| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1. 研究背景 | 第10页 |
| 2. 湖羊品种简介 | 第10-11页 |
| 3. Hippo通路的研究进展 | 第11-12页 |
| 3.1 Hippo信号通路在肿瘤中作用 | 第12页 |
| 3.2 Hippo信号通路与器官发育的关系 | 第12页 |
| 3.3 Hippo信号通路与干细胞的关系 | 第12页 |
| 4. Lats2基因简介 | 第12-13页 |
| 5. 骨骼肌研究进展 | 第13-15页 |
| 5.1 骨骼肌的结构 | 第13-14页 |
| 5.2 骨骼肌的发育 | 第14页 |
| 5.3 肌纤维类型 | 第14页 |
| 5.4 骨骼肌卫星细胞 | 第14-15页 |
| 5.5 与肌肉性状相关基因 | 第15页 |
| 6. 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 湖羊Lats2基因克隆及生物信息学分析 | 第17-29页 |
| 1. 材料和方法 | 第17-21页 |
| 1.1 材料 | 第17页 |
| 1.2 试剂和仪器 | 第17页 |
| 1.3 总RNA提取 | 第17-18页 |
| 1.4 cDNA第一链扩增 | 第18页 |
| 1.5 引物设计 | 第18-19页 |
| 1.6 PCR扩增 | 第19页 |
| 1.7 PCR产物回收、T载体连接和感受态细胞转化 | 第19-20页 |
| 1.8 重组质粒的筛选和鉴定 | 第20页 |
| 1.9 Lats2基因的序列生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2. 结果与分析 | 第21-27页 |
| 2.1 总RNA的质量检测 | 第21页 |
| 2.2 PCR扩增 | 第21-22页 |
| 2.3 测序结果分析 | 第22页 |
| 2.4 Lats2基因同源性和系统发育树分析 | 第22-23页 |
| 2.5 湖羊Lats2基因蛋白结构分析 | 第23-27页 |
| 3. 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 湖羊Lats2基因与YAP1基因、MSTN基因、MyoG基因以及肌球蛋白重链亚型基因的表达相关分析 | 第29-42页 |
| 1. 材料和方法 | 第29-32页 |
| 1.1 材料 | 第29-30页 |
| 1.2 方法 | 第30-32页 |
| 2. 结果分析 | 第32-40页 |
| 2.1 Lats2基因在湖羊肌肉中的时空表达分析 | 第32-33页 |
| 2.2 Lats2基因与Lats1、YAP1、MSTN、MyoG、MyHC Ⅰ、MyHCⅡA和MyHCⅡX基因的表达关联分析 | 第33-40页 |
| 3. 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 湖羊Lats2基因真核表达载体构建及Lats1和Lats2基因在湖羊骨骼肌卫星细胞过表达分析 | 第42-49页 |
| 1. 材料和方法 | 第42-44页 |
| 1.1 材料 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 1.3 湖羊Lats2基因载体构建引物设计 | 第42页 |
| 1.4 cDNA第一条链的合成 | 第42-43页 |
| 1.5 湖羊Lats2 CDS区的扩增 | 第43页 |
| 1.6 PCR产物纯化回收、T载体连接和感受态细胞转化 | 第43页 |
| 1.7 克隆质粒的鉴定和测序 | 第43页 |
| 1.8 真核表达载体构建 | 第43页 |
| 1.9 骨骼肌卫星细胞复苏 | 第43-44页 |
| 1.10 Lats1和Lats2转染成肌细胞 | 第44页 |
| 1.11 细胞总RNA的提取 | 第44页 |
| 1.12 实时荧光定量PCR引物设计与合成 | 第44页 |
| 1.13 实时荧光定量cDNA合成 | 第44页 |
| 1.14 实时荧光定量PCR | 第44页 |
| 1.15 数据分析 | 第44页 |
| 2. 结果分析 | 第44-48页 |
| 2.1 湖羊Lats2基因CDS区的扩增 | 第44-45页 |
| 2.2 Lats2基因的T载体酶切鉴定 | 第45页 |
| 2.3 Lats2基因真核表达载体的鉴定 | 第45-46页 |
| 2.4 真核表达载体Lats2和Lats1转染效率的验证 | 第46-47页 |
| 2.5 Lats2与Lats1基因过表达与肌肉发育相关基因的表达影响 | 第47-48页 |
| 3. 讨论 | 第48-49页 |
| 全文结论 | 第49-50页 |
| 未来研究思路 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
