摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第一部分 文昌鱼可变淋巴受体样蛋白Bf66946的研究 | 第11-67页 |
第一章 研究背景 | 第11-27页 |
1.1 引言 | 第11-13页 |
1.2 无颌类脊椎动物中的免疫 | 第13-21页 |
1.2.1 无颌类脊椎动物中的淋巴样组织和细胞 | 第13-15页 |
1.2.2 无颌类脊椎动物中的可变淋巴受体(VLR) | 第15-21页 |
1.3 文昌鱼中的免疫研究进展 | 第21-27页 |
1.3.1 文昌鱼中淋巴样细胞的发现 | 第21-22页 |
1.3.2 文昌鱼中发现的原始的适应性免疫系统的存在证据 | 第22-25页 |
1.3.3 文昌鱼中VLR样蛋白存在的可能性分析 | 第25-27页 |
第二章 实验材料、仪器设备与方法 | 第27-39页 |
2.1 实验材料 | 第27页 |
2.1.1 所用质粒、菌株和细胞株 | 第27页 |
2.1.2 酶与其它实验试剂 | 第27页 |
2.2 仪器设备 | 第27-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-39页 |
2.3.1 Bf66946蛋白的重组质粒构建 | 第28-31页 |
2.3.2 目的蛋白的表达与纯化 | 第31-33页 |
2.3.3 蛋白质的质量评估 | 第33页 |
2.3.4 晶体初筛与优化 | 第33-34页 |
2.3.5 数据收集与结构解析 | 第34-35页 |
2.3.6 Bf66946与小分子的结合实验 | 第35页 |
2.3.7 Bf66946与细菌的结合实验 | 第35-36页 |
2.3.8 Bf66946与细菌肽聚糖的结合实验 | 第36-37页 |
2.3.9 文昌鱼的培养 | 第37页 |
2.3.10 荧光定量PCR | 第37-39页 |
第三章 结果与讨论 | 第39-67页 |
3.1 文昌鱼中VLR样蛋白靶标的筛选 | 第39-40页 |
3.2 Bf66946的序列分析 | 第40-42页 |
3.3 Bf66946的表达与纯化 | 第42-47页 |
3.4 Bf66946的结晶实验 | 第47-49页 |
3.5 Bf66946的结构解析 | 第49-53页 |
3.6 Bf66946的结构与序列分析 | 第53-58页 |
3.7 Bf66946的功能分析 | 第58-66页 |
3.7.1 Bf66946与小分子的结合实验 | 第58-59页 |
3.7.2 Bf66946与细菌的结合实验 | 第59-62页 |
3.7.3 Bf66946与细菌肽聚糖的结合实验 | 第62-64页 |
3.7.4 Bf66946同源蛋白Bb24355的生理实验 | 第64-66页 |
3.8 本章小结 | 第66-67页 |
第二部分 其它工作 | 第67-85页 |
第四章 蓝细菌中天冬氨酸消旋酶McyF的结构和功能研究 | 第67-83页 |
4.1 简单研究背景 | 第67-69页 |
4.2 实验材料与方法 | 第69-74页 |
4.2.1 McyF的分子克隆 | 第69页 |
4.2.2 McyF的表达纯化和结晶 | 第69-70页 |
4.2.3 McyF的结构解析 | 第70-72页 |
4.2.4 McyF的酶活实验 | 第72-74页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第74-81页 |
4.3.1 McyF的整体结构 | 第74页 |
4.3.2 McyF的活性位点口袋 | 第74-77页 |
4.3.3 Glu197氨基酸残基在催化反应中的重要作用 | 第77-78页 |
4.3.4 McyF与L-Asp/Glu特异性消旋酶EcL-DER的比较 | 第78页 |
4.3.5 McyF可能催化甲基化天冬氨酸的手性异构反应 | 第78-81页 |
4.4 本章小结 | 第81-83页 |
第五章 南极鱼卵透明带蛋白的抗冻功能研究 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-91页 |
附录 | 第91-111页 |
致谢 | 第111-113页 |
攻读学位期间发表的学术论文与参加的学术会议和项目 | 第113-114页 |