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卵母细胞转录组的调节及其在卵泡存活和早期胚胎发育中的作用

致谢第5-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第12-21页
第一章 绪论第21-29页
    1.1 卵巢和雌性生殖第21-25页
    1.2 卵母细胞中转录组和表观遗传修饰的动态变化第25-27页
    1.3 总结第27-29页
第二章 材料和方法第29-52页
    2.1 动物实验第29-31页
        2.1.1 敲除小鼠的获得第29页
        2.1.2 雌鼠生殖力测试第29-30页
        2.1.3 小鼠超数排卵第30页
        2.1.4 FSH和LH水平测定第30-31页
    2.2 胚胎实验第31-34页
        2.2.1 卵母细胞的获取和培养第31-32页
        2.2.2 早期胚胎的获取和培养第32页
        2.2.3 体外受精第32-33页
        2.2.4 显微注射第33-34页
        2.2.5 核移植和孤雌激活第34页
    2.3 形态学实验第34-40页
        2.3.1 石蜡包埋切片第34-35页
        2.3.2 苏木精-伊红染色第35-36页
        2.3.3 免疫组化染色第36-37页
        2.3.4 卵母细胞染色体铺片和计数第37-38页
        2.3.5 免疫荧光染色第38-39页
        2.3.6 5hmC和5mC染色第39页
        2.3.7 卵泡计数第39-40页
        2.3.8 TUNEL分析第40页
    2.4 分子生物学实验第40-47页
        2.4.1 基因型鉴定第40-42页
        2.4.2 RNA提取和荧光实时定量PCR第42-44页
        2.4.3 DNA甲基化测序第44-45页
        2.4.4 Dot blot第45-46页
        2.4.5 点突变第46-47页
        2.4.6 RNA-seq第47页
    2.5 细胞实验第47-48页
        2.5.1 细胞培养第47页
        2.5.2 RNA干扰第47-48页
        2.5.3 转染第48页
        2.5.4 荧光素酶报告基因分析第48页
    2.6 生化实验第48-52页
        2.6.1 Western blot第48-49页
        2.6.2 免疫共沉淀第49-50页
        2.6.3 泛素化分析第50-52页
第三章 CRL4复合体维持卵泡存活和雌性生育年龄第52-75页
    3.1 引言第52-54页
    3.2 CRL4-DCAF1复合体在卵母细胞中的表达模式第54-55页
    3.3 CRL4活性缺失导致卵巢早衰第55-60页
    3.4 CRL4复合体维持卵母细胞DNA低甲基化和基因表达第60-62页
    3.5 CRL4复合体激活TET家族DNA双加氧酶第62-66页
    3.6 CRL4影响激活卵泡的存活和排卵第66-69页
    3.7 CRL4控制卵母细胞重编程能力第69-73页
    3.8 讨论和总结第73-75页
第四章 CpG结合蛋白CFP1参与卵母细胞转录组调节第75-93页
    4.1 引言第75-77页
    4.2 H3K4me3和CFP1在卵母细胞中的表达模式第77-80页
    4.3 卵母细胞特异性的CFP1敲除造成卵巢早衰第80-82页
    4.4 CFP1敲除的卵母细胞受精后不发育第82-86页
    4.5 CFP1维持卵母细胞基因组转录活性第86-90页
    4.6 讨论和总结第90-93页
第五章 转录辅因子YAP在受精后合子基因组激活中的作用第93-112页
    5.1 引言第93-94页
    5.2 转录辅因子YAP在卵母细胞和早期胚胎中的表达和定位第94-97页
    5.3 母源性YAP缺失造成早期胚胎发育缺陷第97-100页
    5.4 YAP在早期胚胎中调节的下游基因第100-107页
    5.5 LPA激活早期胚胎中的YAP第107-109页
    5.6 讨论和总结第109-112页
第六章 总结第112-114页
参考文献第114-125页
附录一 抗体信息第125-127页
附录二 基因型鉴定引物序列第127-128页
附录三 RT-PCR引物序列第128-135页
附录四 甲基化测序引物序列第135-137页
附录五 siRNA序列第137-138页
作者简历第138-140页

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