| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 丹参概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 丹参生物学特性 | 第10页 |
| 1.1.2 丹参的主要化学成分及药理活性 | 第10-11页 |
| 1.2 丹参酚酸类及丹参酮类活性成分生物合成途径研究现状 | 第11-16页 |
| 1.2.1 丹参酚酸类物质合成途径研究概况 | 第12-14页 |
| 1.2.2 丹参酮类化合物生物合成途径研究概况 | 第14-16页 |
| 1.3 MYB转录因子研究近况 | 第16-20页 |
| 1.3.1 MYB转录因子的发现 | 第17页 |
| 1.3.2 MYB转录因子的分类 | 第17-18页 |
| 1.3.3 植物MYB转录因子的生物学功能 | 第18-20页 |
| 1.3.4 丹参MYB类转录因子 | 第20页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
| 第2章 丹参SmMYB4过表达与RNAi干涉载体构建 | 第22-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第22页 |
| 2.1.3 试剂及药品 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 丹参总RNA抽提与反转录 | 第24页 |
| 2.2.2 SmMYB4过表达以及干涉片段的克隆 | 第24-26页 |
| 2.2.3 SmMYB4过表达及RNAi沉默载体构建 | 第26-28页 |
| 2.3 结果分析 | 第28-29页 |
| 2.3.1 SmMYB4过表达及干涉片段克隆 | 第28页 |
| 2.3.2 SmMYB4过表达及干涉载体构建 | 第28-29页 |
| 2.4 小结 | 第29-30页 |
| 第3章 丹参SmMYB4转基因株系获得 | 第30-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-32页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 3.1.2 菌株及质粒 | 第30页 |
| 3.1.3 试剂及药品 | 第30-32页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 SmMYB4过表达和RNAi沉默载体转化农杆菌GV3101 | 第32-33页 |
| 3.2.2 叶盘转化法转化丹参 | 第33-34页 |
| 3.3 丹参SmMYB4转基因植株分子水平检测 | 第34-36页 |
| 3.3.1 转基因植株DNA水平的检测 | 第34-35页 |
| 3.3.2 转基因植株RNA表达水平的检测 | 第35-36页 |
| 3.4 结果分析 | 第36-39页 |
| 3.4.1 农杆菌转化子鉴定 | 第36页 |
| 3.4.2 转基因植株DNA及RNA水平检测 | 第36-39页 |
| 3.5 讨论 | 第39-40页 |
| 第4章 丹参SmMYB4转基因株系总酚及总黄酮含量测定 | 第40-44页 |
| 4.1 实验材料 | 第40页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 4.1.2 试剂及药品 | 第40页 |
| 4.2 实验仪器 | 第40页 |
| 4.3 实验方法 | 第40-42页 |
| 4.3.1 样品制备 | 第40-41页 |
| 4.3.2 总酚酸含量的测定 | 第41页 |
| 4.3.3 总黄酮含量的测定 | 第41-42页 |
| 4.4 结果分析 | 第42-43页 |
| 4.4.1 总酚酸含量检测结果 | 第42页 |
| 4.4.2 总黄酮含量检测结果 | 第42-43页 |
| 4.5 讨论 | 第43-44页 |
| 第5章 丹参SmMYB4转基因株系酚酸及丹参酮含量测定 | 第44-52页 |
| 5.1 实验材料 | 第44页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第44页 |
| 5.1.2 试剂与药品 | 第44页 |
| 5.2 实验仪器 | 第44-45页 |
| 5.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 5.3.1 标准品溶液的配制 | 第45页 |
| 5.3.2 样品制备 | 第45页 |
| 5.3.3 HPLC条件 | 第45-46页 |
| 5.3.4 线性关系和检测范围 | 第46页 |
| 5.3.5 丹参HPLC方法学验证 | 第46-47页 |
| 5.3.6 总丹参酮含量的测定 | 第47页 |
| 5.4 结果及分析 | 第47-50页 |
| 5.4.1 转基因株系次生代谢产物含量 | 第47-49页 |
| 5.4.2 转基因丹参根中总丹参酮的含量 | 第49-50页 |
| 5.5 讨论 | 第50-52页 |
| 第6章 丹参SmMYB4转基因株系相关酶基因表达量测定 | 第52-58页 |
| 6.1 实验材料 | 第52页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 6.1.2 试剂及药品 | 第52页 |
| 6.1.3 实验仪器 | 第52页 |
| 6.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 6.3 结果分析 | 第53-55页 |
| 6.3.1 丹参酚酸类物质合成途径酶基因表达变化 | 第53-54页 |
| 6.3.2 丹参酮类物质合成途径酶基因表达变化 | 第54-55页 |
| 6.4 讨论 | 第55-58页 |
| 第7章 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 读硕士学位期间研究成果 | 第72页 |
