| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩写对照表 | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-18页 |
| 1 猪流行性腹泻概述 | 第11-14页 |
| 1.1 猪流行性腹泻病毒及其主要蛋白 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外PEDV疫苗研究进展 | 第12-14页 |
| 2 家蚕杆状病毒表达系统 | 第14-15页 |
| 2.1 杆状病毒概述 | 第14页 |
| 2.2 BEVS及其在基因工程疫苗研究中的应用 | 第14-15页 |
| 3 黏膜免疫系统 | 第15-18页 |
| 3.1 黏膜免疫系统的组成、结构 | 第15-16页 |
| 3.2 黏膜免疫疫苗的研究进展 | 第16-18页 |
| 第二章 研究方案设计 | 第18-20页 |
| 1 研究目的、意义 | 第18页 |
| 2 研究内容 | 第18-19页 |
| 3 实验流程图 | 第19-20页 |
| 第三章 PEDV S1蛋白的真核表达 | 第20-32页 |
| 1 材料与试剂 | 第20-22页 |
| 1.1 实验材料 | 第20页 |
| 1.2 试剂与试剂盒 | 第20-22页 |
| 1.3 主要仪器 | 第22页 |
| 2 重组家蚕杆状病毒的构建 | 第22-28页 |
| 2.1 pFastBacHTB-SP-S1-eGFP-TMD质粒的提取 | 第22页 |
| 2.2 重组BmBacmid构建 | 第22-25页 |
| 2.3 BmN细胞的冻存、复苏与培养 | 第25-26页 |
| 2.4 重组家蚕杆状病毒的获得 | 第26页 |
| 2.5 重组家蚕杆状病毒滴度的测定（TCID50法） | 第26-27页 |
| 2.6 重组家蚕杆状病毒表达PEDV S1蛋白的Western Blot分析 | 第27页 |
| 2.7 重组家蚕杆状病毒S1蛋白表达量检测及增殖曲线 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-32页 |
| 3.1 重组BmBacmid鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2 BmN细胞发病情况及发荧光情况 | 第29-30页 |
| 3.3 PEDV S1蛋白在BmN细胞中的表达鉴定 | 第30页 |
| 3.4 病毒增殖情况与S1融合蛋白表达量分析 | 第30-32页 |
| 第四章 表达S1融合蛋白的家蚕杆状病毒免疫原性分析 | 第32-39页 |
| 1 材料与试剂 | 第32-33页 |
| 1.1 实验材料 | 第32页 |
| 1.2 试剂与试剂盒 | 第32-33页 |
| 1.3 主要仪器 | 第33页 |
| 2 免疫原类型及制备 | 第33页 |
| 3 免疫小鼠 | 第33-35页 |
| 3.1 间接ELISA检测免疫鼠血清IgG的效价 | 第34页 |
| 3.2 免疫鼠血清sIgA的检测 | 第34-35页 |
| 3.3 免疫鼠脾淋巴细胞增殖实验 | 第35页 |
| 3.4 免疫鼠肺泡灌洗液sIgA的检测 | 第35页 |
| 3.5 免疫鼠脾CD8+T淋巴细胞量的流式细胞仪检测 | 第35页 |
| 4 数据的统计分析 | 第35-36页 |
| 5 结果与分析 | 第36-39页 |
| 5.1 PEDV特异性抗体效价检测 | 第36页 |
| 5.2 免疫鼠血清及肺泡灌洗液sIgA的检测 | 第36-37页 |
| 5.3 免疫鼠脾淋巴细胞增殖 | 第37-38页 |
| 5.4 免疫鼠脾CD8~+T淋巴细胞的流式检测 | 第38-39页 |
| 讨论 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
