| 摘要 | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第7-8页 |
| 1 背景介绍 | 第8-16页 |
| 1.1 生物柴油研究概况 | 第8-10页 |
| 1.1.1 生物柴油简介 | 第8页 |
| 1.1.2 生物柴油的国内外发展状况 | 第8-9页 |
| 1.1.3 生物柴油的生产方法及生产原料 | 第9-10页 |
| 1.2 植物油脂基因工程 | 第10-13页 |
| 1.2.1 植物体中脂类的合成过程 | 第10页 |
| 1.2.2 脂肪酸合成过程中的关键酶及转录调控因子 | 第10-13页 |
| 1.3 油体及油体钙蛋白概述 | 第13-15页 |
| 1.3.1 油体的基本特征 | 第13页 |
| 1.3.2 油体钙蛋白的结构特点及表达特征 | 第13-15页 |
| 1.4 烟草生物反应器的应用 | 第15页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-27页 |
| 2.1 材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第16-17页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第17页 |
| 2.1.3 主要仪器和试剂 | 第17-18页 |
| 2.2 方法 | 第18-27页 |
| 2.2.1 蓖麻Caleosin基因的克隆 | 第18-21页 |
| 2.2.2 蓖麻Caleosin基因的半定量表达分析 | 第21-22页 |
| 2.2.3 植物表达载体构建 | 第22-24页 |
| 2.2.4 农杆菌GV3101的遗传转化及阳性克隆的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.5 烟草叶片最适潮霉素筛选浓度的确定 | 第25页 |
| 2.2.6 烟草的遗传转化 | 第25-26页 |
| 2.2.7 转基因植株的PCR鉴定 | 第26页 |
| 2.2.8 转基因烟草的RT-PCR检测 | 第26页 |
| 2.2.9 烟草叶片脂肪酸含量的测定 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-39页 |
| 3.1 蓖麻Caleosin基因的克隆 | 第27-29页 |
| 3.1.1 蓖麻种子总RNA的提取及Caleosin基因的克隆 | 第27页 |
| 3.1.2 蓖麻Caleosin蛋白结构的生物信息学预测 | 第27-29页 |
| 3.1.3 TA克隆的检测 | 第29页 |
| 3.2 蓖麻Caleosin基因的半定量表达分析 | 第29-32页 |
| 3.2.1 蓖麻RNA的提取 | 第29-30页 |
| 3.2.2 PCR扩增反应的循环数筛选 | 第30-31页 |
| 3.2.3 蓖麻Caleosin基因的半定量分析 | 第31-32页 |
| 3.3 重组植物表达载体pCAMBIA-RcClo的构建 | 第32-33页 |
| 3.4 农杆菌的转化及鉴定 | 第33-34页 |
| 3.5 潮霉素筛选浓度的确定 | 第34页 |
| 3.6 转基因烟草植株的获得 | 第34-36页 |
| 3.6.1 烟草转基因组织培养过程 | 第34-35页 |
| 3.6.2 不同潮霉素浓度对转基因烟草生长和生根的影响 | 第35-36页 |
| 3.7 转基因烟草的PCR鉴定 | 第36-37页 |
| 3.8 转基因烟草的RT-PCR鉴定 | 第37页 |
| 3.9 烟草转基因植株叶片中油脂含量的测定 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| Abstract | 第48页 |
| 致谢 | 第49页 |
