| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略语 | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1 引言 | 第10页 |
| 2 猪圆环病毒分子生物学 | 第10-11页 |
| 2.1 病毒主要基因及其编码蛋白 | 第10页 |
| 2.2 病毒的复制 | 第10-11页 |
| 3 猪圆环病毒相关疾病 | 第11-12页 |
| 3.1 断乳仔猪多系统衰竭综合征 | 第11页 |
| 3.2 猪皮炎肾病综合征 | 第11页 |
| 3.3 猪呼吸道疾病综合征 | 第11页 |
| 3.4 生殖障碍 | 第11页 |
| 3.5 渗出性表皮炎 | 第11-12页 |
| 3.6 坏死性淋巴结炎 | 第12页 |
| 3.7 先天性震颤 | 第12页 |
| 4. 猪圆环病毒免疫学 | 第12-13页 |
| 4.1 树突状细胞 | 第12-13页 |
| 4.2 T淋巴细胞 | 第13页 |
| 4.3 细胞因子 | 第13页 |
| 5 猪圆环病毒2型分子致病机制 | 第13-16页 |
| 5.1 病毒复制 | 第14页 |
| 5.2 猪圆环病毒与细胞信号传导 | 第14页 |
| 5.3 病毒与氧化应激反应 | 第14-15页 |
| 5.4 细胞miRNA参与猪圆环病毒感染 | 第15页 |
| 5.5 猪圆环病毒与细胞凋亡 | 第15页 |
| 5.6 猪圆环病毒与细胞自噬 | 第15-16页 |
| 6 蛋白质相互作用 | 第16-18页 |
| 6.1 与PCV2 Cap蛋白相互作用的细胞蛋白 | 第16页 |
| 6.2 与PCV2 ORF3蛋白相互作用的细胞蛋白 | 第16-18页 |
| 第二章 实验方案 | 第18-20页 |
| 1 研究目的和意义 | 第18页 |
| 2 研究的主要内容 | 第18-19页 |
| 3 技术路线 | 第19-20页 |
| 第三章 猪圆环病毒2型Cap蛋白多克隆抗体的制备 | 第20-31页 |
| 1 材料 | 第20-23页 |
| 1.1 菌株质粒 | 第20页 |
| 1.2 试剂 | 第20页 |
| 1.3 实验仪器 | 第20页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第20-23页 |
| 2 方法 | 第23-27页 |
| 2.1 cap目的基因片段的扩增 | 第23-25页 |
| 2.2 目的蛋白的诱导表达 | 第25页 |
| 2.3 SDS-PAGE分析表达产物 | 第25页 |
| 2.4 蛋白纯化 | 第25-27页 |
| 3 结果 | 第27-29页 |
| 3.1 原核表达载体pET-28a-Cap的构建 | 第27-28页 |
| 3.2 Cap重组蛋白的表达和纯化 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 第四章 猪圆环病毒2型Cap蛋白稳定表达细胞系的构建 | 第31-43页 |
| 1 材料 | 第31-33页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第31页 |
| 1.2 材料与试剂 | 第31页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第31-33页 |
| 2 方法 | 第33-38页 |
| 2.1 猪圆环病毒2型cap基因的克隆 | 第33-35页 |
| 2.2 嘌呤霉素筛选稳定蛋白表达细胞株 | 第35页 |
| 2.3 Western blot检测重组Cap蛋白表达 | 第35-37页 |
| 2.4 免疫共沉淀检测重组Cap蛋白表达 | 第37-38页 |
| 2.5 间接免疫荧光检测Cap重组蛋白表达 | 第38页 |
| 3 实验结果与分析 | 第38-42页 |
| 3.1 cap基因的PCR扩增 | 第38-39页 |
| 3.2 pDEST-SFB-Cap稳定表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.3 Western bolt检测Cap重组蛋白的表达 | 第40-41页 |
| 3.4 免疫共沉淀检测Cap重组蛋白的表达 | 第41页 |
| 3.5 间接免疫荧光检测Cap重组蛋白表达 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 猪圆环病毒2型Cap蛋白诱导细胞凋亡 | 第43-46页 |
| 1 材料 | 第43页 |
| 1.1 细胞 | 第43页 |
| 1.2 材料与试剂 | 第43页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-44页 |
| 2.1 待检测样品的制备 | 第43页 |
| 2.2 仪器使用 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44页 |
| 3.1 流式细胞仪检测PK-15 细胞凋亡 | 第44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
