不同实验组中细胞增殖水平 | 第38-39页 |
3.6 比较各实验组对细胞迁移的影响 | 第39-41页 |
3.7 比较各实验组对细胞凋亡的影响 | 第41-45页 |
3.8 比较各实验组对血管形成的抑制作用 | 第45-47页 |
第四章 讨论 | 第47-51页 |
第五章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
英文缩写词表 | 第55-57页 |
综述 | 第57-70页 |
综述参考文献 | 第66-70页 |
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第70-71页 |
A:在国内外刊物上发表的论文 | 第70页 |
B:所参加的项目 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
所获荣誉证书 | 第72-73页 |