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训练对蒙古马肌肉发育相关基因MyoG的表达量影响研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
缩略词表第8-9页
1 引言第9-13页
    1.1 蒙古马的分布及特征第9页
    1.2 蒙古马的耐力第9-10页
    1.3 运动训练对耐力的作用第10页
    1.4 马运动学研究进展第10-11页
    1.5 转录组学的研究意义第11-13页
2 本研究的目的意义及技术路线第13-14页
    2.1 本研究目的和意义第13页
        2.1.1 研究目的第13页
        2.1.2 研究意义第13页
    2.2 本研究的技术路线第13-14页
3 实验材料与方法第14-23页
    3.1 实验材料第14-16页
        3.1.1 实验用马及其训练原则第14页
        3.1.2 实验样品的采集第14页
        3.1.3 实验仪器设备第14-15页
        3.1.4 实验试剂材料第15-16页
    3.2 实验方法第16-23页
        3.2.1 蒙古马骨骼肌细胞的体外培养第16-17页
            3.2.1.1 骨骼肌细胞分离及培养第16页
            3.2.1.2 骨骼肌细胞纯化第16-17页
            3.2.1.3 骨骼肌细胞传代第17页
            3.2.1.4 骨骼肌细胞冷冻与复苏第17页
            3.2.1.5 骨骼肌细胞鉴定第17页
        3.2.2 试剂盒法提取肌肉组织及培养肌细胞总RNA第17-18页
        3.2.3 总RNA的质量检测第18-20页
            3.2.3.1 检验总RNA的完整性第18页
            3.2.3.2 测定总RNA的纯度第18页
            3.2.3.3 肌肉转录组高通量测序文库制备与文库测序第18-20页
            3.2.3.4 蒙古马训练前后肌肉组织及培养肌细胞总RNA反转录合成cDNA第20页
        3.2.4 蒙古马训练前后肌肉发育相关基因的表达量测定第20-23页
            3.2.4.1 引物设计第20-21页
            3.2.4.2 引物溶解及稀释第21页
            3.2.4.3 PCR扩增第21页
            3.2.4.4 实时荧光定量PCR体系及条件第21-23页
4 实验结果与分析第23-29页
    4.1 蒙古马肌肉细胞体外培养结果第23页
    4.2 蒙古马训练前后肌肉及肌肉细胞总RNA的提取结果第23-24页
    4.3 训练前后差异表达基因的筛选第24-25页
    4.4 训练前后差异基因的Gene Ontology功能富集分析第25-26页
    4.5 与肌肉生长相关基因的确定第26页
    4.6 蒙古马训练前后正常肌肉组织和肌细胞培养后的MyoG基因的定量验证第26-29页
        4.6.1 MyoG和18srRNA基因PCR扩增结果第27-28页
        4.6.2 蒙古马训练前后正常细胞和培养传代后MyoG基因的表达差异分析第28-29页
5 讨论第29-30页
6 展望第30-31页
致谢第31-32页
参考文献第32-34页
作者简介第34页

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