| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-19页 |
| 第一部分：机械牵张拉力刺激促进韧带成纤维细胞中lncRNAMALAT1和NEAT1的表达 | 第19-52页 |
| 一、引言 | 第19页 |
| 二、材料和方法 | 第19-37页 |
| （一）主要试剂的配置 | 第19-23页 |
| （二）颈椎后纵韧带成纤维细胞RNA提取 | 第23页 |
| （三）实时荧光定量PCR检测 | 第23-26页 |
| （四）颈椎后纵韧带FC的培养 | 第26页 |
| （五）颈椎后纵韧带成纤维细胞传代培养 | 第26-27页 |
| （六）细胞冻存 | 第27页 |
| （七）颈椎后纵韧带组织石蜡包埋 | 第27-28页 |
| （八）颈椎后纵韧带组织HE染色 | 第28页 |
| （九）颈椎后纵韧带组织免疫组织化学染色 | 第28-30页 |
| （十）质粒转化 | 第30页 |
| （十一）质粒提取 | 第30-31页 |
| （十二）成骨诱导分化 | 第31页 |
| （十三）碱性磷酸酶（ALP）染色 | 第31-32页 |
| （十四）碱性磷酸酶（ALP）活性定量 | 第32页 |
| （十五）茜素红染色 | 第32页 |
| （十六）茜素红定量 | 第32页 |
| （十七）成脂肪诱导分化 | 第32-33页 |
| （十八）油红O（oil red）染色 | 第33页 |
| （十九）成软骨诱导分化 | 第33页 |
| （二十）Micromass组织学处理 | 第33-34页 |
| （二十一）阿尔新蓝（Alcian blue）染色 | 第34页 |
| （二十二） Western blot检测 | 第34-37页 |
| 三、统计学方法 | 第37页 |
| 四、结果及结论 | 第37-50页 |
| （一）颈椎后纵韧带骨化样本收集 | 第37-39页 |
| （二）颈椎后纵韧带成纤维细胞的分离培养 | 第39-40页 |
| （三）基因芯片检测颈椎后纵韧带骨化组织和非骨化组织中lncRNA的表达差异 | 第40-41页 |
| （四）lncRNA MALAT1和NEAT1在颈椎后纵韧带骨化组织和非骨化组织中的表达 | 第41-42页 |
| （五）力学刺激对颈椎后纵韧带FC成骨分化的影响 | 第42-47页 |
| （六） lncRNA MALAT1和NEAT1在力学诱导的颈椎后纵韧带成纤维细胞成骨分化过程中的表达 | 第47页 |
| （七）颈椎后纵韧带成纤维细胞的干细胞特性 | 第47-50页 |
| 五、讨论 | 第50-52页 |
| 第二部分：lncRNA MALAT1和NEAT1调控颈椎后纵韧带成纤维细胞骨化的分子机制研究 | 第52-71页 |
| 一、引言 | 第52页 |
| 二、材料和方法 | 第52-60页 |
| （一）主要试剂的配置 | 第52页 |
| （二）颈椎后纵韧带成纤维细胞RNA提取 | 第52-53页 |
| （三）实时荧光定量PCR检测 | 第53-56页 |
| （四）颈椎后纵韧带成纤维细胞的培养 | 第56页 |
| （五）颈椎后纵韧带成纤维细胞传代培养 | 第56页 |
| （六）细胞冻存 | 第56页 |
| （七）碱性磷酸酶（ALP）染色 | 第56-57页 |
| （八）碱性磷酸酶（ALP）活性定量 | 第57页 |
| （九）Western blot检测 | 第57-60页 |
| 三、统计学方法 | 第60页 |
| 四、结果及结论 | 第60-69页 |
| （一）lncRNA MALAT1在力学诱导的颈椎后纵韧带成纤维细胞成骨分化中的作用 | 第60-65页 |
| （二）lncRNA MALAT1调控miR-30a-5p的表达 | 第65-67页 |
| （三）miR-30a-5p靶基因预测与验证 | 第67-69页 |
| 五、讨论 | 第69-71页 |
| 综述 | 第71-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 在读期间发表论文与参加科研工作情况说明 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
