| 摘要 | 第3-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 前言 | 第16-23页 |
| 1. 氧化应激与食管癌的角化珠形成 | 第16-17页 |
| 2. 热休克蛋白90 | 第17-18页 |
| 3. G2/M期阻滞与cyclin B1 | 第18-20页 |
| 4. 泛素-蛋白酶体系统 | 第20-21页 |
| 5. Hsp90与周期蛋白cyclin B1 | 第21页 |
| 6. 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 材料与方法 | 第23-39页 |
| 1. 实验材料 | 第23-27页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 1.2 主要试剂及配制 | 第24-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-38页 |
| 2.1 细胞培养 | 第27页 |
| 2.2 药物处理 | 第27页 |
| 2.3 CCK-8法检测细胞活力 | 第27-28页 |
| 2.4 流式细胞术 | 第28页 |
| 2.5 Western blotting检测细胞内蛋白表达 | 第28-32页 |
| 2.6 荧光定量PCR检测cyclin B1 mRNA水平 | 第32-33页 |
| 2.7 ROS探针法检测细胞内ROS含量 | 第33-34页 |
| 2.8 蛋白酶体活性的测定 | 第34页 |
| 2.9 免疫共沉淀 | 第34-35页 |
| 2.10 细胞免疫荧光检测 | 第35-36页 |
| 2.11 siRNA细胞转染 | 第36-37页 |
| 2.12 免疫组化 | 第37-38页 |
| 3. 统计学处理 | 第38-39页 |
| 结果 | 第39-60页 |
| 1. 用过氧化氢(H_2O_2)建立食管癌细胞TE-1氧化损伤模型 | 第39-41页 |
| 2. 500μMH_2O_2诱导氧化应激对TE-1细胞周期的影响 | 第41-45页 |
| 3. 500μMH_2O_2诱导氧化应激对TE-1细胞内可溶性Hsp90α的影响 | 第45-46页 |
| 4. 500μMH_2O_2诱导氧化应激对TE-1糜蛋白酶活性的影响 | 第46-47页 |
| 5. Hsp90抑制剂17-DMAG与蛋白酶体抑制剂MG132对TE-1细胞周期的影响 | 第47-50页 |
| 6. Hsp90抑制剂17-DMAG对TE-1糜蛋白酶活性的影响 | 第50-52页 |
| 7. cylin B1RNA干扰对H_2O_2导致的cyclin B1蓄积和G2/M期阻滞的影响 | 第52-53页 |
| 8. Hsp90抑制剂17-DMAG对TE-1细胞内ROS水平的影响 | 第53-55页 |
| 9. 500μMH_2O_2诱导氧化应激对Hsp90α与cyclin B1相互作用以及对cyclin B1泛素化水平的影响 | 第55-57页 |
| 10. Hsp90a和cyclin B1在高分化人食管鳞癌组织中不同程度角化状态下的表达特征与相互关系变化 | 第57-58页 |
| 11. 人食管鳞癌组织中HO-1和磷酸化H2A.X的表达情况 | 第58-60页 |
| 讨论 | 第60-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 全文总结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 中英文缩略词表 | 第72-73页 |
| 攻读硕士学位期间成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
