致谢 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第12-21页 |
第一章 绪论 | 第21-29页 |
1.1 卵巢和雌性生殖 | 第21-25页 |
1.2 卵母细胞中转录组和表观遗传修饰的动态变化 | 第25-27页 |
1.3 总结 | 第27-29页 |
第二章 材料和方法 | 第29-52页 |
2.1 动物实验 | 第29-31页 |
2.1.1 敲除小鼠的获得 | 第29页 |
2.1.2 雌鼠生殖力测试 | 第29-30页 |
2.1.3 小鼠超数排卵 | 第30页 |
2.1.4 FSH和LH水平测定 | 第30-31页 |
2.2 胚胎实验 | 第31-34页 |
2.2.1 卵母细胞的获取和培养 | 第31-32页 |
2.2.2 早期胚胎的获取和培养 | 第32页 |
2.2.3 体外受精 | 第32-33页 |
2.2.4 显微注射 | 第33-34页 |
2.2.5 核移植和孤雌激活 | 第34页 |
2.3 形态学实验 | 第34-40页 |
2.3.1 石蜡包埋切片 | 第34-35页 |
2.3.2 苏木精-伊红染色 | 第35-36页 |
2.3.3 免疫组化染色 | 第36-37页 |
2.3.4 卵母细胞染色体铺片和计数 | 第37-38页 |
2.3.5 免疫荧光染色 | 第38-39页 |
2.3.6 5hmC和5mC染色 | 第39页 |
2.3.7 卵泡计数 | 第39-40页 |
2.3.8 TUNEL分析 | 第40页 |
2.4 分子生物学实验 | 第40-47页 |
2.4.1 基因型鉴定 | 第40-42页 |
2.4.2 RNA提取和荧光实时定量PCR | 第42-44页 |
2.4.3 DNA甲基化测序 | 第44-45页 |
2.4.4 Dot blot | 第45-46页 |
2.4.5 点突变 | 第46-47页 |
2.4.6 RNA-seq | 第47页 |
2.5 细胞实验 | 第47-48页 |
2.5.1 细胞培养 | 第47页 |
2.5.2 RNA干扰 | 第47-48页 |
2.5.3 转染 | 第48页 |
2.5.4 荧光素酶报告基因分析 | 第48页 |
2.6 生化实验 | 第48-52页 |
2.6.1 Western blot | 第48-49页 |
2.6.2 免疫共沉淀 | 第49-50页 |
2.6.3 泛素化分析 | 第50-52页 |
第三章 CRL4复合体维持卵泡存活和雌性生育年龄 | 第52-75页 |
3.1 引言 | 第52-54页 |
3.2 CRL4-DCAF1复合体在卵母细胞中的表达模式 | 第54-55页 |
3.3 CRL4活性缺失导致卵巢早衰 | 第55-60页 |
3.4 CRL4复合体维持卵母细胞DNA低甲基化和基因表达 | 第60-62页 |
3.5 CRL4复合体激活TET家族DNA双加氧酶 | 第62-66页 |
3.6 CRL4影响激活卵泡的存活和排卵 | 第66-69页 |
3.7 CRL4控制卵母细胞重编程能力 | 第69-73页 |
3.8 讨论和总结 | 第73-75页 |
第四章 CpG结合蛋白CFP1参与卵母细胞转录组调节 | 第75-93页 |
4.1 引言 | 第75-77页 |
4.2 H3K4me3和CFP1在卵母细胞中的表达模式 | 第77-80页 |
4.3 卵母细胞特异性的CFP1敲除造成卵巢早衰 | 第80-82页 |
4.4 CFP1敲除的卵母细胞受精后不发育 | 第82-86页 |
4.5 CFP1维持卵母细胞基因组转录活性 | 第86-90页 |
4.6 讨论和总结 | 第90-93页 |
第五章 转录辅因子YAP在受精后合子基因组激活中的作用 | 第93-112页 |
5.1 引言 | 第93-94页 |
5.2 转录辅因子YAP在卵母细胞和早期胚胎中的表达和定位 | 第94-97页 |
5.3 母源性YAP缺失造成早期胚胎发育缺陷 | 第97-100页 |
5.4 YAP在早期胚胎中调节的下游基因 | 第100-107页 |
5.5 LPA激活早期胚胎中的YAP | 第107-109页 |
5.6 讨论和总结 | 第109-112页 |
第六章 总结 | 第112-114页 |
参考文献 | 第114-125页 |
附录一 抗体信息 | 第125-127页 |
附录二 基因型鉴定引物序列 | 第127-128页 |
附录三 RT-PCR引物序列 | 第128-135页 |
附录四 甲基化测序引物序列 | 第135-137页 |
附录五 siRNA序列 | 第137-138页 |
作者简历 | 第138-140页 |