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Shewanella oneidensis MR-1降解偶氮染料的机理及偶氮还原酶活性位点的研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 绪论第13-35页
    1.1 引言第13-15页
    1.2 微生物降解偶氮染料的研究进展第15-22页
        1.2.1 偶氮染料简介第15-16页
        1.2.2 细菌降解偶氮染料的研究进展第16-19页
        1.2.3 真菌降解偶氮染料的研究进展第19-22页
        1.2.4 藻类降解偶氮染料的研究第22页
    1.3 代谢组学简介第22-28页
        1.3.1 代谢组学的概念第22页
        1.3.2 基于核磁共振技术的代谢组学简介第22-26页
        1.3.3 代谢组学的应用第26-28页
    1.4 转录组学简介第28-32页
        1.4.1 转录组和转录组学第28页
        1.4.2 转录组学分析技术的发展第28-31页
        1.4.3 基于RNA测序技术的转录组学应用第31-32页
    1.5 计算机模拟蛋白质与小分子配体结构的研究第32-33页
        1.5.1 蛋白质—配体分析技术简介第32-33页
        1.5.2 AutoDock简介及应用第33页
    1.6 研究背景、目的及意义第33-35页
第二章 S. oneidensis MR-1在不同氧条件下降解甲基橙的代谢组分析第35-49页
    2.1 材料与方法第35-38页
        2.1.1 材料与试剂第35页
        2.1.2 实验所用溶液配制方法第35-36页
        2.1.3 不同氧含量条件下细菌的生长曲线第36页
        2.1.4 不同氧含量条件下细菌对甲基橙的降解率第36-37页
        2.1.5 代谢组样品处理与测定第37页
        2.1.6 代谢组数据分析方法第37-38页
    2.2 结果与分析第38-48页
        2.2.1 细菌在不同培养条件下的生长曲线第38-39页
        2.2.2 不同氧含量条件下细菌对甲基橙的降解率第39-40页
        2.2.3 S. oneidensis MR-1在三种培养条件下的代谢物归属第40-43页
        2.2.4 多变量数据分析第43-48页
    2.3 小结第48-49页
第三章 S. oneidensis MR-1在不同氧条件下降解甲基橙的转录组分析第49-71页
    3.1 材料与方法第49-53页
        3.1.1 材料与试剂第49页
        3.1.2 RNA提取与cDNA合成第49-50页
        3.1.3 RNA-Seq与数据分析第50-51页
        3.1.4 RT-qPCR检验转录组数据第51-53页
    3.2 结果与分析第53-69页
        3.2.1 转录组样品相关性及测序结果验证第53-54页
        3.2.2 甲基橙诱导的S.oneidensis MR-1转录水平上的差异表达基因第54-60页
        3.2.3 高浓度溶解氧诱导的S.oneidensis MR-1转录水平上的差异表达基因第60-65页
        3.2.4 代谢过程的相互影响以及氧抑制甲基橙还原的假设机制第65-67页
        3.2.5 荧光定量PCR技术验证转录组数据第67-69页
    3.3 小结第69-71页
第四章 偶氮还原酶与配体分子结合位点预测第71-83页
    4.1 实验材料与方法第71-72页
        4.1.1 软件及配体分子结构来源第71页
        4.1.2 同源建摸第71页
        4.1.3 分子对接第71-72页
    4.2 结果与分析第72-82页
        4.2.1 S.oneidensis MR-1偶氮还原酶的结构第72-75页
        4.2.2 FMN与S.oneidensis MR-1偶氮还原酶的对接第75-77页
        4.2.3 NADH与soAzoR-FMN复合体的对接第77-79页
        4.2.4 甲基红与soAzoR-FMN复合体的对接第79-82页
    4.3 小结第82-83页
第五章 偶氮还原酶活性中心残基作用分析第83-101页
    5.1 材料与方法第83-93页
        5.1.1 材料与试剂第83页
        5.1.2 实验所用溶液配制方法第83-85页
        5.1.3 S.oneidensis MR-1基因组提取第85-86页
        5.1.4 偶氮还原酶基因的克隆与转化第86-89页
        5.1.5 定点突变偶氮还原酶基因第89-91页
        5.1.6 野生型和突变型偶氮还原酶的表达与纯化第91-92页
        5.1.7 野生型和突变型偶氮还原酶酶促动力学分析第92-93页
    5.2 结果与分析第93-99页
        5.2.1 野生型与突变型重组质粒构建第93-96页
        5.2.2 野生型与突变型偶氮还原酶酶促动力学分析第96-99页
    5.3 小结第99-101页
第六章 结论与展望第101-103页
    6.1 结论第101-102页
    6.2 创新点与展望第102-103页
参考文献第103-115页
附录 偶氮还原酶突变体测序结果第115-125页
致谢第125-127页
作者简介及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第127页

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