| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| 1.1 引言 | 第11-12页 |
| 1.2 重金属污染的原因及近况 | 第12-14页 |
| 1.2.1 土壤中重金属污染的原因及近况 | 第13页 |
| 1.2.2 农作物中重金属污染的原因及近况 | 第13页 |
| 1.2.3 水体中重金属污染的原因及近状 | 第13-14页 |
| 1.3 主要的重金属污染分析 | 第14-16页 |
| 1.3.1 铬 | 第14-15页 |
| 1.3.2 铅 | 第15页 |
| 1.3.3 汞 | 第15页 |
| 1.3.4 镉 | 第15页 |
| 1.3.5 砷 | 第15-16页 |
| 1.4 仪器检测法 | 第16-18页 |
| 1.4.1 原子吸收光谱法 | 第16页 |
| 1.4.2 紫外—可见光分光光度法 | 第16-17页 |
| 1.4.3 原子荧光光谱法 | 第17页 |
| 1.4.4 电化学法 | 第17页 |
| 1.4.5 电感耦合等离子质谱法 | 第17-18页 |
| 1.5 免疫检测法 | 第18-21页 |
| 1.5.1 重金属KinExA免疫检测法 | 第18页 |
| 1.5.2 重金属免疫亲和色谱法 | 第18-19页 |
| 1.5.3 重金属胶体金免疫层析技术 | 第19页 |
| 1.5.4 重金属一步竞争法免疫检测 | 第19-20页 |
| 1.5.5 重金属间接竞争性ELISA检测法 | 第20-21页 |
| 1.6 抗体的选择 | 第21-22页 |
| 1.7 本课题研究方法及意义 | 第22-23页 |
| 1.7.1 本课题研究方法及目的 | 第22页 |
| 1.7.2 本课题研究意义 | 第22-23页 |
| 1.8 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 重金属完全抗原的制取 | 第24-32页 |
| 2.1 前言 | 第24页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第24-26页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第25页 |
| 2.2.3 主要实验试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.3.1 制取Cr的完全抗原 | 第26-27页 |
| 2.3.2 验证Cr的完全抗原 | 第27-28页 |
| 2.4 结果与分析 | 第28-31页 |
| 2.4.1 SDS-PAGE鉴定 | 第28-30页 |
| 2.4.2 抗原浓度测定 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 Cr-纳米抗体库及单克隆抗体的筛选 | 第32-48页 |
| 3.1 前言 | 第32-33页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第33-35页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第33页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第33-34页 |
| 3.2.3 主要实验试剂的配制 | 第34-35页 |
| 3.2.4 实验用细胞和噬菌体 | 第35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-41页 |
| 3.3.1 噬菌体的扩增与纯化 | 第35-37页 |
| 3.3.2 Cr-纳米抗体库的筛选和富集 | 第37-39页 |
| 3.3.3 获得的抗体库特异性检测 | 第39-40页 |
| 3.3.4 噬菌体单克隆的挑选 | 第40页 |
| 3.3.5 单克隆上清液ELISA初验证 | 第40-41页 |
| 3.3.6 单克隆抗体ELISA验证 | 第41页 |
| 3.4 结果与分析 | 第41-47页 |
| 3.4.1 辅助噬菌体扩增结果 | 第41-42页 |
| 3.4.2 原始抗体库的扩增 | 第42页 |
| 3.4.3 抗体库富集度检测 | 第42页 |
| 3.4.4 抗体库特异性检测 | 第42-43页 |
| 3.4.5 单克隆上清液ELISA验证 | 第43-46页 |
| 3.4.6 纯化后单克隆ELISA验证 | 第46-47页 |
| 3.5 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 Cr-纳米抗体的特性测定 | 第48-54页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第48-50页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第48页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第48-49页 |
| 4.1.3 主要实验试剂的配置 | 第49-50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-52页 |
| 4.2.1 阳性单克隆的扩增与纯化 | 第50页 |
| 4.2.2 纳米抗体与重金属—螯合物的间接竞争性ELISA | 第50-52页 |
| 4.2.3 针对Cr-DTPA的单克隆抗体编码序列的测定 | 第52页 |
| 4.3 结果与分析 | 第52-53页 |
| 4.3.1 纳米抗体与重金属—螯合物的间接竞争性ELISA | 第52页 |
| 4.3.2 Cr-DTPA-VHH 4-63抗体编码序列的测定 | 第52-53页 |
| 4.4 小结 | 第53-54页 |
| 第五章 初步建立间接竞争性ELISA检测法 | 第54-62页 |
| 5.1 仪器与试剂 | 第54-55页 |
| 5.1.1 实验仪器 | 第54页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第54-55页 |
| 5.1.3 主要实验试剂的配制 | 第55页 |
| 5.2 实验方法 | 第55-58页 |
| 5.2.1 运用棋盘法确定各反应试剂反应浓度 | 第55-56页 |
| 5.2.2 DTPA浓度对抗体的影响 | 第56-57页 |
| 5.2.3 抗体标准抑制曲线的绘制 | 第57页 |
| 5.2.4 抗体与其他金属离子的交叉试验 | 第57页 |
| 5.2.5 水样加标回收试验 | 第57-58页 |
| 5.3 结果与分析 | 第58-60页 |
| 5.3.1 运用棋盘法确定各反应试剂反应浓度 | 第58-59页 |
| 5.3.2 DTPA浓度对抗体的影响 | 第59页 |
| 5.3.3 抗体标准抑制曲线绘制 | 第59-60页 |
| 5.3.4 抗体与其他金属离子交叉实验 | 第60页 |
| 5.3.5 水样加标回收试验 | 第60页 |
| 5.4 小结 | 第60-62页 |
| 第六章 结论与展望 | 第62-64页 |
| 6.1 结论 | 第62页 |
| 6.2 展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 攻读学位期间论文专利情况及承担科研项目 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
