摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-19页 |
1.1 昆虫气味结合蛋白概述 | 第8-17页 |
1.1.1 昆虫气味结合蛋白的分子特征 | 第8-9页 |
1.1.2 昆虫气味结合蛋白的结构特征 | 第9-11页 |
1.1.3 昆虫气味结合蛋白的分类 | 第11-12页 |
1.1.4 昆虫气味结合蛋白的表达与分布 | 第12页 |
1.1.5 昆虫气味结合蛋白的研究方法 | 第12-17页 |
1.2 莲草直胸跳甲概述 | 第17-18页 |
1.3 立题依据及研究内容 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-30页 |
2.1 莲草直胸跳甲的饲养与试验样本的收集 | 第19页 |
2.2 试验试剂 | 第19-20页 |
2.3 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.4 莲草直胸跳甲气味结合蛋白基因的筛选 | 第21页 |
2.5 莲草直胸跳甲气味结合蛋白基因的克隆 | 第21-24页 |
2.5.1 触角RNA的提取 | 第21页 |
2.5.2 cDNA的合成 | 第21-22页 |
2.5.3 引物设计和合成 | 第22页 |
2.5.4 PCR扩增 | 第22-23页 |
2.5.5 PCR产物切胶回收 | 第23页 |
2.5.6 感受态的制备 | 第23-24页 |
2.5.7 连接转化 | 第24页 |
2.6 莲草直胸跳甲气味结合蛋白不同组织的表达分析 | 第24-26页 |
2.6.1 RNA的提取 | 第24页 |
2.6.2 cDNA的合成 | 第24页 |
2.6.3 qPCR引物的设计和合成 | 第24-25页 |
2.6.4 qPCR反应 | 第25-26页 |
2.6.5 数据处理 | 第26页 |
2.7 莲草直胸跳甲气味结合蛋白的原核表达 | 第26-30页 |
2.7.1 表达引物的设计和合成 | 第26页 |
2.7.2 PCR扩增 | 第26-27页 |
2.7.3 连接转化 | 第27页 |
2.7.4 质粒提取 | 第27-28页 |
2.7.5 双酶切 | 第28页 |
2.7.6 重组质粒的诱导表达 | 第28-29页 |
2.7.7 表达产物的SDS-PAGE检测 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-46页 |
3.1 莲草直胸跳甲气味结合蛋白的筛选 | 第30-36页 |
3.2 莲草直胸跳甲气味结合蛋白基因克隆的结果及分析 | 第36-40页 |
3.2.1 触角RNA的电泳检测 | 第36页 |
3.2.2 PCR扩增产物 | 第36页 |
3.2.3 菌液PCR验证结果 | 第36-37页 |
3.2.4 气味结合蛋白氨基酸序列分析 | 第37-39页 |
3.2.5 气味结合蛋白的理化性质 | 第39-40页 |
3.3 莲草直胸跳甲气味结合蛋白组织表达分析 | 第40-42页 |
3.4 莲草直胸跳甲气味结合蛋白原核表达结果 | 第42-46页 |
3.4.1 成熟肽基因编码区的PCR扩增 | 第42页 |
3.4.2 重组克隆载体菌液PCR鉴定 | 第42-43页 |
3.4.3 重组克隆载体双酶切分析 | 第43页 |
3.4.4 重组表达载体鉴定 | 第43-45页 |
3.4.5 原核诱导产物SDS-PAGE检测 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
5 结论 | 第49页 |
6 进一步研究的建议 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
Abstract | 第57页 |
攻读硕士期间的工作小结 | 第59-61页 |
致谢 | 第61页 |