| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-17页 |
| ·脊椎动物肾脏发育概述 | 第12页 |
| ·斑马鱼作为模式生物研究前肾节段化发育的优势 | 第12-13页 |
| ·斑马鱼前肾发育的基本过程 | 第13页 |
| ·肾脏节段化发育过程中的相关信号通路 | 第13-16页 |
| ·视磺酸（RA）信号通路 | 第13-14页 |
| ·Notch信号通路 | 第14-15页 |
| ·Wnt信号通路 | 第15页 |
| ·Hippo信号通路 | 第15-16页 |
| ·展望 | 第16-17页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第17-35页 |
| ·实验动物的品系和饲养 | 第17页 |
| ·仪器、试剂和耗材 | 第17-18页 |
| ·试剂配方 | 第18-19页 |
| ·质粒和菌株 | 第19-20页 |
| ·胚胎的收集和培养 | 第20页 |
| ·斑马鱼total RNA的制备和cDNA文库的构建 | 第20-21页 |
| ·斑马鱼total RNA的制备（Trizol法） | 第20页 |
| ·斑马鱼c DNA文库的构建 | 第20-21页 |
| ·分子克隆常用实验材料的制备 | 第21-22页 |
| ·E.coli（大肠杆菌）感受态细胞的制备 | 第21页 |
| ·Taq DNA聚合酶的制备与纯化 | 第21-22页 |
| ·目的基因的TA克隆 | 第22-25页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第22页 |
| ·目的片段的纯化 | 第22-23页 |
| ·目的基因与T载体连接 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的大量制备（化学转化法） | 第24-25页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定（Colony PCR） | 第25-26页 |
| ·重组质粒的制备与纯化 | 第26页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第26页 |
| ·RNA探针的制备 | 第26-28页 |
| ·RNA探针线性化模板的制备 | 第26-27页 |
| ·线性化模板的纯化 | 第27页 |
| ·RNA探针的合成和纯化 | 第27-28页 |
| ·全胚RNA原位杂交（Whole Mount RNA in situ Hybridization） | 第28-30页 |
| ·胚胎的固定 | 第28-29页 |
| ·原位杂交 | 第29-30页 |
| ·全胚免疫组化 | 第30-31页 |
| ·胚胎的固定 | 第30页 |
| ·全胚免疫组化 | 第30-31页 |
| ·冰冻切片 | 第31-32页 |
| ·胚胎的固定 | 第31页 |
| ·材料的平衡 | 第31页 |
| ·材料的包埋 | 第31-32页 |
| ·冰冻切片 | 第32页 |
| ·冰冻切片免疫组化 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE和Western Blot | 第32-35页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE | 第33-34页 |
| ·Western Blot | 第34-35页 |
| 第三部分 实验结果与讨论 | 第35-50页 |
| ·β-Catenin在斑马鱼前肾后端富集表达，并受经典Wnt信号调控 | 第35-37页 |
| ·斑马鱼前肾节段化后 β-Catenin水平变化可导致节段化缺陷 | 第37-44页 |
| ·斑马鱼前肾节段化后 β-Catenin水平变化可导致后端节段化缺陷 | 第37-40页 |
| ·斑马鱼前肾节段化后 β-Catenin下调后再恢复可挽救后端节段化表型 | 第40-41页 |
| ·斑马鱼前肾节段化后不同时期改变 β-Catenin水平可导致后端节段化缺陷 | 第41-43页 |
| ·斑马鱼前肾节段化后 β-Catenin水平变化可导致其它节段分化缺陷 | 第43-44页 |
| ·斑马鱼前肾节段化前 β-Catenin水平变化可导致节段化缺陷 | 第44-47页 |
| ·斑马鱼前肾节段化初步完成时间的确定 | 第44-45页 |
| ·斑马鱼前肾节段化前 β-Catenin水平变化可导致后端节段化缺陷 | 第45-46页 |
| ·斑马鱼前肾节段化前 β-Catenin水平变化可导致其它节段分化缺陷 | 第46-47页 |
| ·讨论与分析 | 第47-50页 |
| ·β-Catenin在斑马鱼胚胎期的时空表达谱及其功能 | 第47-48页 |
| ·β-Catenin对斑马鱼胚胎期前肾节段化的调控功能 | 第48-49页 |
| ·展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
