摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 引言 | 第9-13页 |
1.1 蒙古马的分布及特征 | 第9页 |
1.2 蒙古马的耐力 | 第9-10页 |
1.3 运动训练对耐力的作用 | 第10页 |
1.4 马运动学研究进展 | 第10-11页 |
1.5 转录组学的研究意义 | 第11-13页 |
2 本研究的目的意义及技术路线 | 第13-14页 |
2.1 本研究目的和意义 | 第13页 |
2.1.1 研究目的 | 第13页 |
2.1.2 研究意义 | 第13页 |
2.2 本研究的技术路线 | 第13-14页 |
3 实验材料与方法 | 第14-23页 |
3.1 实验材料 | 第14-16页 |
3.1.1 实验用马及其训练原则 | 第14页 |
3.1.2 实验样品的采集 | 第14页 |
3.1.3 实验仪器设备 | 第14-15页 |
3.1.4 实验试剂材料 | 第15-16页 |
3.2 实验方法 | 第16-23页 |
3.2.1 蒙古马骨骼肌细胞的体外培养 | 第16-17页 |
3.2.1.1 骨骼肌细胞分离及培养 | 第16页 |
3.2.1.2 骨骼肌细胞纯化 | 第16-17页 |
3.2.1.3 骨骼肌细胞传代 | 第17页 |
3.2.1.4 骨骼肌细胞冷冻与复苏 | 第17页 |
3.2.1.5 骨骼肌细胞鉴定 | 第17页 |
3.2.2 试剂盒法提取肌肉组织及培养肌细胞总RNA | 第17-18页 |
3.2.3 总RNA的质量检测 | 第18-20页 |
3.2.3.1 检验总RNA的完整性 | 第18页 |
3.2.3.2 测定总RNA的纯度 | 第18页 |
3.2.3.3 肌肉转录组高通量测序文库制备与文库测序 | 第18-20页 |
3.2.3.4 蒙古马训练前后肌肉组织及培养肌细胞总RNA反转录合成cDNA | 第20页 |
3.2.4 蒙古马训练前后肌肉发育相关基因的表达量测定 | 第20-23页 |
3.2.4.1 引物设计 | 第20-21页 |
3.2.4.2 引物溶解及稀释 | 第21页 |
3.2.4.3 PCR扩增 | 第21页 |
3.2.4.4 实时荧光定量PCR体系及条件 | 第21-23页 |
4 实验结果与分析 | 第23-29页 |
4.1 蒙古马肌肉细胞体外培养结果 | 第23页 |
4.2 蒙古马训练前后肌肉及肌肉细胞总RNA的提取结果 | 第23-24页 |
4.3 训练前后差异表达基因的筛选 | 第24-25页 |
4.4 训练前后差异基因的Gene Ontology功能富集分析 | 第25-26页 |
4.5 与肌肉生长相关基因的确定 | 第26页 |
4.6 蒙古马训练前后正常肌肉组织和肌细胞培养后的MyoG基因的定量验证 | 第26-29页 |
4.6.1 MyoG和18srRNA基因PCR扩增结果 | 第27-28页 |
4.6.2 蒙古马训练前后正常细胞和培养传代后MyoG基因的表达差异分析 | 第28-29页 |
5 讨论 | 第29-30页 |
6 展望 | 第30-31页 |
致谢 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-34页 |
作者简介 | 第34页 |