| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论(乙肝病毒与天然免疫识别) | 第12-30页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 乙肝病毒简介 | 第12-13页 |
| 1.3 乙肝病毒的生活史 | 第13-15页 |
| 1.4 乙肝病毒cccDNA | 第15-18页 |
| 1.5 乙肝病毒与逆转录病毒的对比 | 第18页 |
| 1.6 乙肝病毒的感染 | 第18-20页 |
| 1.7 天然免疫识别相关信号通路 | 第20-25页 |
| 1.7.1 Toll样家族受体 | 第20-21页 |
| 1.7.2 RNA识别受体 | 第21-22页 |
| 1.7.3 DNA识别受体 | 第22-25页 |
| 1.8 Ku70/80分子 | 第25-26页 |
| 1.9 天然免疫识别产物 | 第26页 |
| 1.10 趋化因子与肝炎 | 第26-27页 |
| 1.11 乙肝病毒的天然免疫识别 | 第27-30页 |
| 第二章 胞质转移的Ku70/80复合物识别HBV DNA诱导产生炎性相关趋化因子 | 第30-85页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 材料方法 | 第30-40页 |
| 2.2.1 基因芯片数据分析 | 第30-31页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第31页 |
| 2.2.3 细胞转染 | 第31页 |
| 2.2.4 RNA提取 | 第31-32页 |
| 2.2.5 RNA反转录(20uL体系) | 第32页 |
| 2.2.6 PCR、琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR(SYBR Green法) | 第32-33页 |
| 2.2.8 质粒构建 | 第33页 |
| 2.2.9 DNA胶回收 | 第33页 |
| 2.2.10 核酸浓度测定 | 第33-34页 |
| 2.2.11 质粒转化 | 第34页 |
| 2.2.12 腺病毒包装 | 第34页 |
| 2.2.13 腺病毒扩增 | 第34页 |
| 2.2.14 腺病毒纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.15 腺病毒滴度测定(空斑法) | 第35页 |
| 2.2.16 RNA干扰 | 第35页 |
| 2.2.17 生物素标记HBV DNA | 第35页 |
| 2.2.18 细胞蛋白提取 | 第35-36页 |
| 2.2.19 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第36页 |
| 2.2.20 非变性凝胶电泳(Native PAGE) | 第36页 |
| 2.2.21 Western Blot | 第36页 |
| 2.2.22 免疫荧光 | 第36-37页 |
| 2.2.23 小鼠实验 | 第37页 |
| 2.2.24 血清谷丙转氨酶(ALT)检测 | 第37页 |
| 2.2.25 组织冰冻切片 | 第37页 |
| 2.2.26 组织匀浆 | 第37-38页 |
| 2.2.27 BCA测定蛋白浓度 | 第38页 |
| 2.2.28 酶联免疫吸附测定法(ELISA) | 第38页 |
| 2.2.29 微量样本多指标流式蛋白定量(CBA) | 第38-39页 |
| 2.2.30 小鼠淋巴细胞分离 | 第39页 |
| 2.2.31 流式细胞术 | 第39页 |
| 2.2.32 统计学分析 | 第39页 |
| 2.2.33 抗体使用,PCR引物序列,siRNA序列(参见附录) | 第39-40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-80页 |
| 2.3.1 乙肝患者体内高表达CCL5等趋化因子 | 第40-44页 |
| 2.3.2 Ad-HBV感染会引起小鼠肝脏中趋化因子的上调和淋巴细胞的增多 | 第44-48页 |
| 2.3.3 乙肝病毒DNA刺激会导致肝脏来源内皮细胞上调趋化因子CCL3,CCL5的表达 | 第48-52页 |
| 2.3.4 HBV DNA片段长度不影响刺激上调趋化因子反应的效果 | 第52-53页 |
| 2.3.5 HBV DNA刺激导致的趋化因子上调具有时间和剂量依赖性 | 第53-54页 |
| 2.3.6 胞质转移的Ku70/80复合物识别HBV DNA | 第54-61页 |
| 2.3.7 干扰Ku70表达影响趋化因子的表达 | 第61-63页 |
| 2.3.8 DNA-PKcs参与Ku70/80识别DNA的传递信号 | 第63-65页 |
| 2.3.9 cGAS-STING信号通路未直接参与Ku70/80识别信号通路 | 第65-66页 |
| 2.3.10 Ku70/80通过PARP1分子传递信号 | 第66-76页 |
| 2.3.11 IRF1是Ku70/80识别HBV DNA上调趋化因子的关键转录因子 | 第76-80页 |
| 2.4 总结与讨论 | 第80-85页 |
| 参考文献 | 第85-107页 |
| 附录 | 第107-111页 |
| 抗体使用表 | 第107-109页 |
| PCR引物序列 | 第109-110页 |
| siRNA序列 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 在读期间的研究成果 | 第113页 |
